Background: In this study, we investigated the potential use of keratin for oral tissue regeneration. Keratin is well-known for its effectiveness in skin regeneration by promoting keratinization and enhancing the elasticity and activity of fibroblasts. Because of its structural stability, high storability, biocompatibility, and safety in humans, existing research has predominantly focused on its role in skin wound healing. Herein, we propose using keratin proteins as biocompatible materials for dental applications. Methods: To assess the suitability of alpha-keratin protein as a substrate for cell culture, keratin was extracted from human hair via PEGylation. Viabilities of primary human gingival fibroblasts (HGFs) and human oral keratinocytes (HOKs) were assessed. Fluorescence immunostaining and migration assays were conducted using a fluorescence microscope and confocal laser scanning microscope. Wound healing and migration assays were performed using automated software to analyze the experimental readout and gap closure rate. Results: We confirmed the extraction of alpha-keratin and formation of the PEG-g-keratin complex. Treatment of HGFs with keratin protein at a concentration of 5 mg/ml promoted proliferation and maintained cell viability in the test group compared to the control group. HOKs treated with 5 mg/ml keratin exhibited a slight decrease in cell proliferation and activity after 48 hours compared to the untreated group, followed by an increase after 72 hours. Wound healing and migration assays revealed rapid closure of the area covered by HOKs over time following keratin treatment. Additionally, HOKs exhibited changes in cell morphology and increased the expression of the mesenchymal marker vimentin. Conclusion: Our study demonstrated the potential of hair keratin for soft tissue regeneration, with potential future applications in clinical settings for wound healing.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.39
no.2
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pp.55-62
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2013
Bone tissue engineering is one of the important therapeutic approaches to the regeneration of bones in the entire field of regeneration medicine. Mesenchymal stem cells (MSCs) are actively discussed as material for bone tissue engineering due to their ability to differentiate into autologous bone. MSCs are able to differentiate into different lineages: osteo/odontogenic, adipogenic, and neurogenic. The tissue of origin for MSCs defines them as bone marrow-derived stem cells, adipose tissue-derived stem cells, and, among many others, dental stem cells. According to the tissue of origin, DSCs are further stratified into dental pulp stem cells, periodontal ligament stem cells, stem cells from apical papilla, stem cells from human exfoliated deciduous teeth, dental follicle precursor cells, and dental papilla cells. There are numerous in vitro/in vivo reports suggesting successful mineralization potential or osteo/odontogenic ability of MSCs. Still, there is further need for the optimization of MSCs-based tissue engineering methods, and the introduction of genes related to osteo/odontogenic differentiation into MSCs might aid in the process. In this review, articles that reported enhanced osteo/odontogenic differentiation with gene introduction into MSCs will be discussed to provide a background for successful bone tissue engineering using MSCs with artificially introduced genes.
Background: For an effective bone graft for reconstruction of the maxillofacial region, an adequate vascular network will be required to supply blood, osteoprogenitor cells, and growth factors. We previously reported that the secretomes of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSC-CM) contain numerous growth factors such as insulin-like growth factor (IGF)-1, transforming growth factor $(TGF)-{\beta}1$, and vascular endothelial growth factor (VEGF), which can affect the cellular characteristics and behavior of regenerating bone cells. We hypothesized that angiogenesis is an important step for bone regeneration, and VEGF is one of the crucial factors in MSC-CM that would enhance its osteogenic potential. In the present study, we focused on VEGF in MSC-CM and evaluated the angiogenic and osteogenic potentials of MSC-CM for bone regeneration. Methods: Cytokines in MSC-CM were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured with MSC-CM or MSC-CM with anti-VEGF antibody (MSC-CM + anti-VEGF) for neutralization, and tube formation was evaluated. For the evaluation of bone and blood vessel formation with micro-computed tomography (micro-CT) and for the histological and immunohistochemical analyses, a rat calvarial bone defect model was used. Results: The concentrations of IGF-1, VEGF, and $TGF-{\beta}1$ in MSC-CM were $1515.6{\pm}211.8pg/mL$, $465.8{\pm}108.8pg/mL$, and $339.8{\pm}14.4pg/mL$, respectively. Tube formation of HUVECs, bone formation, and blood vessel formation were increased in the MSC-CM group but decreased in the MSC-CM + anti-VEGF group. Histological findings suggested that new bone formation in the entire defect was observed in the MSC-CM group although it was decreased in the MSC-CM + anti-VEGF group. Immunohistochemistry indicated that angiogenesis and migration of endogenous stem cells were much more abundant in the MSC-CM group than in the MSC-CM + anti-VEGF group. Conclusions: VEGF is considered a crucial factor in MSC-CM, and MSC-CM is proposed to be an adequate therapeutic agent for bone regeneration with angiogenesis.
We evaluated a self-inflatable osmotic tissue expander for its utility in creating sufficient soft tissue elongation for primary closure after bone grafting. Six patients with alveolar defects who required vertical augmentation of >6 mm before implant placement were enrolled. All had more than three prior surgeries, and flap advancement for primary coverage was restricted by severely fibrosed scars. Expanders were inserted beneath the flap and fixed with a screw. After 4 weeks, expander removal and bone grafting were performed simultaneously. A vertical block autograft and guided bone regeneration and distraction osteogenesis were performed. Expansion was sufficient to cover the grafted area without additional periosteal incision. Complications included mucosal perforation and displacement of the expander. All augmentation procedures healed uneventfully and the osseous implants were successfully placed. The tissue expander may facilitate primary closure by increasing soft tissue volume. In our experience, this device is effective, rapid, and minimally invasive, especially in fibrous scar tissue.
Bioactive flavonoids have been shown to improve the biological activity of stem cells derived from different sources in tissue regeneration. The goal of this study was to see how naringin, a natural flavonoid discovered in citrus fruits, affected the biological properties of human dental pulp stem cells (HDPSCs). In this study, we found that naringin increases the migratory ability of HDPSCs. Naringin increased matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and C-X-C chemokine receptor type 4 (CXCR4) mRNA and protein expression in HDPSCs. ARP100, a selective MMP-2 inhibitor, and AMD3100, a CXCR4 antagonist, both inhibited the naringin-induced migration of HDPSCs. Furthermore, naringin increased osteogenic differentiation of HDPSCs and the expression of the osteogenic-related marker, alkaline phosphatase in HDPSCs. Taken together, our findings suggest that naringin may be beneficial on dental tissue or bone regeneration by increasing the biological activities of HDPSCs.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.31
no.6
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pp.492-495
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2005
The role of cultured bone marrow stromal cells (BMSCs) in peripheral nerve regeneration was examined using an established rabbit peroneal nerve regeneration model. A 15-mm peroneal nerve defect was bridged with a vein filled with BMSCs $(1{\times}10^6)$, which had been embedded in collagen gel. On the contralateral side, the defect was bridged with a vein filled with collagen gel alone. When the regenerated tissue was examined 4, 8 and 12 weeks after grafting, the number and diameter of the myelinated fibers in the side with the BMSCs were significantly higher than in the control side without the BMSCs. This demonstrates the potential of using cultured BMSCs in peripheral nerve regeneration.
Park, Ju-Un;Kim, Byung-Ock;Park, Joo-Cheol;Jang, Hyun-Seon
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.36
no.1
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pp.27-37
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2006
Although the main purpose of periodontal treatment to regenerate is the complete regeneration of periodontal tissue due to periodontal disease, most of the treatment cannot meet such purpose because healing by long epithelial junction. Therefore, diverse materials of resorbable and non-resorbable have been used to regenerate the periodontal tissue. Due to high risk of exposure and necessity of secondary surgical procedure when using non-resorbable membrane, guided tissue regeneration using the resorbable membrane has gain popularity, recently. However, present resorbable membrane has the disadvantage of not having sufficient time to regenerate date to the difference of resorption rate according to surgical site. Meanwhile, other than the structure stability and facile manipulation, acellular dermal matrix has been reported to be a possible scaffold for cellular proliferation due to rapid revascularization and favorable physical properties for cellular attachment and proliferation. The purpose of this study is to estimate the influence of acellular dermal matrix on periodontal ligament, cementum and alveolar bone when acellular dermal matrix is implanted to 1-wall alveolar bone defect. 4 dogs of 12 to 16 month old irrelevant to sex , which below 15Kg of body weight, has been used in this study. ADM has been used for the material of guided tissue regeneration. The 3rd premolar of the lower jaw was extracted bilaterally and awaited for self-healing. subsequently buccal and lingual flap was elevated to form one wall intrabony defect with the depth and width of 4mm on the distal surface of 2nd premolar and the mesial surface of 4th premolar. After the removal of periodontal ligament by root planing. notch was formed on the basal position. Following the root surface treatment, while the control group had the flap sutured without any treatment on surgically induced intrabony defect. Following the root surface treatment, the flap of intrabony defect was sutured with the ADM inserted while the control group sutured without any insertion. The histologic specimen was observed after 4 and 8 weeks of treatment. The control group was partially regenerated by periodontal ligament, new cementum and new alveolar bone. the level of regeneration is not reached on the previous formed notch. but, experimental group was fully regenerated by functionally oriented periodontal ligament fiber. new cementum and new alveolar bone. In conclusion, we think that ADM seems to be used by scaffold for periodontal ligament cells and the matrix is expected to use on guided tissue regeneration.
The present study was performed to evaluate the amount of bony regeneration following the guided tissue regeneration(GTR). Re-entry procedure has been performed at 1 year following the GTR with Gore-tex membranes on the furcal defects and the amount of bony regeneration was measured. Sites treatedwith open flap procedures were used as controls. The results reveated that significant amount of bone could be regenerated through the GTR procedures compared with convention flap procedures.
Recently, the clinical applications of the autogenous cancellous bone from the proximal tibial metaphysis show satisfactory results in the repair of maxillofacial bony defect or deformity. The proximal tibia has the potential to yield viable cancellous bone with a minimum of morbidity. The purpose of this study was to investigate the regeneration of a full thickness proximal tibial bone defect with covering or uncovering of cortical bone. The follow-up periods were 4, 8, and 12 weeks. Bone defect of right side was uncovered and left side was covered with cortical bone. In the experimental group (uncovered cortical bone) at 12 weeks, the inside of defect was filled to normal marrow tissue. The cortical bone defect was united of inner, outer callus at 4, 8 weeks in both study group. At 12 weeks, the cortical bone defect was remodeled and invaded by osteoclast (giant cell) in experimental group. In the experimental specimen at 12 weeks, the regenerating tissue of bone defect was not differ from the control group.
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of a novel bone grafting material using an autogeneous tooth (AutoBT) and provide the basis for its clinical application. The AutoBT contains organic and inorganic mineral components and is prepared from autogenous grafting material, thus eliminating the risk of immune reactions that may lead to its rejection. AutoBT can be used as bone material as is has both osteoinduction and osteoconduction activities at guided bone regeneration for implant placement and maxillary sinus graft. Methods: In a total of 63 patients, guided bone regeneration surgery was performed at the time of implant placement, and tissue samples were harvested at the time of the second surgery with the patient's consent. Results: There were no complications in guided bone regeneration using autogeneous tooth. Conclusion: We concluded that AutoBT underwent gradual resorption and was replaced by new bone of excellent quality via osteoinduction and osteoconduction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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