Park, Geun-Tae;Kim, Ho-Sung;Son, Hong-Ju;Lee, Gun;Park, Sung-Hoon;Lee, Sang-Jun
Journal of Life Science
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v.12
no.5
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pp.561-565
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2002
Pseudomonas sp. EL-041 was previously isolated from phenol-acclimated activated sludge. This bacterium was capable of degrading phenol and cometabolizing trichloroethylene (TCE). In this study, we report the identification of trichloroethylene- degrading enzyme in Pseudomonas sp. EL-041 by the investigation of enzyme activity and DNA sequencing of specific phenol oxygenase gene. As the results of experiment, trichloroethylene-degrading enzyme in Pseudomonas sp. EL-041 was monooxygenase and suspected to phenol hydroxylase.
Kim, Ho-Seong;Park, Geun-Tae;Son, Hong-Ju;Park, Seong-Hun;Lee, Sang-Jun
Journal of Environmental Science International
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v.10
no.5
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pp.359-364
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2001
Pseudomanas sp. EL-04J was previously isolated from phenol-acclimated activated sludge. This bacterium was capable of degrading phenol and cometabolizing trichloroethylene (TCE). After precultivation in the mineral salts medium containing phenol as a sole carbon source, Pseudomonas EL-04J degraded 90% of TCE $25 \mu\textrm{M}$ within 20 hours. Thus, phenol-induced Pseudomonas sp. EL-04J cells can bdegrade TCE. Followsing a transient lag period, Pseudomonas sp. EL-04J cells degraded TCE at concentrations of at least $250 \mu\textrm{M}$ with no apparent retardation in rate, but the transformance capacity of such cells was limited and depended on the cell concentration. The degradation rate of TCE followed the Michaelis-Menten kinetic model. The maximum degradation ratio ($V_{max}$) and saturation constant ($K_{m}$) were $7nmo {\ell}/min{\cdot}mg$ cell protein and $11 \mu\textrm{M}$, respectively. Cometabolism of TCE by phenol fed experiment was evaluated in $50m {\ell}$ serum vial that contained $10m {\ell}$ of meneral sals medium supplemented with $10 \mu\textrm{M}$ TCE degradation was inhibited in the initial period of 1 mM phenol addition, but after that time Pseudomonas sp. EL-04J cells degraded TCE and showed cell growth.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.12
no.1
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pp.67-74
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2004
A bacterium which grow on phenol as an only carbon and energy source was isolated from the sewage sludge at Nangi municipal wastewater treatment plant in Seoul. This bacterium was found to be a Gram negative rod with high motility, and well grew on 0.05%, 0.1%, and 0.15% of phenol. No matching strain was found from the result of the BBL test. Phylogenetic analysis of the strain by comparison of the 16s-rDNA has revealed that this bacterium has 99% of similarity with Stenotrophomonas maltophilia strain of Xanthomonas group, which belongs t the Gamma (${\gamma}$) subdivision of Proteobacteria. This strain has also shown 98% of similarity with nitrogen fixing bacterium MAGDE3 and Pseudomonas cissicola strain, and 97% of similarity with Stenotrophomonas sp. LMG198 and Xanthomonas cucurbitae.
For the biological treatment of industrial wastewater containing high concentration of phenol, isolation and characterization of phenol - degrading bacterium were carried out. A bacterial strain P2 capable of degrading phenol was isolated from contaminated soils by enrichment culture technique and identified as the genus Rhodococcus by morphological, cultural, biochemical characteristics, and Biolog system. The optimal medium composition and cultural conditions for the growth and degradation of phenol by Rhodococcus sp. P2 were 0.1% of (NH$_4$)$_2$SO$_4$, 0.2% of KH$_2$PO$_4$, 0.25% of Na$_2$HPO$_4$ㆍ12$H_2O$, 0.2% of MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$, and 0.008% of CaC1$_2$ㆍ2$H_2O$ along with initial pH 8.5 at 3$0^{\circ}C$. Rhodococcus sp. P2 could grow with phenol as the sole carbon source up to 1,800 ppm in batch cultures, but did not grow in medium containing above 2,000 ppm of phenol. When 800 ppm phenol was given in the optimal media, Rhodococcus sp. P2 completely degraded it within 24 h. Meanwhile, 1,800 ppm of phenol was degraded within 9 days. Rhodococcus sp. P2 could utilize toluene, n-hexane, xylene and benzene as sole carbon source .
A bacterium which is resistant to both mercury and cadmium, and also capable of utilizing phenol as a carbon and energy source, was isolated from the Kumho River sediments near Kangchang Bridge, Taegu, Korea. The isolate was labeled Pseudomonas sp. KM10 and characterized. The bacteria grew in 4 mM $CdCl_2$and in $70{\mu}M$$HgCl_2$. The bacteria efficiently removed over 90% of 1 g/l phenol within 30 h. In the presence of 1.250 g/l phenol, the growth of the microorganism was slightly retarded and the microorganism could not tolerate 1.5 g/l phenol. Curing of plasmid from the bacteria was carried out to generate a plasmidless strain. Subsequent experiments localized the genes for phenol degradation in plasmid and the genes for mercury resistance and cadmium resistance on the chromosome. Dot hybridization and Southern hybridization under low stringent conditions were performed to identify the DNA homology. These results showed significant homologies between the some sequence of the chromosome of Pseudomonas sp. KM10 and merR of Shigella flexneri R 100, and between the some sequence of the chromosome of Pseudomonas sp. KM10 and cadA of Staphylococcus aureus pI258. The mechanism of cadmium resistance was efflux, similar to that of S. aureus pI258 cadA, and the mechanism of mercury resistance was volatilization, similar to that of S. flexneri R100 mer.
20 bacterial strains capable of growing on phenol minimal medium were isolated from soil and wastewater by the enrichment culture technique, and among them, one isolate which was the best in the cell growth was selected and identified as Bacillus sp. SH3 by its characteristics. Strain SH3 could grow with phenol as the sole carbon source up to 15 mM, but did not grow in minimal medium containing above 20 mM of phenol. The optimal conditions of temperature and initial pH for growth and phenol degradation were 30$^{\circ}$C and 7.5, respectively. This strain could grow on various aromatic compounds such as catechol, protocatechuic acid, gentisic acid, o-, m-, p-cresol, benzoic acid, p-hydroxybenzoic acid, anthranilic acid, phenyl acetate and pentachlorophenol, and the growth-limiting log P value of strain SH3 on organic solvents was 3.1. In batch culture, strain SH3 degraded 97% of 10 mM phenol in 48 hours. In continuous culture under the conditions of 20 mM of influent phenol concentration and 0.050 hr$^{-1}$ of dilution rate, the treatment rate of phenol was 94%.
A bacterial strain which utilizes phenol under denitrifying condition was isolated from the industrial waste water collected from the Chong-ju Industrial Complex. The strain was identified as Pseudomonas species from the morphological, physiological, and biochemical characteristics and designated as HL100. The strain can utilize phenol as the sole source of carbon and energy when nitrate is provided as the terminal electron acceptor. The isolated strain completely degraded 3 mM of phenol within 110 hour with concomitant reduction of nitrate to nitrite. The observed maximum doubling time was 20 hours. Under appropriate condition, complete reduction of nitrate to atmospheric N$_2$ was observed indicating that the isolated strain could perform complete steps of denitrification. The strain showed optimal growth at pH 7.0 and temperature of 37$^{\circ}C$ under denitrifying phenol-degrading condition. The strain can also utilize toluene as the sole carbon and energy source under the same growth condition. However, no growth was detected on xylene and benzene.
The effluents of chemical and petroleum industries often contain non-biodegradable aromatic compounds, with phenol being one of the major organic pollutants present among a wide variety of highly toxic organic chemicals. Phenol is toxic upon ingestion, contact, or inhalation, and it is lethal to fish even at concentrations as low as 0.005 ppm. Phenol biodegradation has been studied in detail using bacterial strains. However, these microorganisms suffer from substrate inhibition at high concentrations of phenol, whereby growth is inhibited. A phenol-degrading bacterium, P21, was isolated from oil-contaminated soil. The phenotypic characteristics and a phylogenetic analysis indicated the close relationship of strain P21 to Rhodococcus pyridinovorans. Phenol biodegradation by strain P21 was studied under shaking condition. The optimal conditions for phenol biodegradation by strain P21 were 0.09% $KNO_3$, 0.1% $K_2HPO_4$, 0.3% $NaH_2PO_4$, 0.015% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.001% $FeSO_4{\cdot}7H_2O$, initial pH 9, and $20-30^{\circ}C$, respectively. When 1,000 ppm of phenol was added to the optimal medium, the strain P21 completely degraded it within two days. Rhodococcus pyridinovorans P21 could grow in up to 1,500 ppm of phenol as the sole carbon source in a batch culture, but it could not grow in a medium containing above 2,000 ppm. Moreover, strain P21 could utilize toxic compounds, such as toluene, xylene, and hexane, as a sole carbon source. However, no growth was detected on chloroform.
A 6.1 kb Sph I fragment from the genomic DNA of Pseudomonas putida SM 25 was cloned into the veetor pUC19. The open reading frame of catB was found to consist of 1,122 nucleotides. The sequence alignment of the catB gene products from different kinds of bacteria revealed an overall identity ranging from 40 to 98%. The catC gene contained an open reading frame of 96 codons, from which a protein with a molecular mass of about 10.6 kDa was predicted. The amino acids in the proposed activesite region of CatC were found to be almost conserved, including the charged residues. Since the catBC genes in P. putida SM25 were tightly linked, the could be regulated under coordinate transcription, and transcribed from a single promoter located upstream of the catB gene, as in P. putida RBI.
In order to find the most fitted biodegradation model, biodegradation models to the initial 4-chlorophenol concentrations were investigated and had been fitted by the linear regression. The degrading bacterium, EL-091S, was selected among phenol-degraders. The strain was identified with Pseudomows sp. from the result of taxonomical studies. The optimal condition for the biodegradation was as fellows: secondary carbon source, concentration of ammonium nitrate, temperature and pH were 200mg/l fructose, 600 mg/l, $30^{\circ}C$ and 7.0 respectively. The highest degradation rate of the 4-chlorophenol was about 58% for 24 hours incubation on the optimal condition. Biodegradation kinetics model of 5 mg/l 4-Chlorophenol, 10 mg/l 4-chlorophenol and 50 mg/l 4-chlorophenol were fitted the zero order kinetics model, respectively. Key Words : 4-chlorophenol, Pseudomonas sp., zero order kinetics model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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