• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제33권4호
• /
• pp.323-330
• /
• 1995

폐흡충의 여러 발육 단계 즉 피낭유충 종숙주 내 성숙단계 충체 및 성충에서 분자량이 각각 28, 27, 22 및 17.5 kDa인 시스테인 계열 단백질 분해효소가 분리 정제되었다. 이 연구는 만성 폐흡충증의 육아종에서 발견되는 충란이 육아종 형성에 관여하는 물질을 분비한다면 그 분비액 중에서는 단백질 분해효소가 중요할 것이라고 가정하고 우선 그 존재를 조사하였으며 이를 부분정제하고 생화학적 특성을 관찰하였다. 실험적으로 개에 폐흡충 피낭유충을 감염시키고, 14주일 후에 개를 포살하여 폐를 분리하였다. 폐를 생리식염수로 씻어 그 세척액에서 충란을 모았다. 그후 해부 현미경하에서 이물질(이물질)을 제거하고 증류수에서 하룻밤 투석하여 충란외부에 묻어 있을 수 있는 숙주 또는 성충의 조직을 제거하였다. 충란을 생리식염수에서 마쇄한 후 원심분리에 의해 충란 조효소(조효소)를 제작하였다. 조효소에는 Cbz-phe-arg-MNA와 Azocoll을 분해하는 단백질 분해효소가 존재하였으며 이 활성은 pH 6에서 가장 높았다. 이 활성은 DTT에 의해 6.5배 증강되었고, 시스테인계 단백실 분해효소의 특이 억제제인 I-64나 IAA에 의해서는 90% 억제되었다. 조효소를 Sephacryl 5-300 HR column을 통과시켜 효소를 부분정제한 결과 분자량이 35 kDa인 시스테인 계열의 단백질 분해효소을 정제할 수 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제43권3호
• /
• pp.93-100
• /
• 2005

The present study was performed to investigate the infection status with helminth in a group of feral cats in Korea. More than 29 helminth species including adults or eggs were detected in visceral and fecal samples of the examined cats. Among these were a host of nematodes, including toxocarids, Ancylostoma sp. and the larva of Anisakis simplex; trematodes, including Clonorchis sinensis, Paragonimus westermani, Eurytrema pancreaticum, Pharyngostomum cordatum, Metagonimus spp., Heterophyes nocens, Pygidiopsis summa, Heterophyopsis continua, Stictodora fuscata, Stictodora lari, Acanthotrema felis, Stellantchasmus falcatus, Centrocestus armatus, Procerovum varium, Cryptocotyle sp., Echinostoma revolutum, Echinostoma hortense, Echinochasmus japonicus, Stephanoprora sp., Plagiorchis muris, Neodiplostomum sp. and diplostomulum. We also detected a variety of cestodes, including Spirometra erinacei, Taenia taeniaeformis and unidentified species of tapeworm. We also found examples of the acanthocephalan, Bolbosoma sp. In our assessment of the stools, we detected at least 12 species of helminth eggs. These findings confirmed that feral cats in Korea are infected with a variety of helminth parasite species. Furthermore, among the helminths detected, E. pancreaticum, S. fuscata, S. lari, A. felis, S. falcatus, C. armatus, P. varium, Cryptocotyle sp., E. revolutum, E. japonicus, Stephanoprora sp., P. muris, Neodiplostomum sp. and Bolbosoma sp. represent helminth fauna which have not been reported previously in feral cats in the Republic of Korea.

• 농촌의학ㆍ지역보건
• /
• 제23권2호
• /
• pp.275-285
• /
• 1998

간흡충(Clonorchis sinensis), 폐흡충(Paragonimus westermani), 스팔가눔(sparganum), 뇌낭미충(Cysticercus cellulosae), 아니사키스(Anisakis spp.), 선모충(Trichinella spiralis), 개화충(Toxocara canis)에 대한 IgG항체반응을 ELISA를 이용하여 연변지역주민의 혈청역학적 조사를 시행하고 그 결과를 PC-SAS 시스템으로 통계분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1995년 10월부터 1997년 6월 사이에 수집된 총 975명의 혈청에 대한 검사결과 23.87%에서 한 종류이상의 혈청항체 양상을 나타내였다. 이중 간흡충증은 5.74%, 폐흡충증은 4.92%, 낭미충증은 1.54%, 스팔가눔증은 8.51%, 아니사키스증은 1.85%, 개회충증은 12.51%, 선모충증은 7.08%의 혈청항체 양성률을 나타내었다. 판정된 양성혈청을 통계분석한 결과 간흡충(p<0.01), 혜흡충(p<0.01), 아니사키스(p<0.05), 개회충(p<0.01), 선모충(p<0.01)의 각 연령그룹비교에서 통계학적으로 유의한 차이를 나타내었고 스팔가눔증은 성별 사이에 유의한 차이가 보였다(p<0.05). 간흡충과 폐흡충은 50대 연령층에서 높은 양성항체가를 나타내는 반면 개회충과 선모충은 20대에서 높은 항체가를 보여주었다. 또한 내과질병으로 않고 있는 환자혈청은 낭미충증을 제외한 6종류 윤충류에서 정상대조인과 비교하여 볼 때 모두 통계학적으로 유의한 차이를 나타내었다(p<0.05 혹은 p<0.01). 즉 환자가 정상대조인보다 혈청양성률이 훨씬 높았다. 이상의 결과는 물론 선충사이의 교차반응이 있을거라고 추측되며 정확한 진단을 위해서는 EITB를 시행해야 한다고 생각한다. 이번 조사는 중국 연변에서 처음으로 되는 혈청역학조사이며 앞으로 기생충진환 퇴치대책에 아주 중요한 기초자료가 될 수 있을 것으로 생각한다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제27권1호
• /
• pp.1-8
• /
• 1989

폐흡충증의 진단은 객담검사법이 가장 확실한 진단 방법이기는 하지만 폐흡충이 폐에 기 생한 경우에도 충란 검출이 어려울 때가 있으므로 혈청학적 진단법이 이용되고 있다. 혈청학적 진단법에 사용되는 항원인 기생충 추출물, 즉 조항원은 분류학적으로 유사한 기생충과 서로 공유하고 있는 공통 항원 때문에 교차 반응을 일으키는 경우가 있다. 이 연구는 발육단계 별 폐흡충에서 만든 조항원을 SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)로 전기영동한 다음 EITB(enzyme-linked immunoelectrotransfer blot)를 이용하여 항원대별 항원성 및 특이성을 관찰하여 시기별로 채취한 고양이 혈청에 대한 특이 반응대를 관찰해 보고자 시행하였다. 실험에 사용한 항원은 실험적으로 고양이에 감염시켜 3, 5, 8및 12주 만에 얻은 폐흡충의 식염수 추출액 (SEPn; n=감염된 시기)이며 3∼20% linear gradient gel에서 SDS-PAGE하였다. Silver stain결과 폐흡충 조항원은 최소한 30개 이상의 band들로 구성되어 있었는데 각 발육단계 에 공통된 항원대로 203, 63, 35, 21, 19, 13 kDa band들이 관찰되었고, 단계별로 차이점도 관찰 되었다. SEPl2에서는 새로운 229 kDa band가 관찰되었다. 주요 항원대에 대하여 EITB를 한 결과 각 항원과 감염 후 5주 이상 된 혈청과 공통적으로 반응한 항원대는 203, 115, 91, 85, 67, 63, 48, 39, 35 및 25 kDa band들이었고, 8주 이상 된 혈청과의 반응에서는 19, 13및 10 kDa 항원대와 공통적으로 일관성 있게 반응하였다. SEP12는 12주 된 혈청과 229 kDa에서 특이하게 반응하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제23권2호
• /
• pp.189-196
• /
• 1985

폐흡충 발육에 따른 형태학적 변화와 함께 구성단백질의 전기영동상의 차이점을 관찰할 목적으로 실험 감염 후 4, 6, 8, 10 및 12주 경과한 초기 발육단계의 폐흡충으로부터 각각의 생리 식염수 추출액을 만들고 이들 추출액 내의 단백질 구성을 디스크 폴리아코릴아마이드젤 전기병동(disc-PAGE)양상으로 비교 관찰한 결과는 다음과 같았다. 1. 감염후 4주부터 l2주에 이르는 충체들의 생리식염수 추출액 전기영동상에서 관할된, 서로 다른 Rf치를 보인 단백질 band수를 모두 합하면 15개이었다. 그중 5개는 관찰한 전 발육단계를 통하여 관찰할 수 있었다. 2. 분리된 구성 단백질 band수와 그 양상은 각 발육단계마다 서로 다르게 관찰되었지만, 4주와 6주의 전기영동상이 비슷하였고, 8주와 10주의 전기영동상 또한 비슷하게 나타났다. 3. 12주 성충에서의 전가영동상은 그 이전의 영 동상과 크게 달라졌던 바 가장 낮은 전기이동도 영역에서 새로운 단백질 band가 주(주, major) band로 관찰되었고, 12주 이전의 충체에서 미약하던 단백질 band가 주 band로 전환되었으며 4주와 6주의 미성숙 충체에서 관찰되었던 band들이 소멸되었다. 이상의 결과에서 폐흡충은 성충으로 발육하는 초기 발육단계에서 구성단백질의 전기영동상이 단계별로 다르게 나타나는 바, 특히 8주와 12주에 각각 크게 변화하고 있음을 알 수 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제38권2호
• /
• pp.95-97
• /
• 2000

A 17 kDa protein from Clonorchis sinensis adults was purified by a procedure including Sephacryl S-200 HR gel filtration and Q-Sepharose anion exchange chromatography. The protein was proved to be a cysteine protease as it showed hydrolytic activity toward Cbz-Phe-Arg-AMC in the presence of dithiothreitol and was inhibited by specific inhibitors such as iodoacetic acid or trans epoxy-succinly-L-leucyl-amido(4 guanidino) butane. The polyclonal antibody raised against the protein reacted to 17 kDa proteins of trematodes such as Paragonimuf westermani, Fasciola hepatica, Opisthorchis viverrini, Gymnophalloides seoi, and Metagonimus yokogawai. The antibody recognized the 17 kDa and 16 kDa cysteine proteases purified from C. sinensis, P. westemani, and G. seoi as well. These results suggest that the 17 kDa protein may be a cysteine protease commonly present in trematodes.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제58권6호
• /
• pp.603-608
• /
• 2020

This study was performed to find out the clusters with high parasite infection risk to discuss the geographical pattern. Clusters were detected using SatScan software, which is a statistical spatial scan program using Kulldorff's scan statistic. Information on the parasitic infection cases in Korea 2011-2019 were collected from the Korea Centers for Disease Control and Prevention. Clusters of Ascaris lumbricoides infection were detected in Jeollabuk-do, and T. trichiura in Ulsan, Busan, and Gyeongsangnam-do. C. sinensis clusters were detected in Ulsan, Daegu, Busan, Gyeongsangnamdo, and Gyeongsangbuk-do. Clusters of intestinal trematodes were detected in Ulsan, Busan, and Gyeongsangnam-do. P. westermani cluster was found in Jeollabuk-do. E. vermicularis clusters were distributed in Gangwon-do, Jeju-do, Daegu, Daejeon, and Gwangju. This clustering information can be referred for surveillance and control on the parasitic infection outbreak in the infection-prone areas.

• 생명과학회지
• /
• 제17권4호
• /
• pp.462-469
• /
• 2007

폐흡충은 국내를 비롯한 아시아에서 폐흡충증을 일으키는 중요한 기생충이다. 이러한 폐흡충은 이배체 와 삼배체가 국내에 알려져 있다. 이배체 폐흡충은 양성생식을 하고 삼배체 폐흡충은 단위생식을 하는 것으로 알려져 있다. 그러나 이러한 원인에 대하여서는 알려진 바가 없다. 생식유전자 중 초파리에서 최초 분리되었고 포유동물에서도 그 기능이 밝혀진 vasa 유전자가 가장 유명하다. 이 유전자는 생식세포의 분화에 관여하며 종에 따라서는 정자생성에도 관여하는 것으로 알려져 있다. 이번 연구는 삼배체 폐흡충의 단위생식과 vasa 유전자와의 관계를 규명해 보고자 하였다. 폐흡충의 이배체와 삼배체 성충으로부터 vasa 유전자 전체의 염기서열을 얻을 수 있었다. 두 염기서열의 경우 8개의 ATP-binding domain이 관찰되었고 helicase가 결합할 것으로 예상되는 RGG motif도 관찰되었다. 총 622아미노산 서열로 구성될 것으로 보이며 이배체는 69.018 kDa, 삼배체는 68.930 kDa 크기의 단백질을 만들 것으로 예상되었다. Vasa 재조합 단백질은 GST와 fusion되어 93 kDa 크기에서 관찰되었다. mRNA의 발현은 이배체에 비해 삼배체가 다소 높았다. Anti-Pw-VASA항체를 이용한 면역조직화학법을 수행한 결과 이배체와 삼배체는 다른 기관에서는 면역반응력을 보이지 않고 고환에서만 면역반응력을 볼 수 있었다. 결과를 종합해 보면 vasa 유전자는 이배체 삼배체 모두 가지고 있었으며 정상적으로 발현되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제24권2호
• /
• pp.187-193
• /
• 1986

Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) using crude and affinity-purified antigens of adult worms of Paragonimus westermani was performed for infected cat sera with different worm burden, from preinfection to 18th week after infection. Crude antigen was used with supernatant of homogenated worms by freezing-thawing method, and the supernate was centrifuged for 1 hour at 10,000 rpm at $4^{\circ}C$. Affinity-purified antigen(antibody-bound antigen) was prepared from fractions(bound and unbound) of crude antigen by affinity chromatography on CNBr-activated sepharose 4B, and IgG as a ligand was prepared from paragonimiasis cat serum(6 months infected) obtained by ammonium sulfate ($40%{\sim}45%$ saturated) precipitation method. By SDS-PAGE, crude antigen showed 22 polypeptide fractions while purified antigen showed 4 fractions: 36, 400, 34, 700, 27, 600 and 11, 500 in molecular weights. All cats were divided into five groups($G_1-G_5$) by different worm burdens. The mean of recovered worms(${\pm}SD$) and the number of cats in each group are as follows: $G_1$, 2 worms(0) and 4 cats; $G_2$, 4.75 (${\pm}0.66$) and eight; $G_3$, 10.75(${\pm}1.92$) and four; $G_4$, 23.20(${\pm}3.43$) and five; $G_5$, 48(${\pm}12.63$) and five cats. The results were summarized as follows: 1. The antibody levels(OD value) increased by worm burden in $G_1$ to $G_4$ generally. However, individual antibody levels were not exactly related with worm burden in all groups, especially there was a wide difference in $G_4$ and $G_5$. These results suggested that the worm burden in $G_4$ (about $20{\sim}30$ worms) is enough to produce antibody maximum in cats of $2{\sim}3kg$ weight. 2. The antibody levels increased significantly(p<0.05) compared to control sera at the 3rd week in $G_1$ and $G_2$, at the 2nd week in $G_3$, and at the 1st week in $G_4$ and $G_5$. Especially in the 4th week, OD value increased more in $G_1$(p<0.01) and in $G_2$ to $G_5$(p<0.001). In the pattern of antibody levels by ELISA in each group, OD in $G_1$ increased to the 18th week continuously, in $G_2$ OD was maintained same after the 16th week, but in $G_3$ it decreased after the 16th week, and it was maintained same in $G_4$ and $G_5$ after the 14th week. 3. The antibody levels by ELISA with the affinity-purified antigen were higher than those with crude antigen in all groups generally. Especially, the difference of OD values between two antigens was larger from the 4th to the 10th week. In $G_1$ and $G_2$ OD with purified antigen was higher than that with crude one to the 18th week. It was also higher in $G_3$ than that with crude antigen to the 16th week and OD of $G_4$ and $G_5$ were higher before the 14th week than that with crude antigen, however became lower at the 16th week. Consequently, the antibody level in ELISA with affinity-purified antigen was more sensitive at the early weeks after infection and in light infection groups than that with crude antigen.

• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제21권2호
• /
• pp.193-204
• /
• 1983

The Jinyang Lake is dammed up Nam River, and surrounded by Jinju city and four counties; Jinyang, Sanchong, Hading, and Sachon in kyongsang-Nam-Bo, Korea. The areas around this man-made lake have been known as an endemic focus of clonorchiasis in Korea. The present study was first aimed to know the distribution of freshwater mollusks including medically important snails, and larval trematodes shed from Parafossarulus manchouricus and Semisulcospira libertina. In addition to above studies, water analyses in each snail habitat were carried out in order to figure out a part of their environmental factors. This malaco-ecological survey was done at the sirs areas around upper, middle and lower parts of the lake for 4 months, August-November, 1983. Total nine species of freshwater mollusks were collected throughout the study: 4 species of gastropods: Semisulcospira libertina, Cipangopaludina chinensis, Parafossarulus manchouricus and Radin auricularia, and 5 species of bit.alves; Unio dcuglasiae, Ancdonta woodiana, Lamprotula gottschei, Corbicula yuminea and Limncperma lucustris. Out of nine species of freshwater mollusks, three species of gastropods; S. Zibertina, p. manchouricus and R. auricularia were medically important in terms of the transmission of digenetic trematodes to humans. P. manchouricus and R. auricularia were mainly collected from the shallow ponds and the irrigation channels with the muddy basin, but S. libertine and the bivalves were only collected from the stream of Nam River where the gravels and rocks were dominant. The levels of dissolved oxygen (D.O.) and biochemical oxygen demand \(B.O.D._5)\ of the water specimens sampled from the study areas ranged from 6.0 to 9.6 ppm and from 0.4 to 1.6 ppm respectively. As a result, it is considered that water system around the Jinyang Lake might be relatively clean without any heavy pollution of aquatic microorganisms and organic materials during the period of this study. On the other hand, eight metalic constituents from the water samples were also assayed, and all metalic ions detected were remarkably low below the legal criteria. However, calcium ion in the water samples from the habitats of P. manchouricus was considerably higher than others. Infection rates of digenetic trematodes in the snails were 6.9% in P. manchouricus and 4.8% in S. libertine, respectively. P. manchouricus snails harboring with thc cercariae of Clonorchis sinensis were only 0.14% among the snails examined, and other trematode cercariae except cercaria of C. sinensis were: furcocercus cercariae, cercaria of Loxogenes liberum type I and II. S. libertine snails parasitized with the cercariae of Metagonimus yokogawai were 1, 5% out of the snails examined, and no cercaria of Paragonimus westermani was found in S. libertine snails in the present study. Digenetic trematode cercariae other than M. yokogawai observed in S. libertina snails were: Cercaria yoshidae (B type) , Cercaria cristata, Cercaria innominatum, Cercaria of Centrocestus formosanus and Cercaria nipponensis.