• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제50권1호
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• pp.67-75
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• 2001

배경 : 대표적인 종양억제유전자인 p53 및 p16은 세포주기 조절 및 자연괴멸 유도에서 서로 다른 역할을 하고 있으며 폐암에서는 동시에 비활성화 되어 있는 경우가 흔하다. 이 종양억제유전자들 동시에 이입시 서로 상호작용을 통해 효과가 증진되리라 기대되고 있다. 방법 : 본 연구에서는 p53 및 p16을 아데노바이러스 벡터를 이용하여 폐암세포주에 동시에 이입하여 그 상호작용을 관찰하였다. 복합투여시 세포성장곡선을 분석하여 isobologra을 이용한 상호작용을 검증하고 세포주기의 변화 및 체외종양형성능의 변화도 관찰하였다. 결과 : Isobologram을 이용한 분석에서 adeno-virus-p53와 adenovirus-p16의 복합투여는 NCI H358에서는 상승적인 성장억제를, NCI H23에서는 부가적인 성장 억제를 보였다. 유세포분석기를 이용한 세포주기의 분석 및 체외종양형성능 검사에서도 p53 및 p16의 복합투여시 단독 투여보다 강한 억제효과를 보였다. 결론 : 이러한 상승적인 p53 및 p16의 상호작용은 이 복합요법이 새로운 유전자치료법으로 발전할 수 있는 가능성을 보였다.

• 생명과학회지
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• 제22권2호
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• pp.184-191
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• 2012

본 연구의 목적은 16주 근력 트레이닝을 동반한 TRX, 코어 훈련이 엘리트 역도 선수의 피로물질과 근 손상, 산화적손상, myokine에 미치는 영향을 규명하기 위함이다. 본 연구 대상자들은 총 10명(남 6명, 여 4명)으로 구성되어 있으며 16주 근력 운동과 더불어 코어 및 TRX 트레이닝을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Ammonia와 Pi는 트레이닝 전에 비해 점차적으로 증가함을 나타냈으나 통계적으로 유의한 차이는 나타나지 않았다. 근 손상 물질인 CK는 트레이닝 전에 비해 8주에 유의한(p<0.05) 증가를 나타냈으며, LDH는 트레이닝 전에 비해 8주에 유의한(p<0.05) 증가를 나타냈지만 16주에는 감소하는 경향을 나타냈다. 산화적 손상 지표인 MDA는 트레이닝전과 16주에 비해 트레이닝 8주에서 유의한(p<0.05) 증가를 나타냈으며, 항산화 지표인 TAS 또한 트레이닝 전에 비해 트레이닝 8주에서 통계적으로 유의한(p<0.05) 증가를 나타냈다. Myokine인 IL-15는 트레이닝 전에 비하여 트레이닝 8주와 16주에 통계적으로 유의한(p<0.05) 증가를 나타냈다. 결과적으로 16주 고강도 근력 트레이닝은 엘리트 중학교 역도선수의 피로물질과 근 손상, 산화적 손상, myokine에는 긍정적이 영향을 미친 것으로 나타났다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제17권8호
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• pp.4149-4154
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• 2016

Background: Cervical carcinoma is one of the main causes of mortality in women worldwide as well as in India. It occurs as a result of various molecular events that develop from the combined influences of an individual's genetic predisposition and external agents such as smoking and menstrual hygiene, for example. However, infection with human papillomavirus (HPV) is the established major risk factor. The aim of the current study was to investigate p16 CpG island methylation and establish any correlation with mRNA expression in north Indian population. Materials and Methods: We analyzed 196 woman volunteer out of which 98 were cases and 98 healthy controls. For the analysis of methylation pattern, DNA extracted from blood samples was modified with a bisulfate kit and used as template for methylation specific PCR (MSP). Quantitative real-time PCR (QRT-PCR) was performed to check mRNA expression. Results: Correlation between methylation status of p16 gene and poor menstrual hygiene was significant (p=0.006), high parity cases showed methylation of p16 gene (p=0.031) with increased risk up to 1.86 times for cervical cancer and smoking was a strong risk factor associated with cervical cancer. We analyzed methylation pattern and found 60.3% methylation in cases with low mRNA expression level (0.014) as compare to controls (1.24). It was also observed that promoter methylation of p16 gene was significantly greater in FIGO stage III. Conclusions: We conclude that p16 methylation plays an important role in cervical cancer in the north Indian population and its methylation decreases mRNA expression. It can be used as an important and consistent blood biomarker in cervical cancer patients.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제38권4호
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• pp.1081-1092
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• 2021

본 연구의 목적은 파킨슨병 환자를 대상으로 16주간 복합운동을 수행하였을 때 혈중 도파민 농도, 기능적 체력 및 삶의 질에 어떠한 영향을 미치는지를 규명하는데 있다. 이를 위해 본 연구에 참여한 60대 이상의 파킨슨병 환자 24명을 운동군(n=12)과 통제군(n=12)으로 분류한 후 운동군을 대상으로 16주 동안 주 2회, 회기 당 70분의 복합운동을 실시하였다. 복합운동 실시 전·후 항목별 차의 비교를 위해 그룹 내 차이는 대응 t 검정, 그룹 간 차이는 독립 t 검정, 상호작용 검증을 위해 이원 반복측정 분산분석을 사용하였으며, 각 항목별 통계적 유의수준은 .05로 설정하였다. 그 결과 첫째, 도파민 농도는 운동군(p<.01)이 16주간 운동 전보다 운동 후 유의하게 증가하였고, 통제군의 경우 유의한 차이가 나타나지 않았다. 둘째, 기능적 체력에서 악력은 운동군(p<.001)과 통제군(p<.05) 모두 16주간 운동 전보다 운동 후 유의하게 증가하였고, 덤벨들기(p<.001), 의자 일었다 앉기(p<.001), 3m 걸어갔다 돌아오기(p<.01)가 16주간 운동 전보다 운동 후 운동군에서 유의한 차이를 보였고, 통제군은 유의한 차이가 나타나지 않았다. 셋째, 삶의 질은 운동군(p<.001)이 16주간 운동 전보다 운동 후 유의하게 증가하였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 16주간의 복합운동은 파킨슨병 환자에게 매우 효과적임을 알 수 있었으며, 도파민 농도를 증가시키고 근력, 근지구력, 평형성 및 보행능력 등 기능적 체력과 삶의 질을 향상시키는데 도움을 줄 수 있다고 사료된다.

• Journal of Gastric Cancer
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• 제5권4호
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• pp.228-237
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• 2005

목적: 위암조직에서 P16과 hMLH1 유전자의 메틸화상태를 검사하여 위암의 발생과정에서의 작용과 유전자의 발현에 미치는 영향과 Helicobacter paylori균 감염여부 및 임상병리학적인자와의 연관성을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 위암 신선 동결 절편조직 100예를 대상으로 유전자의 단백질 발현상태는 면역조직화학 염색을 시행하여 확인하였고. 메틸화 상태는 methylation-specific PCR(MSP)과 염기서열분석을 시행하였다. 결과: P16유전자의 메틸화는 19예(19%)에서 관찰되었고 이 중 18예(94.7%)에서 P16유전자의 단백질 발현 소실이 있어, P16 유전자의 단백질 발현 소실이 P16유전자의 메틸화와 연관이 있음을 알 수 있었다(kappa 계수=0.317, P=.0011). hMLH1 유전자의 메틸화는 27예(27%)에서 관찰되었고, 이 중 24예(8.8%)에서 hMLH1 단백의 소실이 hMLH1유전자의 메틸화와 연관이 있음을 보여주었다(kappa계수=0.675, p<0.0001). hMLH1 유전자의 메틸화는 나이, 암종의 크기, Lauren 분류와 연관성이 있었다. P16 유전자와 hMLH1 유전자 메틸화 모두 Helicobacter paylori균 감염여부와는 연관성이 없었다. 결론: 위암에서 P16 및 hMLH1 유전자의 불활성화에는 DNA 메틸화가 작용을 함을 알 수 있었고, hMLH1유전자의 메틸화는 나이, 암종의 크기, Lauren 분류와 연관이 있음을 알 수 있었다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권1호
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• pp.75-84
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• 2014

Aberrant DNA methylation of tumor suppressor genes has been reported in all major types of leukemia with potential involvement in the inactivation of regulatory cell cycle and apoptosis genes. However, most of the previous reports did not show the extent of concurrent methylation of multiple genes in the four leukemia types. Here, we analyzed six key genes (p14, p15, p16, p53, DAPK and TMS1) for DNA methylation using methylation specific PCR to analyze peripheral blood of 78 leukemia patients (24 CML, 25 CLL, 12 AML, and 17 ALL) and 24 healthy volunteers. In CML, methylation was detected for p15 (11%), p16 (9%), p53 (23%) and DAPK (23%), in CLL, p14 (25%), p15 (19%), p16 (12%), p53 (17%) and DAPK (36%), in AML, p14 (8%), p15 (45%), p53 (9%) and DAPK (17%) and in ALL, p15 (14%), p16 (8%), and p53 (8%). This study highlighted an essential role of DAPK methylation in chronic leukemia in contrast to p15 methylation in the acute cases, whereas TMS1 hypermethylation was absent in all cases. Furthermore, hypermethylation of multiple genes per patient was observed, with obvious selectiveness in the 9p21 chromosomal region genes (p14, p15 and p16). Interestingly, methylation of p15 increased the risk of methylation in p53, and vice versa, by five folds (p=0.03) indicating possible synergistic epigenetic disruption of different phases of the cell cycle or between the cell cycle and apoptosis. The investigation of multiple relationships between methylated genes might shed light on tumor specific inactivation of the cell cycle and apoptotic pathways.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제22권4호
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• pp.471-482
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• 2009

Nutrient availability may control muscle growth directly and indirectly through its influence on regulatory factors. We analyzed the effects of nutrient availability on the breast muscle insulin-like growth factor system. Real time RT-PCR was used to quantify the level of transcription in breast muscle from Langshan (LS) layer and Arbor Acres (AA) broiler chickens subjected to different feeding regimens during embryonic and postnatal development. The AA chickens were fed AA diet (AA, control group) while the LS chickens were either fed LS diet (LL) or AA diet (LA). According to our results, insulin-like growth factor (IGF)-II (embryonic day 16 (E16) - postnatal day 42 (P42)), IGF-I receptor (IGF-IR, E18-P42), and IGF binding protein (IGFBP)-2 (E18-P42), -5 (E16-P14), -7 (E12-P0), and -3 (E12-P0) were positively correlated with IGF-I, while IGFBP-3 (P0-P28) was negatively correlated with IGF-I. In comparison, IGF-IR (E18-P42), IGFBP-2 (E18-P42), IGFBP-5 (E14-P0), and IGFBP-3 (E16-P0) were positively correlated with IGF-II, while IGF-IR (E10-E16) and IGFBP-3 (P0-P28) were negatively correlated with IGF-II. Moreover, IGFBP-2 (E16-P42), -7 (E10-E16), and -3 (E10-E16) were positively correlated with IGF-IR, while IGFBP-3 (P0-P28) was negatively correlated with IGF-IR. Finally, IGFBP-7 (E12-P0) was positively correlated with IGFBP-3, while IGFBP-2 (P0-P28) and -7 (P0-P42) were negatively correlated with IGFBP-3. Overall, the AA chickens exhibited higher levels of IGF-I, IGF-IR, and IGFBP-2 mRNA expression than the LL chickens, while the opposite was true for IGFBP-7. No strain differences in IGF-I, IGF-IR, and IGFBP-7 mRNA expression were detected between LA and AA chickens; however, a strain difference was observed for IGFBP-2. LA chickens exhibited higher levels of IGFBP-2 than LL chickens, while the opposite was true for IGFBP-7. Our data show the first evidence that certain genes may be correlated during specific developmental periods and that strain differences in the expression of those genes in LS and AA chickens are due to differential responses to the same diet.

• 분석과학
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• 제13권4호
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• pp.494-503
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• 2000

암 억제제인 $p16^{INK4A}$ 단백질의 활성부위 84-104번까지의 21개 아미노산으로 이루어진 펩타이드를 합성하여, 이것의 용액상 구조를 CD, $^1H$ NMR 분광법 그리고, 분자 모델링 방법으로 분석하였다. CDK4 그리고 CDK6와 함께 안정된 complex를 형성하는 p16의 활성 펩타이드(84-104 아미노산)는 in vitro에서 pRb를 인산화하는 CDK4/6의 능력을 차단하고, p16단백질의 기능에서 보여주듯이 G1/S상의 세포 Cycle을 차단한다. NOE를 포함하는 $^3J_{NH{\alpha}}$ 스핀결합 상수, $C_{\alpha}H$ 화학적 이동, 아마이드 화학적 이동의 평균 변화 폭 그리고 온도 계수 등은 p16 펩타이드의 이차구조가 helix-turn-helix의 구조를 구성하는 p16단백질과 유사한 2차 구조를 가지고 있음을 보여주었다. NOE에 근거한 거리 및 이면각을 이용한 3.D 기하구조는 p18이나 p19의 대응하는 부위에 대한 결정구조에서 보여준 바와 같이 아미노산 $Gly^{89}-Leu^{91}$(${\varphi}_{i+1}=-79.8^{\circ}$, ${\varphi}_{i+1}=60.2^{\circ}$)사이에는 ${\gamma}$-회전구조를 형성함을 보여주었다. 이렇게 비교적 단단한 구조를 형성하고 있는 ${\gamma}$-회전구조부위는 p16펩타이드 구조를 안정시키며, CDK를 인식하는 부위로 작용할 수 있다. 이러한 ${\gamma}$-회전구조는 항암제 선도물질을 개발하는데 유용하게 활용될 수 있을 것이다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권2호
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• pp.469-472
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• 2012

The present study was conducted to assess utility of $p16^{INK4a}$ immunopositivity as a surrogate marker for genomic integration of high-risk human papillomavirus infection (hrHPV). A total of 29 formalin-fixed, paraffin-embedded cervical low-grade squamous intraepithelial lesions (LSILs), 27 high-grade squamous intraepithelial lesions (HSILs) and 53 invasive squamous cell carcinomas (SCCs), histologically-diagnosed between 1st January 2006 to 31st December 2008 at the University of Malaya Medical Centre were stained for $p^{16INK4a}$ (CINtec Histology Kit (REF 9511, mtm laboratories AG, Heidelberg, Germany). Immunopositvity was defined as diffuse staining of the squamous cell cytoplasm and or nucleus (involving > 75% of the intraepithelial lesions or SCCs). Staining of basal and parabasal layers of intraepithelial lesions was pre-requisite. One (3.4%) LSIL, 24 (88.9%) HSIL and 46 (86.8%) SCC were $p^{16INK4a}$ immunopositive. All normal squamous epithelium did not express $p16^{INK4a}$. $p16^{INK4a}$ expression was significantly lower (p<0.05) in LSIL compared with HSIL and SCC with no difference in expression between HSIL and SCC. The increased $p16^{INK4a}$ immunopositivity in HSIL and SCC appears in line with the integrated existence of the hrHPV and may provide more insightful information on risk of malignant transformation of cervical squamous intraepithelial lesions than mere hrHPV detection.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제24권1호
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• pp.13-25
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• 1999

P. endodontalis which was known to be associated with the infected root canals and periapical lesions is very difficult to detect by culture methods or traditional methods. Detection of bacteria using polymerase chain reaction(PCR) for 16S ribosomal DNA(rDNA) is fast, simple, and accurate with relatively small amount of target cells. 16S rDNA consist of conserved regions those are same to all species, and variable regions which represent species specificity. The 16S rDNA sequences of P. endodontalis and P. gingivalis were aligned and two highly variable regions were selected as a pair of species specific oligonucleotide primers for P. endodontalis. And then the pair of primers for PCR amplification was synthesized to identify P. endodontalis. The sequences of the species specific primers for the 16S rDNA of P. endodontalis were as follows ; sense primer[endo1]: 5'-CTATATTCTTCTTTCTCCGCATGGAGGAGG-3' antisense primer[endo2]: 5'-GCATACCTTCGGTCTCCTCTAGCATAT-3' In this study, for the identification of P. endodontalis without culture from the mixed clinical samples, PCR was done with species specific primers for the 16S rDNA sequences of P. endodontalis. The results were as follows : 1. The species specificity of the primers for the 16S rDNA of P. endodntalis was determined by the PCR methods. About 490bp amplicon which was specific only for P. endodntalis was produced with P. endodontalis. No amplicon was produced by PCR with other strains similar to P. endodontalis. 2. The synthesized species specific primers reacted with conventionally identified P. endodontalis which we have in conservative dentistry laboratory. 3. The identification of P. endodontalis using PCR technique with samples collected from infected root canals or periapical lesions was more sensitive than that of culture methods. 4. Seven samples revealed including P. endodontalis by PCR technique. Five of them were related with pains, two of them with sinus tract, three of them with foul odor, and three of them with purulent drainage. P. endodontalis was shown to have great relation with pains.