This study aimed to develop a multiplex-touchdown PCR method to simultaneously detect 3 species of protozoan parasites, i.e., Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, and Cyclospora cayetanensis, the major causes of traveler's diarrhea and are resistant to standard antimicrobial treatments. The target genes included the Cryptosporidium oocyst wall protein for C. parvum, Glutamate dehydrogenase for G. lamblia, and 18S ribosomal RNA (18S rRNA) for C. cayetanensis. The sizes of the amplified fragments were 555, 188, and 400 bps, respectively. The multiplex-touchdown PCR protocol using a primer mixture simultaneously detected protozoa in human stools, and the amplified gene was detected in > $1{\times}10^3$ oocysts for C. parvum, > $1{\times}10^4$ cysts for G. lamblia, and > 1 copy of the 18S rRNA gene for C. cayetanensis. Taken together, our protocol convincingly demonstrated the ability to simultaneously detect C. parvum, G. lamblia, and C. cayetanenesis in stool samples.
Horizontal gene transfer (HGT) is the movement of genetic material between kingdoms and is considered to play a positive role in adaptation. $Cryptosporidium$$parvum$ is a parasitic protozoan that causes an infectious disease. Its genome sequencing reported 14 bacteria-like proteins in the nuclear genome. Among them, cgd2_1810, which has been annotated as CysQ, a sulfite synthesis pathway protein, is listed as one of the candidates of genes horizontally transferred from bacterial origin. In this report, we examined this issue using phylogenetic analysis. Our BLAST search showed that $C.$$parvum$ CysQ protein had the highest similarity with that of proteobacteria. Analysis with NCBI's Conserved Domain Tree showed phylogenetic incongruence, in that $C.$$parvum$ CysQ protein was located within a branch of proteobacteria in the cd01638 domain, a bacterial member of the inositol monophosphatase family. According to Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway, the sulfate assimilation pathway, where CysQ plays an important role, is well conserved in most eukaryotes as well as prokaryotes. However, the Apicomplexa, including $C.$$parvum$, largely lack orthologous genes of the pathway, suggesting its loss in those protozoan lineages. Therefore, we conclude that $C.$$parvum$ regained cysQ from proteobacteria by HGT, although its functional role is elusive.
Giardia lamblia, a waterborne parasitic protozoa causing diarrhea and gastroenteritis, is transmitted to humans from untreated and treated water in the form of cysts. The ingestion of G. lamblia cysts is followed by the excystation of the cysts to trophozoites and subsequent colonization of the upper small intestine. In this study, the in vitro conditions for upper small intestine. In this study, the in vitro conditions for G. lamblia encystation were investigated to enhance the efficiency of cyst conversion and the resulting cyst density. The trophozoite of G. lamblia was cultivated to the late exponential growth phase, resulting in a high density of over $6{\times}10^7{\;}cells/ml$. The effects of pH, bile content, and induction time were evaluated; A cyst conversion of over 25% and 107 time were evaluated; A cyst conversion of over 25% and 107 cysts/ml were routinely obtained using the optimized encystation conditions including a slightly slkaline pH, 10 to 15 mg/ml of bile concentration, and 48-50 h of induction time.
Plasmodium spp. in domestic and wild birds are microscopic, intracellular parasitic protozoa within the blood cells and tissues cause avian malaria. A 17-month-old Magellan penguin (Spheniscus magellanicus) with a clinical signs of anorexia, depression, and respiratory distress for 3 days was submitted to the Pathology Department of Veterinary Medicine, Cheju National University in October 2005. It was born and reared in the Jeju Island. Grossly, the liver was enlarged, pale and friable. The spleen was also enlarged with dark red coloration and friable. Histopathologically, the lesions in the liver were characterized by multifocal infiltration of macrophages and lymphocytes especially in perivascular regions. The schizonts of Plasmodium spp. contained up to 30 merozoites were found in numerous infiltrated mononuclear cells. Similarly, histiocytic cells were proliferated in red pulp of spleen and the schizonts were found in these cells. Numerous dark brown pigments were widely distributed in the liver and spleen. The result of the nested polymerase chain reaction clarified the causative agent of this case was Plasmodium spp.. This is the first report for the outbreak of avian malaria caused by Plasmodium spp. in a penguin that was born and reared in Jeju Island in Korea.
Feline parasites were investigated in the area of Suwon in Korea from September to October, 2003. Wild cat had spread to zoonotic parasites, these parasites could cause infection with a person. People have a lot of interest in parasite infection of wild cat. This article reviews rate of infection of a parasites and kind of a parasite of wild cats. We will report the critical characteristic features of parasites to a better understanding of the disease. The incidence rates of Toxocara cati, Trichuris felis, Ancylostoma braziliense and Capillaria sp were 37.0, 4.3, 1.1 and 1.1% in nematodes. Those of Taenia taeniaformis and Opisthorchis sp were 2.2 and 1.1% in cestode and trematode. Those of Isospora felis, Toxoplasma gondii, and Sarcocystis sp were 8.7, 9.8, and 2.2% in protozoa. Almost of these were zoonotic parasites without Isospora felis.
Nadzirah, Tengku-Idris Tengku Idzzan;Yik, Fong Mun;Ling, Lau Yee
Parasites, Hosts and Diseases
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제58권1호
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pp.1-5
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2020
Sarcocystosis was diagnosed worldwide by serodiagnostic tests utilising the whole parasite, for which the protozoa were maintained in vitro are more costly. In this study, antigenicity of Sarcocystis falcatula recombinant protein (rSfSAG4) was investigated towards the local communities of Pangkor and Tioman Islands and its seroprevalence was surveyed in these islands. A total of 348 human sera were tested using rSfSAG4 by Western blot and ELISA. High prevalence of sarcocystosis was observed in Tioman Island (80.6%) than in Pangkor Island (50.0%) by Western blot. In ELISA, the seroprevalence observed in Tioman Island was 45.9%, whereas in Pangkor Island 63.0%. In other parasitic infections, the prevalence was 34.0% by Western blot and 46.0% by ELISA. In healthy control group, 7% by Western blot and 8% by ELISA showed positivity to rSfSAG4. It is suggested SfSAG4 is a candidate antigen to measure seroprevalence of sarcocystosis.
Stool and cellotape anal swab examinations were carried out in August 1997 on handicapped people at an institution located in Chorwon-gun, Kangwon-do, Korea. A total of 112 stool samples (78 males and 34 females) revealed three cases of Trichuris trichiura infection and one case of Enterobius vermicularis infection. Other helminth eggs were not detected. The overall prevalence rate was 35.7% (38.5% for males and 29.4% for females). More than two different kinds of parasites were found in 42.0% of the positive stool samples (17 cases). The infection rates for protozoan cysts are as follow : Entamoeba coli (25.0%), E. histoIUtica (1.8%), Endolinax nana (21.4%), Iodoamoeba butschlii (1.8%) and Giardia lamblia (0.9%). In cellotape anal swab examinations (165 samples), the prevalence rate of E. vemicularis was 20.6% (25.7% of males and 9.6% of females). In conclusion, the handicapped people in the institution showed higher infection rates of protozoan parasites and E. vemicularis, possibly due to more accessibility to the infection.
배경: 본 연구는 1970년 때부터 현재까지 우리나라의 기생충 감염률의 변화와 관리에 대한 고찰은 자연치유적 관점에서도 필요하다고 본다. 목적: 연구 목적은 감염률이 어떠한 방법에 따라서 감소율의 변화가 현재까지 진행되었는지를 고찰해보는 것이었다. 방법: 문헌 조사를 하였다. 결과: 우리나라는 1970년대까지는 기생충 감염률이 가장 높은 국가 중 하나였다. 감염률을 관리하기 위하여 1966년에는 기생충병 예방법을 제정하였고, 1969년부터 전국적인 기생충 관리 국가사업을 전체 학생을 대상으로 1년에 2회 전체 기생충 충란 양성자에 대한 치료를 1995년까지 수행하였다. 정부는 한국기생충박멸협회에 위탁하여 구충 박멸사업을 2년 간격으로 1971년~2012년까지 8차례를 전국 기생충감염 실태조사를 하였다. 그 결과로 1971년에는 전체 기생충 충란 양성률이 84.3%이었으나 2012년에는 2.6%로 감소하였다. 회충, 폐흡충, 조충 및 장내 원충류는 전국적으로 매우 감소하였다. 결론: 우리나라에서의 성공적인 기생충 관리는 국가적 경제성장력의 증진과 동시에 기생충박멸에 대한 사회적 합의와 개선된 전문적인 기생충 예방지침과 유효한 구충제 공급 등이 체계적으로 관리하여 성공적인 효과를 이루었다고 판단한다. 그리고 자연치유적 관점에서도 중요하다고 생각한다.
한국산 담수어류에 기생하는 섬모충류를 조사하기 위해 본 연구를 시행하였으며, 본 논문에서는 수온 $22^{\circ}C$에서 붕어(Carassius carassius)로 부터 Chilodonella 속 기생성 섬모충을 검출하여 동정 분류하였다. 감염어의 체표, 지느러미 및 아가미에 무수히 많은 섬모충이 관찰되었으며 감염 부위에 과도한 점액이 분비된 것을 볼 수 있었다. 그리고 빈사 상태의 병어에서는 궤양이 형성된 것을 볼 수 있었다. 감염된 붕어로 부터 검출된 Chilodonella 충은 그 모양이 타원형으로 후면의 가장자리에 notch(V자형 새김)가 없고 배복(背腹) 방향으로 편평하였다. 충체의 길이는 30-$45{\mu}m$이며 폭은 15-$30{\mu}m$인 것으로 계측되었으며 가장자리의 섬모열은 왼쪽과 오른쪽이 각각 3-5열 이었다. 그리고 아치 모양의 오른쪽 섬모열은 직선의 왼쪽 섬모열보다 길이가 더 긴 것으로 나타났다. 충체 내부에는 직경 8-$15{\mu}m$의 둥근 대핵과 직경 2-$4{\mu}m$의 소핵이 있었으며, 복면(腹面) 앞부분에 있는 세포구는 충체 표면에서 직접 밖으로 열리며 세포인두와 연결된 것으로 관찰되었다. 세포구를 둘러싸고 있는 세포 인두는 10-16 가닥의 간상체(桿狀體)양 홈으로 이루어져 있으며 안쪽 끝이 굽어져 있는 것으로 관찰되었다. 충체는 2개의 수축포를 가진 것으로 관찰되었으며 각각 오른쪽 앞끝과 왼쪽 뒤끝에 위치했다. 그리고 수온 $22^{\circ}C$에서 이 기생충의 번식은 단순한 이분열을 나타내었다. 이상의 결과로 부터 이 기생충은 Chilodonella hexasticha(Kiernik, 1909)로 분류할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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