• BMB Reports
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• 제34권1호
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• pp.33-38
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• 2001

The human PTK6 (also known as Brk) polypeptide, which is deduced from its full-length cDNA, represents a non-receptor protein tyrosine kinase (PTK). It contains SH3, SH2, and tyrosine kinase catalytic domains that are closely related to Src family members. We generated an antihuman PTK6 antibody by immunizing rabbits with a PTK6-specific oligopeptide conjugated to BSA, which corresponds to 11 amino acid residues near the C-terminus. An immunoblot analysis with the antibody detected an expected 52-kDa band in various mammalian transformed cell lines. Immunoprecipitation and immunoblot analyses demonstrated that PTK6 is phosphorylated on the tyrosine residues) and interacts with approximately a 23-kDa tyrosine-phosphorylated polypeptide (most likely a substrate of PTK6) in breast carcinoma T-47D cells. An immunofluorescence analysis demonstrated that PTK6 is localized throughout the cytoplasm of T-47D cells. These results support a possible role for PTK6 in the intracellular signal transduction through tyrosine phosphorylation.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제30권5호
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• pp.1043-1046
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• 2009

Human protein tyrosine kinase-6 (PTK6) is a member of the non-receptor protein tyrosine kinase family and it is found in two-thirds of all breast tumors. Very recently, we proposed that the SH3 domain of PTK6 interacts with the linker region (Linker) between the SH2 and kinase domains, proving that the interaction between SH3 domain and Linker plays an important role in auto-inhibition mechanism. Residues from 1 to 191 corresponding region of SH3-SH2-Linker (SH32L) of PTK6 was cloned into the pET32a expression vector with Tobbaco etch virus (TEV) protease enzyme site by sequence homology and 3D structural model. The purified PTK6-SH32L was determined as a monomer conformation in solution. The amide proton resonances in the $^{15}N-^{1}H$ 2D-HSQC spectrum suggest that PTK6-SH32L possesses disordered structural region of the flexible/unstructured linker region. In addition, the backbone amide proton chemical shifts of the SH3 domain in the PTK6-SH32L differ from that of the independent domain, indicating that intra-molecular interaction between SH3 and Linker in the PTK6-SH32L is present.

• 생명과학회지
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• 제17권2호통권82호
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• pp.179-184
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• 2007

단백질 티로신 kinase인 PTK6는 대부분의 유방암에서 과발현되며, 암세포의 증식만을 촉진하는데 역할을 한다. 이 연구에서 PTK6의 활성도메인을 초파리의 peptidoglycan recognition protein (PGRP) -LB 단백질을 퓨전파트너로 사용하여 바큘로바이러스 시스템을에서 과발현하는데 성공하였다. 우리는 PGRP-LB가 바큘로바이러스 시스템에서 잠재적으로 퓨전 단백질로 사용될 수 있는 가능성을 처음으로 발견하였다. 정제된 PTK6단백질은 기존의 박테리아에서 발현된 단백질보다 1.5배 높은 활성을 지녔다. 이 단백질은 PTK6의 분자기전 및 그것의 저해제 개발에 필수적인 결정 구조를 규명하는데 사용될 것이다.

• BMB Reports
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• 제35권3호
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• pp.343-347
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• 2002

The human protein tyrosine kinase-6 (PTK6) polypeptide that is deduced from the cDNA sequence contains a Src homology (SH) 3 domain, SH2 domain, and catalytic domain of tyrosine kinase. We initiated biochemical and NMR characterization of PTK6 SH3 domain in order to correlate the structural role of the PTK6 using circular dichroism and heteronuclear NMR techniques. The circular dichroism data suggested that the secondary structural elements of the SH3 domain are mainly composed of $\beta$-sheet conformations. It is most stable when the pH is neutral based on the pH titration data. In addition, a number of cross peaks at the low-field area of the proton chemical shift of the NMR spectra indicated that the PTK6 SH3 domain retains a unique and folded conformation at the neutral pH condition. For other pH conditions, the SH3 domain became unstable and aggregated during NMR measurements, indicating that the structural stability is very sensitive to pH environments. Both the NMR and circular dichroism data indicate that the PTK6 SH3 domain experiences a conformational instability, even in an aqueous solution.

• Journal of Korean Neurosurgical Society
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• 제65권1호
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• pp.64-73
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• 2022

Objective : To evaluate the surgical outcomes of partial pedicle subtraction osteotomy (PPSO) in patients with thoracolumbar fractures and compare the outcomes of PPSO for burst fractures with those for posttraumatic kyphosis (PTK). Methods : From June 2013 to May 2019, 20 consecutive adult patients underwent PPSO for thoracolumbar fractures at the levels of T10 to L2. Of these patients, 10 underwent surgery for acute fractures (burst fractures), and 10 for sequelae of thoracolumbar fractures (PTK). Outcomes of PPSO were evaluated and compared between the groups. Results : Twenty patients (each 10 patients of burst fractures and PTK) with a mean age of 64.7±11.1 years were included. The mean follow-up period was 21.8±11.0 months. The mean correction of the thoracolumbar angle was -34.9°±18.1° (from 37.8°±20.5°preoperatively to 2.8°±15.2° postoperatively). The mean angular correction at the PPSO site was -38.4°±13.6° (from 35.5°±13.6° preoperatively to -2.9°±14.1° postoperatively). The mean preoperative sagittal vertical axis was 93.5±6.7 cm, which was improved to 37.6±35.0 cm postoperatively. The mean preoperative kyphotic angle at the PPSO site was significant greater in patients with PTK (44.8°±7.2°) than in patients with burst fractures (26.2°±12.2°, p=0.00). However, the mean postoperative PPSO angle did not differ between the two groups (-5.9°±15.7° in patients with burst fractures and 0.2°±12.4° in those with PTK, p=0.28). The mean angular correction at the PPSO site was significantly greater in patients with PTK (-44.6°±10.7°) than in those with burst fractures (-32.1°±13.7°, p=0.04). The mean operation time was 188.1±37.6 minutes, and the mean amount of surgical bleeding was 1030.0±533.2 mL. There were seven cases of perioperative complications occurred in five patients (25%), including one case (5%) of neurological deficit. The operation time, surgical bleeding, and complication rates did not differ between groups. Conclusion : In cases of burst fracture, PPSO provided enough spinal cord decompression without corpectomy and produced sagittal correction superior to that achieved with corpectomy. In case of PTK, PPSO achieved satisfactory curve correction comparable to that achieved with conventional PSO, with less surgical time, less blood loss, and lower complication rates. PPSO could be a viable surgical option for both burst fractures and PTK.

• 한국멀티미디어학회논문지
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• 제12권9호
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• pp.1323-1332
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• 2009

본 논문은 IEEE 802.11i의 4-Way 핸드쉐이크의 취약점을 분석하고, 고속의 안전한 2-Way 핸드쉐이크 방식을 제안한다. PTK 생성에서 난수 대신에 순번(Sequence Number)을 사용하여, 재생공격, DoS 공격을 방지한다. 또한 Re-association Request 프레임과 Re-association Response 프레임을 변형하여 MS(Mobile Station)과 AP(Access Point) 사이의 상호 인증과, PTK(Pairwise Transient Key)의 도출을 가능하게 하여, 전송되는 메시지의 개수를 감소시켜, 4-Way 핸드쉐이크보다 고속의 핸드오프 방식을 제안한다. 그리고 고속의 안전한 핸드오프를 제안하는 기존의 기법들과 비교 분석한다.

• 디지털융복합연구
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• 제10권11호
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• pp.565-577
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• 2012

그래픽 계산기와 같은 공학 도구를 사용하는 수학 수업에 있어서 교사의 확신에 영향을 주는 여러 가지 요인들이 있다. 공학 도구를 사용하는 교사의 태도와 같은 내적 요인과 학교 관계자, 또는 동료교사의 지원 등과 같은 외적 요인들이 있다고 할 수 있다. 교육적 기술 지식(PTK: Pedagogical Technology Knowledge)이 교사의 테크놀로지를 사용하는데 있어서 확신을 결정짓는 중요한 요인임을 알 수 있었고, PTK의 발전은 테크놀로지에 대한 교사의 생각, 그리고 그것의 활용과 도구장착(instrumentation)으로 이루어진다고 할 수 있다. 본 연구는 예비교사와 현직교사를 포함한 19명을 대상으로 수학교육과정을 대수, 함수, 기하, 미적분, 통계 영역을 중심으로, 테크놀로지의 활용에 중점을 두어 테크놀로지를 도구장착으로 발전시키고 PTK를 확대하는 것에 중점을 둔 연구이다. 본 연구에서는 그래픽 계산기와 GSP, AutoGraph과 같은 다양한 경험을 통하여 교사들의 테크놀로지에 대한 태도를 도구장착과 도구화의 개념으로 분석하여 이것이 교사의 확신에 어떻게 영향을 미치는지를 알아보았고, 테크놀로지에 대한 전문적 지식의 발전, 교육의 질에 대한 교사들의 변화를 살펴보았다. 연구 결과 테크놀로지에 대한 교사 개인의 태도와 확신이 아주 강하다면, 부정적인 잠재적제약(constraints)와 방해요인(obstacles)은 크게 영향을 미치지 않는다는 것을 알 수 있었다. 특히 교사의 배우고자 하는 확고한 의지와 더불어 수학 학습에 있어서 테크놀로지의 가치에 대한 강한 확신은 테크놀로지의 효율적 활용에 결정적인 요소라고 할 수 있었다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제18권1호
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• pp.51-58
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• 2000

목적 : 방사선에 의해 유도되는 apoptosis에 내성을 가진 세포로 알려진 KS62 세포를 대상으로, PTK inhibitors인 herbimycin A와 genistein을 이용한 방사선에 의한 apoptosls의 내성 기전을 연구하고자 하였다. 대상 및 방법 : 6 MV 체외 X-선 방사선 치료기를 이용하여 200$\~$300 cGy/min의 선량률로 10 Gy의 X-선을 세포에 균일하게 조사하였다. Apoptosis의 관찰은 래arose gel electrophoresis를 이용하여 DNA frgmentation의 지표인 ladder를 관찰하였고, TUNEL 염색을 이용하여 정량 분석을 시행하였다. Western blot 방법으로 apoptosls 관련 유전 단백인 bel-2, bel-X$_L$ 및 bax들의 발현을 관찰하였다. 방사선 조사 및 약물 처치 후의 세포 주기 분석은 flow cytometry로 분석하였다. 결과 : Agarose gel electrophoresis 실험에서 방사선을 조사하지 않은 K562 세포와 방사선을 10 Gy 조사한 세포를 48시간에 걸쳐 12시간 간격으로 관찰하였을 때 DNA fragmentation를 관찰할 수 있었다. 이러한 현상은 genistein을 투여한 세포들에서도 동일한 현상을 관찰할 수 있었지만, 방사선 조사 후 herbimycin A를 투여한 세포들에서는 48 시간째 확연한 DNA fragmentation을 관찰할 수 있었다. 이를 TUNEL assay에서 정량적으로 확인하였다. 방사선만조사한 세포들과 방사선과 genistein 투여 후 48시간째 관찰한 세포들에서는 10$\%$, 미만의 apoptosis 양성 세포의 빈도를 관찰할 수 있었지만, 방사선 조사 후 herbimycin A를 투여한 세포들에서는 30$\~$35$\%$ 빈도로 apoptosis 양성 세포들이 관찰되었다. Western blot analysis에서 bcl-2의 경우 방사선을 조사하지 않았던 대조군에 비하여 전체적인 발현은 증가되었지만 방사선 및 약제간의 발현의 차이는 없었다. 그 외 bcl-X$_{L}$과 bax는 대조군에 비해 방사선 및 약제간의 발현의 차이를 관찰할 수 없었다. KS62 세포에 방사선을 10 Gy 조사하였을 때 나타나는 세포 주기의 변화는 시간이 경과함에 따라 전형적인 G2/M block의 소견을 보였다. 이러한 소견은 genistein을 투여했을 경우에는 특별한 변화를 보이지 않지만, herbimycin A를 투여했을 경우에는 12시간째부터 G2/M block이 소실되면서 세포가 세포 주기를 재 순환하는 양상을 보였고, 48시간째 관찰한 소견에서는 G2/M block이 거의 소실된 양상을 띠었다. 이러한 소견을 토대로 apoptosis 유도와의 상호 연관성을 유추할 수 있었다. 결론 : herbimycin A는 방사선에 의해 유도되는 apoptosis가 억제된 K562 세포에서 apoptosis를 유도할 수 있었다. 이러한 유도 기전에 apoptosis 관련 유전 단백들인 bcl-2, bcl-X$_{L}$ 및 bax와 관련된 영향은 관찰되지 않았다. 세포 주기의 분석에서 G2/M block의 해소와 apoptosis 유도와의 연관성을 유추할 때, 세포 주기 관련 인자들에 대한 연구가 방사선에 의한 apoptosis의 내성의 극복 및 방사선에 의한 세포의 감수성 조절 약제로서의 역할에 이바지할 것으로 생각한다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권4호
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• pp.756-766
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• 2005

The signaling mechanism underlying aburatubolactam C-induced FasL upregulation was investigated in human Jurkat T cells. After treatment with aburatubolactam C, the src-family PTKs $p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$, and MAP kinases ERK2 and JNK1, were activated prior to FasL upregulation; Both $p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$ were directly activated 2.4- and 2.2-fold, respectively, in vitro by aburatubolactam C. The aburatubolactam C-induced cellular changes, including the activation of ERK2 and INK1, and FasL upregulation, were completely prevented by the PTK inhibitor genistein. The activation of protein kinase C (PKC$\delta,\;\epsilon\;and\;\mu$ was also induced following aburatubolactam C treatment. Although the activation of $p56^{lck}$ and tyrosine phosphorylation of the cellular proteins were not blocked by the PKC inhibitor GFl09203X, the activation of ERK2 was completely abrogated, along with a detectably enhanced JNK1 activation; FasL upregulation, and apoptosis. However, the FasL upregulation and apoptosis were significantly inhibited by the PKC activator PMA, with a remarkable increase in the ERK2 activation. The cytotoxic effect of aburatubolactam C was reduced in the presence of the anti-Fas neutralizing antibody ZB-4. Although ectopic expression of Bcl-2 failed to completely block the cytotoxicity of aburatubolactam C, it was clearly suppressed. The c-Fos mRNA expression was upregulated in a biphasic manner, where the second phasic expression overlapped with the FasL upregulation. Accordingly, these results demonstrate that aburatubolactam C-induced apoptosis is exerted, at least in part, by FasL upregulation dictated by activation of the PTK ($p56^{lck}\;and\;p59^{fyn}$) /JNKI pathway, which is negatively affected by the concurrent activation of the PKC/ERK2 pathway proximal to PTK activation.

• 한국전문물리치료학회지
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• 제31권1호
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• pp.89-89
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• 2024