Intraspecific genetic diversity of Korean isolates of Phytophthora drechsleri was investigated based on PCR-RFLP of rDNA along with closely related species in the genus; P. cryptogea, P. melonis, P. erythroseptica, P. cinnamomi, P. cambivora and P. cactorum. Gene regions of nuclear small subunit and internal transcribed spacer (ITS) in rDNA were amplified with polymerase chain reaction and digested with 9 restriction enzymes. Phytophthora species was readily differentiated from each other based on the digestion patterns, however, P. cryptogea was not separable from some isolates of P. drechsleri. Twenty one isolates of P. drechsleri originated from 15 host plants were divided into three distinct groups designated as PdG1, PdG2 and PdG3, respectively. Four isolates in PdG1 were originated from green vegetables and tomato and nine isolates in PdG2 were mainly isolated from medicinal plants. The two groups showed 95.3% homology and four isolates of P. cyptogea came under the groups. However, Eight isolates in PdG3 collected from cucurbits were clearly differentiated from those of PdG1 and PdG2 by 66.5% homology, but completely matched with a Taiwan isolate of P. melonis. Results indicated that three distinct groups exist in Korean isolates of P. drechleri and each group has host preference. In addition, reclassification of the cucurbits isolates are reserved because of their distinct genetic characters from other intraspecific groups in P. drechsleri.
A technique based on the polymerase chain reaction (PCR) for the specific detection of genus Phytophthora and Phytophthora cryptogea-P. drechsleri complex group was developed using nucleotide sequence information of ribosomal DNA (rDNA) regions. The internal transcribed spacers (ITS) including 5.8S were sequenced for P. cryptogea-P. drechsleri complex group and its related species. Two pairs of oligonucleotide primers were designed. Primer pair ITS1/Phy amplified ca. 240 bp fragment in 12 out of 13 specie of Phytophthora, but not in Pythium spp., Fusarium spp.and Rhizoctonia solani. Primer pair rPhy/Pcd amplified 549 bp fragment only in P. cryptogea-P. drechsleri complex group, but not in other Phytophthora spp.and other genera. Specific PCR amplification using the primers was successful in detecting Phytophthora and P. cryptogea-P. drechsleri complex group in diseased plants.
Cultivation of a native wild vegetable, Ligularia fischeri, is hampered by Phytophthora sp. Infected plants showed wilt and eventual death due to rots on the root and basal portion. Eight isolates collected were all identified as P. drechsleri based on their mycological characteristics. The fungi showed relatively strong pathogenicity to L. Fischeri, mild to Aster scaber and Codonoposis lanceolata, and none to Circium setidens and Pimpinella brachycarpa. This is the first report of Phytophthora root rot on wild vegetables in Korea.
Since 1995, boxthorn bight caused by Phytophthora spp. has occurred at Chongyang areas in Chungnam province. Infected plants showed yellows and wilt at early stage, but the symptom rapidly progressed into blight due to the decay of roots and basal stem tissues. The disease was relatively severe in poorly drained lowlands and incidence reached ca. 20% in some fields. Two species of Phytophthora were constantly isolated from freshly infected roots and asal stems. Among 39 isolates collected, 26 were identified as P. nicotianae and 13 as P. drechsleri based on their mycological characteristics. Both fungi showed strong pathogenicity to boxthorn cv. Chongyang No. 1. However, the former expressed stronger pathogenicity than the latter. Phytophthora blight of boxthorn caused by the fungi has not been reported n Korea previously.
Phytophthora root rot of Chniese cabbage and spinach is reported for the first time in Korea. The diseases ocurred at Yangju, Seosan and Yeocheon in Korea from 1995 through 1998, mainly in lowland and submerged areas. Symptoms consisted of stunt, yellows, wilt and eventual death due to root rot. Fourteen isolates collected from naturally infected plants were all identified as P. drechsleri based on mycological characteristics. PCR-RFLP analysis of rDNA of the isolates confirmed the above result, since the restriction band patterns of the small subunit and internal transcribed spacers were identical to P. drechsleri and P. cryptogea, but distinct from closely related species of P. erythroseptica, P. cambivora, P. sojae and P. megasperma. The pathogen showed strong pathogenicity to Chinese cabbage, moderate to spinach, radish, cabbage and tomato, and weak or none to brown mustard, kale, chicory and pepper in pathogenicity tests.
Kim, Dayeon;Lee, Sang Yeob;Ahn, Seong Ho;Han, Ji Hee;Park, Jin Woo
The Plant Pathology Journal
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제36권3호
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pp.244-254
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2020
Gom-chwi (Ligularia fischeri) is severely infected with Phytophthora drechsleri, the causal organism of Phytophthora root rot, an economically important crop disease that needs management throughout the cultivation period. In the present study, Phytophthora root rot was controlled by using bacterial isolates from rhizosphere soils collected from various plants and screened for antagonistic activity against P. drechsleri. A total of 172 bacterial strains were isolated, of which, 49 strains showed antagonistic activities by dual culture assay. In the seedling assay, six out of the 49 strains showed a predominant effect on suppressing P. drechsleri. Among the six strains, the ObRS-5 strain showed remarkable against P. drechsleri when treated with seed dipping or soil drenching. The ObRS-5 strain was identified as Enterobacter asburiae based on 16S ribosomal RNA gene sequences analysis. The bacterial cells of E. asburiae ObRS-5 significantly suppressed sporangium formation and zoospore germination in P. drechsleri by 87.4% and 66.7%, respectively. In addition, culture filtrate of E. asburiae ObRS-5 also significantly inhibited sporangium formation and zoospore germination by 97.0% and 67.6%, respectively. Soil drenched bacterial cells, filtrate, and culture solution of E. asburiae ObRS-5 effectively suppressed Phytophthora root rot by 63.2%, 57.9%, and 81.1%, respectively. Thus, E. asburiae ObRS-5 could be used as a potential agent for the biological control of Phytophthora root rot infecting gom-chwi.
Phytophthora root rot of lettuce, which has not been reported in Korea before, occurred severely in liquid hydroponic culture. The disease occurred in all seasons and was most severe in summer from June to August, showing over 90% infection rate in some farms. A total of 51 isolates collected from various farms were all identified as Phytophthora drechsleri. The fungus showed strong pathogenicity to lettuce and Chinese cabbage, moderate pathogenicity to cucurbits and tomato, and weak pathogenicity to pepper. However, the fungus was not pathogenic to other leafy vegetables namely: chicory, kale, endive, garland chrysanthemum, spinach beet, and perilla. Among 10 species of Phytophtora inoculated to lettuce, only P. drechsleri and P. cryptogea were found pathogenic.
본 연구 결과 2000년 지역적으로 재배적 환경이 다른 수원, 안동, 영주의 백출 재배 포장에서 발생한 이병주들과 토양 시료로부터 SS-배지와 Jee-배지를 이용하여 분리된 균들은 백출 역병의 원인균인 P. drechsleri로 확인되었다. 이들 분리균 들은 격막이 없는 다량의 팽윤균사를 형성하며, 10% V8A 배지에 배양한 경우 PDA배지에 배양한 경우보다 빠른 균생장 속도를 보이며 $5^{\circ}C$이하와 $40^{\circ}C$이상에서는 전혀 균 생장이 이루어지지 않았다. 10% V8A 배지에서 균을 배양한 후 멸균수와 함께 균질화한 균사-유주자 현탁액을 접종원으로 하여 다량의 유묘에 접종한 결과 $5.0%{\sim}26.4%$와 $23.5%{\sim}72.2%$로 다양한 병반율과 이병주율이 확인되어 효과적인 병원성 검정이 이루어 졌다. 안동지역의 토양시료로부터 분리된 P-A200073 균주와 수원지역의 이병주 뿌리로부터 분리된 P-9755가 병원성이 높아 각각 $26.4%{\sim}63.2%$와 $25.1%{\sim}72.2%$의 병반율과 이병주율을 보였으나 무처리구의 경우 이병주가 발생하지 않았다. 접종 이병주의 조직으로부터 균 재 분리를 시도한 결과 대부분의 뿌리와 땅 가줄기에서 P. drechsleri가 분리되었으나 병반을 보이는 상위 줄기와 엽 조직으로부터는 균이 분리되지 않았다.
Antagonistic rhizobacteria, more specifically fluorescent pseudomonads and certain species of Bacillus, are known as biocontrol agents of fungal root diseases of agronomic crops. In this study, 144 bacteria were isolated from cucumber rhizosphere and screened as potential biological control agents against Phytophthora drechsleri, the causal agent of cucumber root rot, in vitro condition. Non-volatile compounds of 23 isolates showed noticeable inhibition zone (> 30%) against P. drechsleri, whereas volatile compounds of 7 isolates could prevent more than 30% of the mycelial growth of the fungus. All promising isolates, except of Pseudomonas flourescens V69, promoted significantly plant growth under in vitro condition. P. flourescens CV69 and V11 exhibited the highest colonization on the root. Results of the greenhouse studies showed that a reduction in disease incidence by use of some strains, and particularly use of strains CV6 and V11 as a soil treatment, exhibited a reduction in disease incidence so that suppressed disease by 85.71 and 69.39% respectively. Pseudomonas flourescens CV6 significantly suppressed disease in comparison to Ridomil fungicide. The use of mixture bacterial strains in the soil inoculated by the fungus resulting in falling down the most of the plants which didn't show significant difference with infected control soils without bacteria.
Phytophthora 속의 핵(ypt 유전자, rDNA-IGS region) 및 미토콘드리아(Cox 유전자, $\beta$-tubline 유전자, EF1A 유전자) 내에 존재하는 5가지 유전자 영역을 이용하여 국내 Phytophthora 속 14종의 유전적 다양성을 분석하였다. 국내 Phytophthora 속은 외국의 Phytophthora 속과 동일한 clade를 형성하였으나, 외국의 Phytophthora 속과 마찬가지로 본 연구에서도 분자생물학적 분류와 형태학적 분류와는 연관성을 찾기 어려웠다. 기존에 보고된 국내 P. palmivora KACC 40167 균주의 그룹이 국내에서 보고된 분류체계와 일치하지 않아 추후 재검토가 필요하였다. P. cryptogea-P. drechsleri complex group 내 국내 P. cryptogea KACC 40161 균주와 P. drechsleri KACC 40195 균주는 서로 94% 이상의 유사도를 보여 재동정이 필요하였으며, P. parasitica와 P. nicotianae간의 유사도가 99% 이상으로 나타나 이 두 종간에 통일된 종명이 요구된다. 또한 현재 분자계통학상 5그룹으로 구분된 국내 Phytophthora 속을 외국균주들과 비교하여 10개의 그룹으로 새롭게 재분류하였다. 이러한 결과들은 국내 Phytophthora 속의 유전적 다양성 연구를 위해 유용한 자료가 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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