Betts, Jonathan W.;Wareham, David W.;Haswell, Stephen J.;Kelly, Stephen M.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.9
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pp.1322-1326
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2013
New antifungal agents are required to compensate for the increase in resistance to standard antifungal agents of Candida albicans, which is an important opportunistic fungal pathogen that causes minor infections in many individuals but very serious infections in those who are immune-compromised. In this study, combinations of theaflavin and epicatechin are investigated as potential antifungal agents and also to establish whether antifungal synergy exists between these two readily accessible and cost-effective polyphenols isolated from black and green tea. The results of disc diffusion assays showed stronger antibacterial activity of theaflavin:epicatechin combinations against C. albicans NCTC 3255 and NCTC 3179, than that of theaflavin alone. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of 1,024 ${\mu}g/ml$ with theaflavin and 128-256 ${\mu}g/ml$ with theaflavin:epicatechin combinations were found. The fractional inhibitory concentration indexes were calculated, and the synergy between theaflavin and epicatechin against both isolates of C. albicans was confirmed. Theaflavin:epicatechin combinations show real potential for future use as a treatment for infections caused by C. albicans.
To develop a new natural antibiotics from Koran plant resources for dealing with the current situation regarding the rapid increase in antibiotic-resistant pathogen, the in vitro inhibitory activities of essential oils from the young leaves of Glehnia littoralis (Umbelliferae) as well as its main constituents were evaluated against susceptible and resistant species of Streptococcus pneumoniae. The essential oil fraction of G. littoralis and its main components, $\alpha-and\;\beta-pinene$, exhibited significant inhibitory activities against the antibiotic-susceptible and resistant strains of S. pneumoniae, with MICs (minimum inhibiting concentrations) ranging from 4.0mg/ml to 16mg/ml. No remarkable differences were shown between the susceptible and resistant strains. Moreover, the disk diffusion test disclosed that these inhibitory activities were dosedependent. Furthermore, data from the checkerboard titer test with FICIs (fractional inhibiting concentration indices) from 0.15 to 0.28 indicated synergisms between norfloxacin and $\alpha-or\;{\beta}-pinene$ in activity against S. pneumoniae KCCM49629 and S. pneumoniae CCARM4059.
A self-assembled monolayer of protein G was fabricated to develop an immunosensor based on surface plasmon resonance (SPR), thereby improving the performance of the antibodybased biosensor through immobilizing the antibody molecules (lgG). As such, 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA) was adsorbed on a gold (Au) support, while the non-reactive hydrophilic surface was changed through substituting the carboxylic acid group (-COOH) in the 11-MUA molecule using 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrocholide (EDAC). The formation of the self-assembled protein G layer on the Au substrate and binding of the antibody and antigen were investigated using SPR spectroscopy, while the surface topographies of the fabricated thin films were analyzed using atomic force microscopy (AFM). A fabricated monoclonal antibody (Mab) layer was applied for detecting E. coli O157:H7. As a result, a linear relationship was achieved between the pathogen concentration and the SPR angle shift, plus the detection limit was enhanced up to 10$^2$ CFU/mL.
Effects of chitosan on growth of tomato plant, and suppression of Fusaruim wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici and late blight casued by Phytophthora infestans, were examined. Both late blight and fusarium wilt were suppressed by spray and irrigation of chitosan, respectively. Inhibition of mycelial growth was not greatly affected by molecular size of chitosan but, concentration dependent effects was observed. Ninty percent of P. infestans and 80% of F. oxysporum f. sp. lycopersici of mycelial growth was inhibited by 1,000 ppm of chitosan (MW 30,000~50,000) when amended in plate media. Induction of defense-related gene expression in plant by chitosan treatments were observed when chitosan treated tobacco and tomato RNA samples were hybridized with several defense-related genes as probes. The results revealed that $\beta$-1,3-glucanase and chitinase genes were strongly induced, while pathogenesis-related protein-1, 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase, anionic peroxidase, phenylalanine ammonia lyase genes were weakly induced by chitosan treatment. These results suggest that chitosan have dual effects on these host-pathogen interactions. Possible roles of chitosan in suppression of tomato diseases by inhibition of mycelial growth and activation of plant defense responses are discussed.
Water stress has become a major concern in agriculture. Korea suffers from limited agricultural water supply, and wastewater reuse has been recommended as an alternative solution.A study was performed to examine the effects of microorganism concentration in the ponded-water of a paddy rice field with reclaimed-water irrigation for evaluating the microbial risk to farmers and neighborhoodchildren.Most epidemiological studies were performed based on an upland field, and they may not directly applicable to paddy fields. Beta-Poisson model was used to estimate the microbial risk of pathogen ingestion. Their risk value increased significantly high level after irrigation and precipitation.It implies that agricultural activities such as plowing, and fertilizing, and precipitation need be practiced a few days after irrigation considering health risks. The results about field application of the microbial risk assessment using E. coli showed difference according to monitoring time and treatment plot. Result of the microbial risk assessment showed that risk values of ground-water and reclaimed secondary waste water irrigation were lower than directly use of wastewater treatment plants' effluent. This paper should be viewed as a first step in the application of quantitative microbial risk assessment of E. coli to wastewater reuse in a paddy rice farming.
Plants have developed a sophisticated battery of defence responses to protect themselves against attempted pathogen ingress. Manipulation of these defence mechanisms may provide significant opportunities for crop improvement. While plant resistance genes have had a long service history in plant breeding, they possess significant limitations. Recent advances are now providing significant insights into strategies designed to increase the field durability of this class of genes. Hypersensitive cell death is a common feature underlying the deployment of plant defence responses against biographic pathogens. In contrast, necrotrophic pathogens actively kill plant cells. Recently, transgenic plants have been developed that either promote or suppress cell death, providing resistance against either biotrophic or necrotrophic pathogens respectively. Methyl-jasmonate is a key signalling molecule in the establishment of resistance against some fungal pathogens. Increasing the concentration of this molecule in plant cells has been shown to increase resistance against Botrytis cineria, without significantly imparting plant growth or development. Due to the multifarious infection strategies employed by plant pathogens, how-ever, it is unlikely a single commercial product will prove a panacea for global disease control. Future stategies will more likely entail an integrated disease management approach.
Recently, antibiotic resistant genes (ARGs) in the environment are emerging as pollutants, since these genetic contaminants can eventually be transferred to human pathogens. The aim of this study was to develop the experimental model of antibiotic resistant gene (ARG) plasmid transfer as a function of various environmental conditions. For this purpose, the multi drug resistant plasmid pB10, which is known to be originally isolated from a wastewater treatment plant, was selected as a model transfer plasmid and Escherichia coli $DH5{\alpha}$ containing pB10 was used as a model donor. Pseudomonas aeruginosa, an opportunistic pathogen, was selected as the recipient for the conjugation experiment. When the donor and recipient were exposed to various stressors including antibiotics and heavy metal as a function of the concentrations (10, 100 and, 1000 ppb), statistically increased plasmid transfer rate was observed at a concentration of 10 ppb of tetracycline and sulfamethoxazole compared to control (no antibiotic exposure). Accordingly, the developed experimental ARG model by various stressor is a promising tool for evaluating the dissemination of ARGs by micro-contaminants in aquatic environment.
Arbuscular Mycorrhizal Fungi(AMF) is widespread symbiont forming mutualistic relationship with plant root in terrestrial forest in ecosystem. They provide improved absorption of nutrient and water, and enhance the resistance against plant pathogen or polluted soil, therefore AM fungi are important for survival and maintaining of individual or community of plant. For last decade, many studies about the functional variation of AM fungi on host plant growth response were showed that different geographic isolates, even same species, have different effect on host plant. However, little was known about functional variation of AM fungal isolates originated single population, which provide important insight about intraspecific diversity of AMF and their role in forest ecosystem. In this study, four AM fungal isolates of Rhizophagus clarus were cultured in vitro using transformed carrot (Daucus carota) root and they showed the difference between isolates in ontogenic characteristics such as spore density and hyphal length. The plant growth response by mycorrhizas were measured also. After 20 weeks from inoculation of these isolates to host plants, dry weight, Root:Shoot ratio, colonization rates and N, P concentration of host plant showed host plant was affected differently by AM fungal isolates. This results suggest that AM fungi have high diversity in their functionality in intraspecific level, even in same population.
Twenty plant extracts were tested against mycelial growth, sclerotium formatiom and dry weight of mycelium with sclerotia of Sclerotium rolfsii Sacc. The highest(90 mm) mycelial growth was measured in Adhatoda vasica, Tegetes erecta, Allium cepa, and Curcuma longa. The lowest(25 mm) was in Azadirachta indica. No mycelial growth was found in any concentration of cow, buffalo, and goat urine. The highest(90 mm) and the lowest(15 mm) mycelial growth were measured in Biomil and Urea, respectively. No mycelial growth was observed in Zinc. The highest(60 mm) and the lowest(2 mm) mycelial growth were recorded in Macuprex(Dodine; 65% WP) and Boron(100% Boric acid and 17% Boron) respectively. Mycelial growth was totally inhibited in Rovral(Iprodione; 50% WP).
Candida albicans is a major fungal pathogen in humans. In our previous study, we reported that an ethanol extract from Aucklandia lappa weakens C. albicans cell wall by inhibiting synthesis or assembly of both (1,3)-β-D-glucan polymers and chitin. In the current study, we found that the extract is involved in permeabilization of C. albicans cell membranes. While uptake of ethidium bromide (EtBr) was 3.0% in control cells, it increased to 7.4% for 30 min in the presence of the A. lappa ethanol extract at its minimal inhibitory concentration (MIC), 0.78 mg/ml, compared to uptake by heat-killed cells. Besides, leakage of DNA and proteins was observed in A. lappa-treated C. albicans cells. The increased uptake of EtBr and leakage of cellular materials suggest that A. lappa ethanol extract induced functional changes in C. albicans cell membranes. Incorporation of diphenylhexatriene (DPH) into membranes in the A. lappa-treated C. albicans cells at its MIC decreased to 84.8%, after 60 min of incubation, compared with that of the controls, indicate that there was a change in membrane dynamics. Moreover, the anticandidal effect of the A. lappa ethanol extract was enhanced at a growth temperature of 40℃ compared to that at 35℃. The above data suggest that the antifungal activity of the A. lappa ethanol extract against C. albicans is associated with synergistic action of membrane permeabilization due to changes in membrane dynamics and cell wall damage caused by reduced formation of (1,3)-β-D-glucan and chitin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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