• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제17권11호
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• pp.1591-1598
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• 2004

To isolate the $\beta$-galactosidase producing thermophilic bacteria, samples of mud and water were collected from hot springs of avolcanic area near Golden Springs in New Zealand. Among eleven isolated strains, the strain of KNOUC112 produced the highest amounts of $\beta$-galactosidase at 40 h incubation time (0.013 unit). This strain was aerobic, asporogenic bacilli, immobile, gram negative, catalase positive, oxidase positive, and pigment producing. Optimum growth was at 70-72$^{\circ}C$, pH 7.0-7.2, and it could grow in the presence of 3% NaCl. The main fatty acids of cell components were iso-15:0 (30.26%), and iso-17:0 (31.31%). Based on morphological and biochemical properties and fatty acid composition, the strain could be identified as genus Thermus, and finally as Thermus thermophilus by phylogenetic analysis based on 16S rRNA sequence. So the strain is designated as Thermus thermophilus KNOUC112. A gene from Thermus thermophilus KNOUC112 encoding $\beta$-galactosidase was amplified by PCR using redundancy primers prepared based on the structure of $\beta$-galactosidase gene of Thermus sp. A4 and Thermus sp. strain T2, cloned and expressed in E. coli JM109 DE3. The gene of Thermus thermophilus KNOUC112 $\beta$-galactosidase(KNOUC112$\beta$-gal) consisted of a 1,938 bp open reading frame, encoding a protein of 73 kDa that was composed of 645 amino acids. KNOUC112$\beta$-gal was expressed as dimer and trimer in E. coli JM109 (DE3) via pET-5b.

• 한국식품과학회지
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• 제31권6호
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• pp.1648-1653
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• 1999

새우젓으로부터 혈전용해효소를 생산하는 균주를 분리하여 Bacillus sp.로 동정하였다. Bacillus sp. S19는 screening 배지에서는 18 U/mL의 효소를 생산하였다. 그러나 2% soluble starch, 2% skim milk, 3% NaCl(pH 7.5)의 최적화된 배지로 $37^{\circ}C$에서 72시간 동안 배양하였을 경우 효소활성이 약 3배 증가된 62 U/mL의 효소 생산을 결과하였다.

• 한국대기환경학회지
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• 제23권4호
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• pp.457-465
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• 2007

This study was performed to estimate the gas-particle partitioning of organochlorine pesticides (OCPs) in atmosphere, the samples were collected by PUF high volume air sampler for two years from June, 2000 to June, 2002. The gas phase fraction of ${\alpha/\gamma}-HCH$, heptachlor epoxide, ${\alpha/\gamma}-chlordane$ and trans-nonachlor was over 90%. But the gas phase fraction of ${\beta}-HCH$, p,p'-DDE, endosulfan sulfate, p,p'-DDD and p,p'-DDT was range of 20% through 80%, which means the gas phase fraction of OCPs components described above is sensitive to temperature. The correlation between the gas phase fraction and molecular weight of each OCPs component was not found in this research. The slope of regression line between gas-particle partitioning coefficient(${\log}K_p$) and subcooled liquid vapor(${\log}{P^o}_L$), gal-particle partitioning coefficient(${\log}K_p$) and octanol-air partitioning coefficient(${\log}K_{oa}$) which show -0.54 and 0.43 was not steep. So the equilibrium state between gas and particle was not reached and in this state the particulate fraction was low.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권1호
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• pp.19-26
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• 1996

본 연구는 체외에서 생산된 돼지수정란에 외래유전자를 미세주입후 체외 배 발달과 유전자 발현을 조사하기 위하여 실시하였다. 체외수정후 18∼20 시간 사이에 LacZ 유전자와 산양 성장호르몬 유전자를 미세주입하였으며, 체외 배 발달율과 유전자 발현은 미세주입후 9일간 체외배양을 실시한 다음 조사하였다. 돼지수정란을 원심분리하여 전핵을 관찰한 결과 60.3%의 난자에서 전핵이 가시화되었다. 또한 유전자가 미세주입된 수정란중 상실배와 배반포까지 발달한 비율은 각각 8.6, 9.1%로 대조구의 발달율 19.0, 20.8%보다 유의하게 낮았다. 그러나, NCSU23 배양액에 4일간 배양후 EMEM 배양액으로 교체하여 배양한 결과, 배반포 및 부화배반포까지 높은 발달율(19.4%)을 나타내었다. X-gal 염색의 결과로서, LacZ의 발현을 나타낸 수정란의 비율은 상살배, 배반포 단계에서 40.0, 42.9%로 나타났으나, 이들 형질전환 수정란의 대부분은 mosaic 현상이 관찰되었다. 또한 PCR 부분에서, gGH 유전자가 도입된 수정란의 비율은 상실배, 배반포단계에서 45.0, 44.4%로 X-gal 염색의 결과와 유의한 차이가 없었다. 따라서 본 실험에서 얻어진 결과들은 체외에서 생산된 돼지수정란은 미세주입후에도 배반포 및 부화배반포까지 성공적으로 발달할 수 있다는 것을 입증하였다. 또한 체외성숙, 수정된 돼지수정란을 이용하여 형질전환 돼지 생산의 가능성을 시사하고 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제49권6호
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• pp.676-684
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• 2017

생활 식습관의 변화와 비만은 성인성 대사질환 증가를 급속히 증가시켜왔고, 이에 따라 간내 지방축적으로 야기된 간염질환인 NAFLD의 유병률도 ~33%의 수준으로 높게 나타나고 있어 간경변증, 간세포암종을 포함한 간손상의 진행을 심각하게 고려해야 할 시점이다. 특히 알코올섭취와 관계없이 비만과 연계된 인슐린 저항성 간조직에서 지방간염과 간경화를 시작으로 간손상이 지속적으로 일어난다는 점에서 비교적 가벼운 간소견을 보이는 NAFLD라 할지라도 적극적인 치료의 대상으로 해야 한다. 본 연구에서 $\text\tiny{D}$-GalN/LPS로 유도된 급성간독성의 지표들(ALT, AST, ALP 및 LDH)이 SGBE 투여 시 유의한 수준으로 감소되어 효과적인 간 보호 효과가 입증되었으며 세포수준에서 NAFLD에서 높게 나타나는 염증성 사이토카인($TNF{\alpha}$, IL-6)의 발현이 현격히 억제되어 비만과 인슐린저항성으로 인한 간 내 지방의 침착으로 유발되는 NAFLD의 염증반응 조절이 예상된다. 특히 간 조직 H&E 염색 및 주요장기 비교분석에서 SGBE 투여 시 간 손상의 특징이 최소화 또는 정상소견을 나타냈을 뿐 아니라 주요장기(간, 비장, 신장 및 위)도 간 손상의 특징을 나타내지 않아 안전하게 사용할 수 있는 NAFLD 소재로 사용이 가능할 것으로 생각된다. 이와 같은 SGBE의 효능은 신호전달 단백질인 p38의 제어를 통해 NAFLD 유발 및 악화의 주된 cytokine인 $TNF{\alpha}$의 생성을 억제한 결과로 생각되며, 이는 SGBE에 포함된 linoleic acid 및 SGBE에 독특하게 높게 나타나는 ginsenoside Re 및 Rd가 주된 역할을 한 것으로 판단된다. 본 연구결과는 SGBE가 효과적인 간 보호 효능을 가지며 특히 비만과 인슐린저항성 질환(2형 당뇨 등)과 상관관계가 깊은 NAFLD에 유용한 보조치료법이 가능함을 제시하고 있어 간기능개선 및 보호 소재로서 개발이 기대된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제32권3호
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• pp.199-205
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• 2004

Bifidobacterium longum SJ32 균주로부터 cloning한 sucrose phosphorylase 유전자를 포함하는 8.6 kb의 EclRI 단편의 염기서열을 결정하였다. 5개의 open reading frame이 존재하였고, 상동성 검색의 결과, sucrose대사에 관여하는 sucrose phosphorylase (ScrP), sucrose transporter (ScrT), GalR-LacI-type transcriptional regulator (ScrR) 유전자의 존재를 확인하였다. SJ32 균주의 scrPTR 유전자군은 다른 B. longum균주의 scrPTR과 배열이 동일하고, 각 유전자 산물이 아미노산 수준에서 94%이상의 상동성을 가지고 있지만, 주변 유전자는 다르게 나타나 B. longum균주 간의 scrPTR 유전자군의 horizontal transfer를 추정하게 한다. 대장균에서의 scrP와 scrT의 동시 발현은 세포 내로의 sucrose 유입을 증가시켜 sucrose phosphorylase의 활성 증가에 영향을 주는 것으로 나타나, scrT가 sucrose transporter유전자임을 뒷받침한다. 기존에 보고된 B. longum NCC2705균주의 유전체로부터 scrPTR외에도 sucrose대사에 관여하는 다양한 sucrose multiple transport system에 관여하는 유전자의 존재가 확인되어, B. longum이 다양한 sucrose유입체계를 보유하고 있음이 추정된다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권12호
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• pp.6191-6196
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• 2012

Aims and Background: Traditional chemotherapy strategies for human leukemia commonly use drugs based on cytotoxicity to eradicate cancer cells. One predicament is that substantial damage to normal tissues is likely to occur in the course of standard treatments. Obviously, it is urgent to explore therapies that can effectively eliminate malignant cells without affecting normal cells. Our previous studies indicated that ginsenoside $Rg_1$ ($Rg_1$), a major active pharmacological ingredient of ginseng, could delay normal hematopoietic stem cell senescence. However, whether $Rg_1$ can induce cancer cell senescence is still unclear. Methods: In the current study, human leukemia K562 cells were subjected to $Rg_1$ exposure. The optimal drug concentration and duration with K562 cells was obtained by MTT colorimetric test. Effects of $Rg_1$ on cell cycle were analyzed using flow cytometry and by SA-${\beta}$-Gal staining. Colony-forming ability was measured by colony-assay. Telomere lengths were assessed by Southern blotting and expression of senescence-associated proteins P21, P16 and RB by Western blotting. Ultrastructural morphology changes were observed by transmission electron microscopy. Results: K562 cells demonstrated a maximum proliferation inhibition rate with an $Rg_1$ concentration of $20{\mu}\;mol{\cdot}L^{-1}$ for 48h, the cells exhibiting dramatic morphological alterations including an enlarged and flat cellular morphology, larger mitochondria and increased number of lysosomes. Senescence associated-${\beta}$-galactosidase (SA-${\beta}$-Gal) activity was increased. K562 cells also had decreased ability for colony formation, and shortened telomere length as well as reduction of proliferating potential and arrestin $G_2$/M phase after $Rg_1$ interaction. The senescence associated proteins P21, P16 and RB were significantly up-regulated. Conclusion: Ginsenoside $Rg_1$ can induce a state of senescence in human leukemia K562 cells, which is associated with p21-Rb and p16-Rb pathways.

• 미생물학회지
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• 제42권3호
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• pp.216-222
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• 2006

[ ${\beta}-Galactosidase$ ] (lactase)를 생산하는 유산균을 선별하고 그들이 생산하는 ${\beta}-galactosidase$의 특성을 조사하였다. X-gal이 포함된 MRS배지에서 푸른색을 나타내는 약 100여개의 콜로니를 김치로부터 분리하였다. 그들 중 ET-1과 LA-12 두 균주를 최종 선별하였으며, 16S rDNa 염기서열 분석을 통해 각 각 Lactobacillus fermentum과 L. acidophilus와 상동성이 높은 Lactobacillus 속으로 동정되었다. 선별된 두 균주는 높은 ${\beta}-galactosidase$ activeity와 우수한 생존력을 나타내었으며, 이들이 생산하는 ${\beta}-galactosidase$의 최적 활성조건을 조사한 결과, 반응온도 $55^{\circ}C$에서 가장 높은 활성을 나타내었으며, 반응 pH의 경우 ET-1은 pH 5.5에서 최고 활성을 나타내었고, LA-12는 pH7.0에서 가장 높은 활성을 보였다. 선별 유산균 ET-1과 LA-12는 위액과 담즙산액에 대해 우수한 내성을 나타내었다. 두 개의 선별 균주는 인공위액에 3시간 배양 후 초기 생균수와 비교하여 생균수 변화가 거의 없었고, 담즙산액으로 사용한 0.3% oxgall에서 24시간 반응 후에도 1 log cycle 정도 감소된 $10^8CFU/ml$의 생균수를 유지하였다. 이러한 결과를 바탕으로 유산균 ET-1과 LA-12는 유제품 산업에 이용 가능성이 크다고 판단된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제11권5호
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• pp.498-502
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• 1998

The present study was designed, fIrst to develop the new methodology to measure the bioluminescence activity easily in live developing bovine embryos by photoncounting, and secondly to compare the expression efficiency of four luciferase reporter genes in bovine embryos at four- to 16-cell stages. In experiment 1, equimolar pSVlacZ and pSVEluc were microinjected into the pronucleus of fertilized bovine oocytes. At 2 days after micro injection, bioluminescence activity of these embryos was measured by photoncounting with a luminometer for 1 min, and lacZ gene expression in the same embryos was assayed by X-gal staining. All the luciferase-positive oocytes showed some bacterial ${\beta}$-galactosidase activity irrespective of the intensity. In experiment 2, four firefly luciferase genes (pTKEluc, pTK6WEluc, pSVEluc and pMiwluc) were introduced by micro injection, and the injected embryos were cultured for the following 2 days. Detection of the luciferase gene expression was done by photoncounting at 5 to 55 min. Over the measurement period, the luciferase activity was almost constant irrespective of the transgenes microinjected. The luciferase activity and expression efficiency at 2 days after microinjection were not significantly affected by the difference in the microinjected transgenes. The present results demonstrated that the bioluminescence activity in live developing bovine embryos could be measured quickly by photoncounting.

• Macromolecular Research
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• 제12권4호
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• pp.407-412
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• 2004

A new hydroxyl group-containing conjugated ionic polymer, poly[2-ethynyl-N-(p-hydroxyphenylethyl)pyridinium bromide], was synthesized by the activated polymerization of 2-ethynylpyridine with p-(2-bromoethyl) phenol without any additional initiator or catalyst. The polymerization proceeded well to give a moderate yield (65%) of polymer at a reaction temparature of 90$^{\circ}C$. Another polymer, poly[2-ethynyl-N-(p-hydroxyphenylethyl)pyridinium tetraphenylborate], was readily prepared by the ion-exchange reaction of poly[2-ethynyl-N-(p-hydroxyphenylethyl)pyridinium bromide] with sodium tetraphenylborate. These polymers were completely soluble in organic solvents such as DMF, DMSO, and acetone, but insoluble in water and ether. Instrumental analyses, such as NMR, IR, and UV-Vis spectroscopies, indicated that the new materials have conjugated polymer backbone systems with the designed substituents and counter anions. X-Ray diffraction analyses of the polymers indicated that they were mostly amorphous.