Background: There are increasing neuro-degenerative disorders with aging. Paeoniae Radix(PR) possesses various pharmacological effects such as sedative, analgesic, anti-inflammatory, anti-stress and neuro-protective actions. Also antiaging and anti-cancer effects of PR were reported. Our purpose was to investigate whether PR is useful on the treatment of Parkinson's disease, one of the neuro-degenerative disorders. Objective: We investigated whether Paeonia Radix possesses a protective effect against 1-methyl-4 phenylpyridine(MPP+)-induced cytotoxicity in neuronal cells. Methods: 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay, flow cytometry, DNA fragmentation assay, reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR), and Western blotting were performed on SK-N-MC neuroblastoma cells. Results: Cells treated with MPP+ exhibited several apoptotic features, while cells pre-treated with Paeonia Radix prior to MPP+ exposure showed s decrease in the occurrence of apoptotic features. Conclusions: These results suggest that Paeonia Radix may exert a protective effect against MPP+-induced apoptosis in SK-N-MC neuroblastoma cells.
Previously, a methanol extract from seeds of Paeonia lactiflora was shown to have a potent inhibitory activities against tyrosinase and soybean lipoxygenase (SLO). Seven stilbenes, trans-resveratrol-4-Ο-$\beta$-D-glucoside, trans resveratrol, trans-$\varepsilon$-viniferin, cis-$\varepsilon$-viniferin, gnetin H, suffruticosol A and B were isolated from the seeds as active principles for inhibition of the enzymatic activity. Among them, the resveratrol trimer, gnetin H exhibited the most potent inhibitory activities against tyrosinase and SLO, respectively. Additionally, the resveratrol dimers, trans-$\varepsilon$-viniferin and cis-$\varepsilon$-viniferin exhibited significant inhibitory activity against the two oxidative enzymes. Meanwhile, three other stilbene derivatives, such as trans-resveratrol, suffruticosol A and suffruticosol B had also weak inhibition activity. The least inhibitory activity was observed in transresveratrol-4-Ο-$\beta$-D-glucoside. These results suggest that resveratrol dimers and trimer in the seeds of Paeonia lactiflora are potentially useful therapeutic agents against pathological disorders such as hyperpigmentation and inflammation.
Compositions of four kinds of products inhibit aging and protect many kinds of disease through eliminating. These compositions inhibit growth of harmful bacteria. such as Bacteroides fragilis. Clostridium perfringens. Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes. Vibrio parahaemolyticus etc. Bacteroides fragilis was controlled by mixing SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+CRATAEGI FRUCTUS+PAEONIA JAPONICA+SCHIZANDRAE FRUCTUS. SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+CRATAEGI FRUCTUS+PAEONIA JAPONICA+CORNI FRUCTUS. etc. and Clostridium perfringens was SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+PHELLODENDRI CORTEX+EPIMEDII HERBA+ASTRAGALI RADIX. SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+EPIMEDII HERBA +ASTRAGALI RADIX+GLYCYRRHIZAE RADIX.ste. Listeria monocytogenes was NELUMBO NUCLFERA GAERTNER+SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+COPTIDIS RHIZOMA+PAEONIA JAPONICA, NELUMBO NUCLFERA GAERTNER+SCUTELLARIA BAICALENSIS GEORGE+COPTIDIS RHIZOMAtSOPHORAE FLOS. etc. and Vibrio parahaemolyticus was ACANTHODANACIS CORTEX +ASTRAGALI RADIX+PHELLODENDRI CORTEX+COPTIDIS RHIZOMA ACANTHODANACIS CORTEX +ASTRAGALI RADIX + PHELLODENDRI CORTEX+PAEONIA JAPONICA. We expected it as a functional food economical and easy type of taking.
본 연구는 의성작약(Paeonia lactiflora)의 가공공정별 생리활성과 성분 변화를 확인하였으며 이에 따라 최적의 가공공볍을 찾아 추후 제품생산에 자료를 제공하고자 한다. 본 연구에 사용된 작약은 의성에서 생산되는 의성작약(Paeonia lactiflora)을 사용하였으며 가공방법으로는 거피를 제거한 것과 제거하지 않은 것을 절단하여 건조 후 사용하였다. 추출 샘플로는 가공한 작약을 술에 담가 볶은 것(주초)과 볶은 것(초), 건조 한 것 세 가지로 나누어 추출하였다. 추출방법으로는 온도별 열수추출과 농도별 알코올추출을 진행하였다. 온도별 열수추출은 100g의 작약과 500ml의 정제수를 60℃, 80℃, 100℃에 3h 추출하였고 농도별 알코올추출은 100g의 작약과 각각 500ml의 10%, 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올을 상온에 6d 추출하였다. 추출을 통해 얻은 샘플로 항산화활성과 주요성분함량을 조사하였다. 항산화활성은 1g/kg의 농도로 DPPH assay 실험을 활용하였다. 실험 결과 열수추출물의 경우 60℃에서 추출한 초가 가장 좋은 활성을 가지고 있었고, 에탄올추출에서는 90% 에탄올에서 추출한 초가 가장 활성이 높았다. 주요성분 분석으로는 Paeoniflorin과 Albiflorin의 함량을 조사하였는데 2g/kg로 샘플을 희석한 뒤 HPLC(Water 2695, Water 5996PDA, 칼럼-Xbridge C18)이용하여 분석한 결과 Paeoniflorin은 90% 에탄올에서 추출한 주초가 가장 많았고, Albiflorin은 90% 에탄올에서 추출한 초가 가장 많았다. 본 실험의 결과 항산화활성과 주요성분의 최적 조건은 90% 에탄올에서 추출한 초인 것을 확인하였으며, 추후 다양한 가공방법을 활용하여 생리활성검증과 주요성분 분석을 진행 할 예정이다.
The following is a taxonomic list of the specific features of external and internal shape and pattern analysis of Paeonia lactiflora PALL. and P. obovata MAX as the standard of herbal medicine. 1. External shape of original plant P. lactiflora has lancelate and elliptical leaves with no hair on both sides. It bears a flower bud at the shoot apex or leaf axil. On the other hand, P. obovata has obovate leaves with hair on the back side. It has a single flower bud at the shoot apex. 2. Physical characteristics of herbal states P. lactiflora has a bright and smooth external surface whose color is light red brown, light gray on its section and it is not easy to cut. On the other hand, P. obovata has a coarse external surface whose color is dark brown, pinkish on its section and it is easy to cut. 3. Physical characteristics of herbal state in currents Paeonia Radix Alba is brown on the external surface, and whitish on its section. On the other hand, Paeonia Radix Rubra is dark brown on the external surface, and yellowish-white on its section. 4. Internal characteristics Internal shape is correspond to that of Paeonia Radix described in literatures. Only P. lactoflora has a concentrated vascular bundle toward centeral cylinder. On the other hand, P. obovata has a scattered vascular bundle at the cortex. 5. Physicochemical pattern by HPLC Both P. lactoflora and P. obovata showed the same pattern. Paeoniforin, a main component, appears upon 13.68 in retention time (Rt) in both. In addition, both contain a large amount of paeoniflorin. Such results will, in the future, be used as basic source for the additional research, such as biological reactions and genetic discrimination.
경북 영천군 고경면 작약 재배농가의 정식 4년차인 의성품종(Paeonia lactiflora Pall.)을 1993년 6월 17일 수확하고, 굵기가 27mm 이상인 뿌리를 선별하여 paeoniflorin 추출방법 및 HPLC 분석조건에 대한 조사결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 초음파추출 및 환류추출법에 의한 작약근 추출물의 HPLC chromatogram은 상호간의 차이가 없었으며, 두 추출법 모두에서 paeoniflorin retention time이 10.2분대에 peak가 존재하였다. 2. 환류추출법에 의한 paeoniflorin 추출은 60min., 1회로 충분하였다. 3. 초음파추출에서 추출시간이 1hr.∼2hr. 까지의 paeoniflorin함량은 동일시간의 환류추출보다 각각 0.28%, 0.32% 낮게 평가되었고 3hr.∼4hr.의 추출에서는 두 방법간에 차이가 없었다. 4. 초음파 추출법은 분석작업이 용이함으로 다수계통의 상대적 비교시에는 환류추출법보다 효과적이다. 5. 작약추출물 중 paeoniflorin, albiflorin을 HPLC를 이용하여 분석할 때 높은 감도를 보이는 가장 효과적인 UV Detector 파장은 각각 240nm, 254nm이고, 동시정량시에는 254nm가 비교적 안정적이었다.
작약재배지에 도시 하수 오니를 시용하여 재배지토양 및 작약뿌리 중에 함유된 중금속함량을 조사한 결과는 다음과 같았다. 작약재배지에 하수오니를 시용하면 시용량이 증가할수록 수량과 생육이 양호하였으며, 토양 중 총질소와 인산 함량이 증가하는 편이며 중금속 함량에는 차이가 없었다. 하수오니의 시용량을 증가하면 작약뿌리에 의한 무기성분 및 중금속 흡수량은 증가했으나 뿌리 중의 농도는 변화가 없었다. 결과적으로 도시 하수 오니도 유해물질이 낮으면 경작토에 처리하여도 무방하다.
작약의 methanol 추출물은 혈소판 활성 실험에서 혈소판 응집에 대해 강한 억제를 보였다. 활성성분은 chromatography방법을 사용하여 정제하였고 NMR과 기존의 Data로 분석하였다. Compound 1b는 benzoyloxypaeoniflorin과 동일한 구조임을 확인하였으며. compound 2e는 작약의 주성분인 paeoniflorin과 동일한 화학구조를 가졌으며 , compound 3a의 분석결과 구조적 유사성은 있으나 동일한 구조식은 확인 할 수 없었지만 collagen에서 응집억제활성이 90%이상의 뛰어난 활성을 나타내어 benzoyloxypaeoniflorin과 유사하게 benzoyl 기가 다른 작용기로 치환되었거나 Rl group이 다른 작용기로 치환된 형태로 추측하였다. Paeoniflorin이 collagen보다 thrombin에서 강한 억제를 보이는 것은 Ca/sup 2+/ chelate를 형성함으로 인해 calcium 대사산물이 파괴된 것으로 추측했다. Compound 3a는 paeoniflorin의 benzoyl 기에 있는 OH기나 paeoniflorin의 glycoside 5-carbon위치의 OH기 대신에 다른 작용기가 대사산물로의 역할을 수행했을 것으로 추정했다.
한국산 작약(Paeonia lactiflora Pall.) 뿌리를 사용하여 작약추출물(PLE)을 조제 후, 변패미생물에 대한 작약추출물의 항균력을 측정하였다. Paper disk 확산법에 의한 농도별 항균력 검사에서는 작약추출물이 농도에 비례하는 항균력을 나타내었다. 생육저해곡선의 측정에서는 50 ${\mu}g$/mL이상에서 미생물의 생육이 완전히 억제되는 것을 확인하였다. 열($100^{\circ}C$에서 45분처리) 및 pH(3~11)의 넓은 범위에도 항균력을 보여, 열 및 pH에 대한 작약추출물에 포함된 항균력의 우수한 안정성을 확인할 수 있었다. 전자현미경(SAM, TEM)에 의한 미생물생태변화의 관찰에서도 작약추출물의 항균물질이 세포벽 또는 세포막의 삼투기능을 상실시켜 미생물의 생리가 중단되고 억제되는 것을 확인하였다. 그리고 ${\beta}$-galactosidase의 효소활성측정결과 작약추출물은 미생물의 세포막 기능파괴를 심하게 초래하는 것으로 예상할 수 있었다.
Objectives : In this study, we investigated the effect of methyl gallate of Paeonia suffruticosa(Moutan Cortex Radicis) on inflammatory response in activated macrophages. Methods : RAW264.7 cells were incubated with different concentrations of methyl gallate of Paeonia suffruticosa for 30 min and then stimulated with or without LPS at indicated times. Cell toxicity was determined by MTT assay. The concentrations of nitric oxide (NO), prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) and inflammatory cytokines (TNF-$\alpha$, IL-6) were measured in culture medium by Griess assay, enzyme-immuno assay, and ELISA, respectively. The expressions of iNOS, COX-2 and cytokine mRNA and protein were determined by RT-PCR and Western blot, respectively. The $I{\kappa}-B{\alpha}$ degradation in cytosol and NF-${\kappa}B$ p65 translocation into nuclear of the cells were determined by Western blot. Results : Methyl gallate was significantly inhibited LPS-induced production of NO and PGE2 in RAW264.7 cells. Methyl gallate was also suppressed LPS-induced expression of iNOS and COX-2 mRNA and protein in the cells. Methyl gallate was inhibited LPS-induced production of TNF-$\alpha$ and IL-6 via suppression of their mRNA expressions. Methyl gallate blocked the NF-${\kappa}B$ pathway in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Conclusions : This study suggests that methyl gallate of Paeonia suffruticosa may have an antiinflammatory property through suppressing inflammatory mediator production in activated macrophages.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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