• 제목/요약/키워드: PLD2

검색결과 378건 처리시간 0.031초

넙치 (Paralichthys olivaceus) 뇌로부터 phospholipase D 활성 억제 단백질의 정제 및 특성 규명 (Purification and Characterization of Proteins Inhibiting Phospholipase D Activity from Flounder (Paralichthys olivaceus) Brain)

  • 서정수;김은희;황은영;김남득;김동선;이형호;정준기
    • 한국수산과학회지
    • /
    • 제34권4호
    • /
    • pp.370-377
    • /
    • 2001
  • 본 연구에서는 넙치, Pafalichthys olivaceus 뇌 조직에서 인지질가수분해효소 D (phospholipase D, PLD) 활성의 특성 규명 및 이 활성을 억제하는 단백질을 분리 정제하여 그 특성을 규명하였다. 넙치 뇌 조직에서 PLD 활성이 관찰되었으며, 이 활성은 포스파티딜 이노시톨 비스인산염 (phosphatidyl-inositol 4,5-bisphos-phate, $PIP_2$)에 대해서 의존성을 나타내었으나, ADP-rebosylation factor (ARF)에 의해서는 영향을 받지 않았다. PLD 억제물은 넙치 뇌 조직의 세포질 분획물을 사용하여 여러 종류의 칼럼을 통하여 분리 정제하였고, 그 억제물의 분자크기 및 기작의 특성을 규명하였다. 마지막 chromatography을 통하여 여섯 개의 억제를 나타내는 분획물을 얻었으며, 이 중 두 개의 분획물인 IIA IIB는 $PIP_2$-phosphatase activities를 나타내었다. 이 중 IIA 분획물은 면역화학적 분석을 통하여 inositolpolyphosphate 5-phosphatase family로 알려져 있는 신경말단 단백질인 synaptojanin으로 동정되었다. 그리고 IIB fraction은 Superose 12 gel filtration chromatography을 통하여 158-kDa의 크기로 확인되었으며, 이것은 면역화학적 분석을 통하여 synaptojanin과는 별개의 단백질로 판명되었다. 또한, IIB 분획물은 $PIP_2$ phosphatase activity 확인 실험에서 대사산물로서 phosphatidylinositol phosphate (PIP)만을 생성하였다. 이 결과는 IIB 분획물이 $PIP_2$의 4혹은 5 위치의 인산 (phosphate) 중 어느 하나만을 선택적으로 가수분해시킨다는 것을 암시한다. 이상의 연구 결과들을 종합하여 보면, 넙치 뇌 조직에는 다양한 형태의 $PIP_2$-phosphatases가 존재하며, 이들은 $PIP_2$-의존적인 PLD 활성의 억제조절과정에서 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.

  • PDF

포스포리파제 D 촉매반응에서 포스파티딜 전달반응 활성에 미치는 알코올의 영향 (Effect of Alcohols Toward the Transphosphatidylation Activity in Phospholipase D Catalyzed Reaction)

  • 고은희
    • 대한화학회지
    • /
    • 제54권2호
    • /
    • pp.208-214
    • /
    • 2010
  • 포스포리파제 D(PLD)는 알코올 존재 하에서 포스파티딜 전달반응이 일어나며 동시에 PLD의 전체 반응속도도 증가하는 것으로 알려져 있다. 이 포스파티딜 전달반응을 자세히 구명하기위해 본 실험에서는 양배추에서 정제한 ${\alpha}$-type PLD를 가지고 여러 종류의 알코올 존재 하에서 포스파티딜 전달반응의 반응속도를 검토하였다. 실험 결과 검토한 1차 알코올들에 의해 PLD의 포스파티딜 전달반응 속도는 기대했던 대로 크게 증가하였다. 부탄올의 경우 2차 반응속도는 $33.33{\pm}1.33M^{-1}sec^{-1}$로 얻어졌으며, 이 전달반응 속도를 물의 농도를 고려한 가수분해 속도($0.078M^{-1}sec^{-1}$)와 비교하면 무려 400배 이상의 격차를 보여주었다. 알코올의 $pK_a$과 포스파티딜 전달반응 속도와의 자유에너지 선형 관계로부터 브뢴스테드 ${\beta}_{nu}$$0.12{\pm}0.03$을 얻었다. 비교적 적은 ${\beta}_{nu}$ 값으로 미루어보아 끊어지는 포스파티딜-효소 중간체(E-P)의 전이상태는 상당히 해리된 상태일 것으로 추정된다. 이들 결과와 양배추 PLD의 활성부위의 히스티딘 잔기를 참작하여 양배추 PLD의 반응메커니즘을 제안하였다.

PLD 연속 공정을 통한 YBCO coated conductor 제조 (Fabrication of YBCO coated conductors by PLD continuous reel-to-reel processing)

  • 고락길;신기철;;정준기;박유미;최수정;송규정;하홍수;김호섭
    • 한국초전도저온공학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국초전도저온공학회 2003년도 추계학술대회 논문집
    • /
    • pp.150-152
    • /
    • 2003
  • YBa$_2$Cu$_3$O$_{7-{\delta}}$(YBCO) coated conductors were deposited by pulsed laser deposition (PLD) on short buffered substrate in continuous PLD reel-to-reel system. The oxide multilayer buffered substrate of architectures of CeO$_2$/YSZ/Y$_2$O$_3$was fabricated by PLD at steady status. The degree of texture of each layer was investigated using X-ray diffraction including $\theta$-2$\theta$ scans, $\omega$-scans and $\Phi$-scans analysis. Their surface morphology was observed by scanning electron microscopy (SEM) The FWHM of the X-ray $\omega$-scans and $\Phi$-scans indicated that YBCO and buffer layers closely replicate the in-plane and out-of-plane texture of metal tape. Critical current at 77K self-field of 19A, critical temperature of 86K, and current density of 2MA/$\textrm{cm}^2$ were measured. The film also exhibits a homogeneous and dense surface morphology.e morphology.

  • PDF

방선균으로부터 Phospholipase D 생산균주의 탐색 (Screenin of Phospholipase D Producing Actinomycetes)

  • 손동화;심재용;윤석후
    • 한국미생물·생명공학회지
    • /
    • 제22권4호
    • /
    • pp.333-339
    • /
    • 1994
  • In order to screen microorganisms producing phospholipase D (PLD) [EC 3.1.4.4], culture broths of about 900 strains of soil bacteria were subjected to examine for the PLD activity. When the hydrolytic activity of PLD (H-activity) in the supernatant was determined, 64 strains produced PLD more than 0.3 unit/ml and all of them were actinomycetes. Among 26 culture broths tested, 6 ones had transphosphatidylation activity (T-activity) of 30~68%. When the strains except one were cultivated on 3 different media at 30$\circ$C for 3 days under aerobic condition, strain # 1090 on medium B (yeast extract 1%, peptone 1%, glucose 1.5%, glycerol 1%, CaCO$_{3}$ 0.4%, and pH 7.2) produced PLD with much higher H- and T-activity, which were 8.3 units/ml and 76.3%, respectively. Subsequently, time course of PLD production of the strain # 1090 during cultivation with aeration of 1 v/v/m and agitation of 400 rpm at 30$\circ$C for 5 days on medium B in jar fermentor was investigated. H-activty of PLD reached almost maximum (about 9 units/ml) after 32 hours and maximal T-activity was found to be about 80%.

  • PDF

PLD 장치를 이용한 $NbS_2$ 박막의 제작 (Preparation of $NbS_2$ thin film using PLD method)

  • 박종만;이혜연;정중현
    • 센서학회지
    • /
    • 제7권5호
    • /
    • pp.372-376
    • /
    • 1998
  • 기능성 소자 응용을 위한 다양한 박막을 성장시키기 위하여 PLD(Pulsed Laser Deposition) 장치를 제작 개발하였다. 이 PLD 장치를 이용하여 $NbS_2$ 박막을 $Al_2O_3$(012) 기판과 Si(111) 기판 위에 성장시켰다. 결정성 박막의 성장조건을 조사하기 위하여 기판온도를 실온${\sim}600^{\circ}C$, 타겟의 성분비(S/Nb)를 $2.0{\sim}5.25$로 변화시켰다. XRD 패턴으로부터 기판온도가 $600^{\circ}C$이고 타겟의 성분비가 4.0일 때 c-축 배향을 나타내는 양호한 결정성의 $NbS_2$박막이 성장되었다. Si(111) 기판 위보다 $Al_2O_3$(012) 기판 위에서 보다 양질의 $NbS_2$ 박막이 성장되었음을 알 수 있었다.

  • PDF

펄스레이저를 이용한 박막 증착

  • 김호성
    • 전기의세계
    • /
    • 제42권6호
    • /
    • pp.46-51
    • /
    • 1993
  • 본 특집에서는 PLD장착 및 증착 방법을 2장에서는 소개하고 3장에서는 증착원리 및 특징을 4장에서는 PLD의 응용분야를 그리고 5장에서는 결론 및 향후 연구방향에 대하여 기술하였다.

  • PDF

교세포에서 Epigallocatechin Gallate에 의한 포스포리파제 D의 활성화 (Epigallocatechin Gallate Activates Phospholipase D in Glioma Cells)

  • Kim, Shi-Yeon;Kim, Joonmo;Min, Do-Sik
    • 생명과학회지
    • /
    • 제13권6호
    • /
    • pp.924-932
    • /
    • 2003
  • 녹차의 주성분인 에피갈로 갈레이트 (EGCG)는 건강에 이로운 효과로 나타내고 있는것으로 알려져 있어 많은 주목을 받고 있는 실정이다 본 연구에서는 처음으로 EGCG가, U87사람의 교세포에서 포스포리파제 D의 효소활성을 증가시킨다는 사실을 규명하였다. EGCG에 의한 포스포리파제 D의 활성화는 포스포리파제 C효소의 특이적인 억제제와 지질분해효소 활성이 억제제 포스포리파제 \gama1$의 변이체를 이용하여 실험한 결과 세포내 칼슘에 의존적인 양상을 보였주었다. 이러한 포스포리파제 D의 활성화는 아마도 칼슘 의존성 단백질 키나아제 II (CaM kinase II)를 통하여 일어나는것으로 여겨진다. 흥미롭게도, EGCG는 포스포리파제 \gama1$를 세포질에서 세포막으로의 이동을 유도하였으며, 포스포리파제 \gama1$와 PLD1의 결합을 유도하였음을 관찰하였다. 이상의 결과들을 종합하여 볼 때, EGCG가 사람의 교세포에서 포스포리파제 \gama1$-칼슘-CaM kinase II의 신호전달 경로를 통하여 포스포리파제 D의 활성을 유도하는 것으로 사료된다.

인삼 사포닌 단일물질이 알러지 과민반응의 매개체 유리기전에 미치는 영향 (The Effects of Single Component of Ginsenosides on the Mechanism of Mediator Release in the Allergic Hypersensitivity)

  • 노재열;김경환
    • 대한약리학회지
    • /
    • 제30권2호
    • /
    • pp.243-254
    • /
    • 1994
  • Inflammatory diseases, allergic and asthmatic disorders are caused by the mediator release from the activation of the phospholipase C (PLC), phospholipase D (PLD), methyltransferase or adenylate cyclase etc. during IgG or IgE cross-linking of high affinity receptors on mast cells or basophil surface. One important enzyme activated after IgG or IgE receptor cross-linking is PLD, the enzyme which converts phosphatidylcholine (PC) to phosphatidic acid (PA). Under the hypothesis that these may be some differences in mediator release according to the difference in PLD activity, we attempted to confirm the ginseng saponin effects on the PLD activity. We examined the PLD activity during the passively sensitized mast cell activation in the presence of single component of ginsenosides $(Rc,\;Rg_1,\;Rg_2,\;Rg_3)$. We also measured the amount of mediators (histamine and leukotrienes) released by stimulating with ovalbumin (OA) or calcium ionophore (CaI), Guinea Pig lung mast cells were purified using enzyme digestion, count current elutriation, and discontinuous Percoll density gradient. In purified mast cells prelabeled with $[^3H]$ arachidonic acid or $[^3H]$ palmitic acid, PLD activity was assessed more directly by the production of labeled PEt by PLD-mediated transphosphatidylation in the presence of ethanol. Histanine release was determined by Spectrophotofluorometry, and leukotrienes by radioimmunoassay. The PLD activity during the passively sensitized mast cell activation is increased up to $3{\sim}5times$. The PLD activity during the passively sensitized mast cell activation in the presence of all ginsenosides is decreased up to $4{\sim}11$ times. $Rg_l\;and\;Rg_2$ ginsenoside pretreatment decreased histamine and leukotrienes by 50% in the OA-induced or by 40% in the Cal-induced mast cell after passively sensitization. Rc pretreatment poorly decreased histamine but leukotrienes decreased by 70% in the OA-induced or by 35% in the Cal-induced mast cell. $Rg_3$ ginsenoside pretreatment increased histamine release without challenging OA or Cal but leukotrienes decreased. These observations indicate that single unit of ginsenosldes may be an important contributor to inhibit the release of histamine and leukotrienes in the guinea pig lung mast cells, that inhibits the PLD-mediated formation of DAG evoked by mast cell activation.

  • PDF

광흡수층 적용을 위한 PLD용 $Cu_2ZnSnSe_4$ 타겟 제조와 증착 박막의 특성 (Characteristics of $Cu_2ZnSnSe_4$ Thin Film Solar Absorber Prepared by PLD using Solid Target)

  • 정운화;라흐멧 아드히 위보우;김규호
    • 한국신재생에너지학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국신재생에너지학회 2009년도 춘계학술대회 논문집
    • /
    • pp.130-133
    • /
    • 2009
  • $Cu_2ZnSnSe_4$(CZTSe) is one of the promising materials for the solar cell due to its abundant availability in the nature. In this study, we report the fabrication of CZTSe thin film by Pulsed Laser Deposition(PLD) method using quaternary compound target on sodalime glass substrate. The quaternary CZTSe compound target was synthesized by solid state reaction method using elemental powders of Cu, Zn, Sn and Se. Powders were milled in high purity ethanol using zirconia ball with mixed size of 1 and 3 mm at the same proportions for 72 hours milling time. The structural, chemical and mechanical properties of the synthesized CZTSe powders were investigated prior to the deposition process. The CZTSe compound powder, and $500^{\circ}C$ of sintering temperature shows the best properties for PLD target. Results show that the as-deposited CZTSe thin films with the precursors by PLD have a composition near-stoichiometric.

  • PDF

Development of a PLD heater for continuous deposition and growth of superconducting layer

  • Jeongtae Kim;Insung Park;Gwantae Kim;Taekyu Kim;Hongsoo Ha
    • 한국초전도ㆍ저온공학회논문지
    • /
    • 제25권2호
    • /
    • pp.14-18
    • /
    • 2023
  • Superconducting layers deposited on the metal substrate using the pulsed laser deposition process (PLD) play a crucial role in exploring new applications of superconducting wires and enhancing the performance of superconducting devices. In order to improve the superconducting property and increase the throughput of superconducting wire fabricated by pulsed laser deposition, high temperature heating device is needed that provides high temperature stability and strong durability in high oxygen partial pressure environments while minimizing performance degradation caused by surface contamination. In this study, new heating device have been developed for PLD process that deposit and growth the superconducting material continuously on substrate using reel-to-reel transportation apparatus. New heating device is designed and fabricated using iron-chromium-aluminum wire and alumina tube as a heating element and sheath materials, respectively. Heating temperature of the heater was reached over 850 ℃ under 700 mTorr of oxygen partial pressure and is kept for 5 hours. The experimental results confirm the effectiveness of the developed heating device system in maintaining a stable and consistent temperature in PLD. These research findings make significant contributions to the exploration of new applications for superconducting materials and the enhancement of superconducting device performance.