• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제22권10호
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• pp.21.1-21.7
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• 2019

Background: Lactococcus garvieae is one of the most important risk factors in the rainbow trout culture. Therefore, the purpose of this study was to identify and detect strains isolated from rainbow trout suspected of having Lactococcus garvieae using biochemical characteristics and PCR and determination of the degree of severity of isolated strains. Methods: In this study, the cause of lactococcosis in selected rainbow trout farms in Kohkilooieh and Boyerahmad province was assayed. Gram-positive and catalase-negative bacterial isolates were first obtained from selected trout fish farms using conventional biochemical tests and PCR assay. The 10-day LD₅₀ method (concentration causing 50% mortality in 10 days) was used to determine the severity of the isolated bacteria. Results: One bacterial isolate was detected from all sampled fish which confirmed as Lactococcus garvieae using a specific PCR assay based on the 16S rDNA gene by producing a single band of 1107 bp. Analysis of the rate of mortality showed that the 10-day LD₅₀ was 4.6 × 10⁵ CFU/fish. The results of this study showed that isolated bacteria had high severity for rainbow trout. The presence of bacteria in internal organs of suspected fish showed a severe systemic infection in challenged fish. Antibiogram assay also indicated that the isolated Lactococcus garvieae were resistant to some mostly used antibiotics in rainbow trout. Conclusions: According to current research, it can be concluded that the condition of lactococcosis in the studied area is not suitable, and despite the presence of disease, there is no proper action to control and prevent the disease. Unfortunately, isolated bacteria from the studied area have a very high severity compared to bacteria isolated from other regions of the country or other countries. Therefore, further investigation is needed to determine the cause of this difference and possibly in the design of the vaccine.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제18권3호
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• pp.396-402
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• 2005

Three experiments were conducted to determine the effects of dietary arginine concentrations on plasma free amino acid (PAA) concentrations in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum). The first experiment was conducted to determine appropriate post-prandial and food deprivation sampling times in dorsal aorta cannulated rainbow trout averaging 519${\pm}$9.5 g (mean${\pm}$SD) at $16^{\circ}C$. Blood samples were taken at 0, 2, 3, 4, 5, 6 and 24 h after feeding (0 and 24 h blood samples were taken from the same group of fish). PAA concentrations increased by 2 h post-feeding and the concentration of all essential amino acids except histidine peaked at 5 h and returned to 0 time values by 24 h. In the second experiment dorsal aorta cannulated rainbow trout averaging 528${\pm}$11.3 g (mean${\pm}$SD) were divided into 6 groups of 4 fish to study the effect of dietary arginine levels on PAA. After 24 h food deprivation, each group of fish was fed one of six L-amino acid diets containing graded levels of arginine (0.48, 1.08, 1.38, 1.68, 1.98 or 2.58%) by intubation. Blood samples were taken at 0, 5 and 24 h after feeding. Post-prandial (5 h after feeding) plasma-free arginine concentrations (PParg) showed a breakpoint at 1.03% arginine in the diet and post-absorptive (24 h after feeding) plasma free-arginine concentrations (PAarg) showed a breakpoint at 1.38% arginine. PAarg increased linearly from fish fed diets containing arginine between 0.48% and 1.38%, and the concentrations remained constant from fish fed diets containing arginine at or above 1.38%, but were all below PParg at all time points. Results of the third experiment confirm the results that PParg concentrations from fish fed arginine deficient diets were higher than PAarg (0 or 24 h values). Thus, in contrast to mammals and birds, the PParg when arginine is present in the diet as the most limiting amino acid such that it severely limits growth, increases in plasma rather than decreases.

• 한국양식학회지
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• 제17권1호
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• pp.1-7
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• 2004

A rainbow trout uncoupling protein 3 (UCP3) cDNA clone, encoding a 310 amino acid protein, was cloned and sequenced from a liver cDNA library. Two different splice variants designated UCP3-vl and UCP3-v2, were identified through liver cDNA library screening using rainbow trout UCP3 cDNA clone as a probe. UCP3-vl has 3 insertions in the UCP3 cDNA: the first insertion (133 bp), the second (141 bp), and the third (370 bp) were located 126 bp, 334 bp and 532 bp downstream from the start codon, respectively. UCP3-v2 contained a single insertion, identical in sequence and location to the second insertion of UCP3-vl. UCP3, a mitochondrial protein, functions to modulate the efficiency of oxidative phosphorylation. UCP3 has been detected from heart, testis, spinal cord, eye, retina, colon, muscle, brown adipose tissue and white adipose tissue in mammalian animals. Human and rodent UCP3s are highly expressed in skeletal muscle and brown adipose tissue, while they show weak expression of UCP3 in heart and white adipose tissue. In contrast to mammalian studies, RT-PCR and Southern blot analysis of the rainbow trout demonstrated that UCP3 is strongly expressed in liver and heart. UCP3, UCP3-vl, and UCP3-v2 all contain an Ava III short interspersed element (SINE), located in the 3'untraslated region (UTR). PCR using primers from the Ava III SINE and the UCP3 3'UTR region indicates that the UCP3 cDNA is structurally conserved among salmonids and that these primers may be useful for salmonid species genotyping.

• 한국어류학회지
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• 제24권2호
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• pp.118-124
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• 2012

이전 연구에서 넙치유래 재조합 마이오스타틴 프로도메인을 무지개송어에 한달간 침지법을 통하여 처리한 결과 대조군에 비하여 무게가 최대 약 42% 증가되었다. 따라서 본 연구는 재조합 마이오스타틴 프로도메인을 침지법에 의해 처리된 무지개송어와 대조군의 근육으로부터 발현되는 cDNA를 제작하여 마이오스타틴 프로도메인에 의해서 유도된 특정유전자를 선발하기 위하여 ACP (annealing control primer)를 이용한 DDRT법을 통하여 분석하였다. 총 20가지의 ACP를 이용한 결과 2개의 특정 유전자를 분석하였으며, NCBI BLAST 분석결과 Cytochrome P450 mono oxygenase와 Profilin으로 판명되었다. 이 중 Cytochrome P450 mono oxygenase는 대조군보다 발현량이 증가하였으며, Profilin는 대조군에 비해서 발현량이 감소하였다. 이러한 결과를 재확인하기 위하여 두 유전자의 primer를 각각 제작하여 semi-quantitative RT-PCR를 시행한 결과 DDRT법에 의한 분석과 동일하였다. 본 결과는 어류의 성장에서 마이오스타틴 프로도메인의 기능 및 메카니즘에 대한 연구에 유용한 자료가 될 것으로 사료된다.

• 한국양식학회지
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• 제20권3호
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• pp.199-202
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• 2007

본 연구에서는 넙치(Paralichthys olivaceus) 정소로부터 DMRT-1 partial cDNA를 분리하였다. 넙치 DMRT-1은 317개의 염기로 구성되어 있으며, Atlantic halibut, 감성돔 및 무지개 송어와 각각 94%, 85%, 82%의 높은 상동성을 보였다. RT-PCR을 이용하여 DMRT-1 mRNA 발현은 난소보다 정소에서 높게 나타난 것을 관찰할 수 있었다. 또한, 암컷 넙치에 웅성호르몬인 testosterone 처리시 처리 농도에 따라 난소에서 DMRT-1 mRNA 발현이 증가함을 볼 수 있었다. 따라서, DMRT-1은 수컷에서 특이적으로 발현되는 유전자임을 알 수 있으며, 본 연구의 결과는 넙치의 성 전환 및 유도에 대한 기초자료를 제공할 것이다.

• 한국양식학회지
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• 제8권2호
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• pp.141-148
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• 1995

무지개송어 전 암컷 3배체 조기난 생산을 위해 1994년 9월 30일부터 3년생 암컷 친어에 대하여 광주기를 단일 처리하여 조기 산란 및 성전환 유도와 고온 처리에 의한 염색체 조작을 실시하였다. 광주기 조절이 시작된지 1개월째 170마리의 암컷으로부터 340,000개의 난을 얻었다. 그러나, 부화율에 있어서는 자연 상태의 산란기때 부화율에 미치지 못하는 $40\~55\%$ 범위로 평균 $51.3\pm4.2\%$였다. (P<0.05). 수컷으로의 성전환을 위해 $16.5^{\circ}C$의 사육 수온 조건하에서 $17\alpha-methyltestosterone$을 사료 1kg당 3mg 섞어 첫 먹이 공급기부터 55일간 공급하여 성전환율을 조사한 결과 전부 수컷으로 판명되어 $16.5^{\circ}C$의 조건하에서도 성전환이 효율적으로 이루어짐을 알 수 있었다. $13.5^{\circ}C$의 사육수온 조건하에서 3배체를 생산하기 위해 최초 처리 시간 및 고온 처리 기간에 대해 다양한 조건으로 처리한 결과 발안기까지의 생존율에 있어 $15.0\~88.2\%$ 범위로 나타났다. 이때 3배체 유도율은 $36.7\~100\%$ 범위로 다양하였다.

• 한국어병학회지
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• 제34권2호
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• pp.123-131
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• 2021

IHNV는 국내 연어 양식업에서 경제적 손실을 발생시켜왔으며, 연어과 어류에 높은 폐사율을 초래한다. 본 연구에서는 강원도의 연어과 어류로부터 분리된 IHNV 분리주의 계통발생적 분류와 병원성을 조사하였다. 계통발생학적 분석은 IHNV의 303bp를 해당하는 mid-G 영역을 염기 분석하여 수행되었다. 바이러스주 모두 J 유전자형으로 RTDH1709, RTJS1709, MSOK1711, RTYK1711, RTCC1801 그리고 RTHC1802는 J-Nagano형이며, RTYK1801는 J-Shizuoka형에 속하는 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 이전 연구와 일치하게 강원도에서는 두 가지 유전형이 분포한다는 것을 시사한다. 또한, 6개 분리주를 무지개송어 치어의 복강에 주사하여 병원성을 시험한 결과, J-Nagano형인 RTCC1801와 RTJS1709 바이러스주로 주사된 그룹은 100%의 폐사율을 나타냈다. 그 뒤로, J-Nagano형인 RTHC1802, RTDH1709 그리고 MSOK1711 분리주가 주사된 그룹들은 50%, 30% 그리고 20%의 폐사율을 나타났다. 그러나 J-Shizuoka형인 RTYK1711 분리주와 대조군에서는 폐사가 발생하지 않았다. 이러한 결과는 J-Shizuoka형이 J-Nagano형 바이러스 분리주보다 높다고 보고한 기존의 연구결과와 상반되며 J 유전자형 내에서 유전자형과 병원성간의 상관관계가 없는 것을 시사한다. 하지만 본 연구에서는 1개의 J-Shizuoka형 분리주만이 분석되었기 때문에 J 유전자형 내에서 유전자형과 병원성간의 상관관계를 확실하게 알기 위해서는 J 유전자형의 병원성에 대한 추가 조사가 필요할 것으로 보인다.

• 한국양식학회지
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• 제4권2호
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• pp.97-110
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• 1991

1989년 3월부터 1990년 2월까지 정상적인 광주기 상태에서 한달에 한번씩 채취된 무지개 송어 암컷의 혈청중 LH, FSH, estradiol-$17{\beta}$ 농도, albumin, globulin, triglycerides의 변화 그리고 GSI의 변화를 조사하였고, 각 호르몬과 혈청성분 그리고 GSI간의 상관관계를 알기 위하여 본 연구를 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같이 나타났다. 1. 혈청중 LH 수준은 11월에 가장 높게 나타났다. 2. 10월부터 그 이듬해 2월까지 혈청 LH 수준은 점차적으로 낮아지는 경향을 나타내었다. 3. LH 및 FSH와 같은 GTH의 수준은 인공산란직후 낮게 나타났고, 난황형성(vitellosenesis)이 개시되는 늦여름부터 유의하게 증가하였다. 4. 혈청중 FSH 수준은 LH와 estradiol-$17{\beta}$에 대해서 고도의 유의성(P<0.001)을 나타내었다. 5. 혈청중 LH는 estradiol-$17{\beta}$에 대해서 고도의 유의성(P<0.001)을 나타내었다. 6. negative feedback mechanism에 의해서 2월에 estradiol-$17{\beta}$의 수준이 감소하였다. 7. 혈청중 albumin과 total protein의 함량은 난황형성이 개시되는 8월에 유의성있게 증가하다가 산란직전인 11월에 가장 높은 수준을 나타내었다. 8. 혈청중 triglycerides 함량은 8월에 유의하게 증가하였고, 1월에 최고 수준을 나타내었다. 9. 난직경 및 GSI의 크기로 나타나는 난모세포의 성장은 8월에 유의성있게 증가하다가 산란시기인 1월에 최고 수준을 나타내었다. 10. 혈청중 LH와 FSH와의 상관계수는 +0.844이다. 11. 혈청중 LH와 estradiol-$17{\beta}$와의 상관계수는 +0.947이다. 12. 혈청중 FSH와 estradiol-$17{\beta}$와의 상관계수는 +0.894이다. 13. 혈청중 estradiol-$17{\beta}$와 albumin과의 상관계수는 +0.634이다. 14. 혈청중 estradiol-$17{\beta}$와 total protein의 상관계수는 +0.947이다. 15. 혈청중 LH와 GSI와의 상관계수는 +0.506이다. 16. 혈청중 FSH와 estradiol-$17{\beta}$와의 상관계수는 +0.586이다. 17. 혈청중 estradiol-$17{\beta}$와 GSI와의 상관계수는 +0.694이다. 18. 혈청중 LH와 total protein과의 상관계수는 +0.947이다. 19. 혈청중 FSH와 total protein과의 상관계수는 +0.709이다. 20. 혈청중 FSH와 triglycerides와의 상관계수는 +0.549이다. 21. 혈청중 estradiol-$17{\beta}$와 triglycerides와의 상관계수는 +0.673이다. 22. positive feedback mechanism에 의해서 LH, FSH와 estradiol-$17{\beta}$는 간을 자극시켜 albumin, total protein 및 triglycerides를 분필시킴으로서 난황형성(vitellosenesis)에 관여하는 것으로 나타났다.

• 한국어병학회지
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• 제25권3호
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• pp.257-262
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• 2012

본 연구에서는 어체내 IHNV 모니터링에 LAMP법의 사용이 가능 하는지를 검토하기 위해 IHNV를 무지개송어에 인위적으로 감염시킨 후 시간 경과에 따라 LAMP법과 어류세포를 사용한 분리배양법을 이용하여 IHNV 검사를 실시하였다. IHNV를 $10^{6.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{5.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{4.5}\;TCID_{50}$/fish로 복강 주사한 결과, 40%, 0%, 0%의 누적폐사율이 관찰되었다. 폐사어 및 IHNV 접종 후 16일과 28일째에 각 실험구에서 채집한 생존어 5마리를 대상으로 한 IHNV 검사 결과, 폐사어에서 IHNV가 100% (8/8 마리) 분리되었고 (감염가: $10^{4.3}-10^{6.8}\;TCID_{50}/ml$), RT-LAMP법에서도 100% 검출되었다. 16일째 생존한 개체를 대상으로 한 IHNV 검사 결과에서는 $10^{6.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{5.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{4.5}\;TCID_{50}$/fish의 IHNV로 접종한 실험구에서 각각 60% (3/5 마리, 감염가: $10^{2.8}-10^{5.05}\;TCID_{50}/ml$), 20% (1/5 마리, $10^{1.05}\;TCID_{50}/ml$), 60% (3/5 마리, $10^{1.05}-10^{4.8}\;TCID_{50}/ml$) 의 검출율을 보였으나 LAMP법에서는 20% (1/5 마리), 0% (0/5 마리), 20% (1/5 마리) 의 검출율을 나타내었다. 28일째 생존한 개체 및 대조구의 어류에서는 IHNV가 분리 검출되지 않았다. 이상의 연구결과로 LAMP법은 IHNV-생존어에서 바이러스를 모니터링 하는데 한계가 있으나 병어로부터 IHNV를 검출하는데 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료되었다.

• 한국수산과학회지
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• 제32권4호
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• pp.470-475
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• 1999

본 연구는 무지개송어 사료의 어분 대체사료원으로서 육골분(MBM), 우모분(FM), 오징어내장분 (SLP), 가금부산물 (PBP) 및 혈분 (BM)을 특정비율로 혼합하여 제조한 어분대체품(ABPM)을 제작하여 사료내 어분의 대체가능성을 조사하고 사료내 소화율 측정에 이용하는 지표물질인 $Cr_2O_3$ 첨가가 성장에 미치는 영향에 관한 자료를 얻고자 실시하였다. 본 실험사료의 주단백질원으로는 동물성단백 질원으로 북양어분 (White fish meal, WFM)과 축산가공부 산혼합물 (ABPM)을 식물성으로 대두박과 콘글루텐밀을 사용하였다. 사료 1과 사료 2의 사료는 National Research Council(NRC, 1993)자료에 근거하여 조단백질 함량은 $46.5\%$, 가용성 에너지는 16.7 KJ/g (protein, carbohydrate and lipid: 16.7, 16.7 and 37.7 KJ/g)으로 동일하게 맞추어 주었다. 실험사료는 사료 1 (WFM 100), 사료2(ABPM 40), 사료3(상업사료(-Cr)), 사료 4(상업사료+$0.5\%$ $Cr_2O_3$(+Cr))로 4가지를 사용하였다. 일주일간의 예비사육 후 평균무게 2.1g$\pm$0.2인 치어를 30마리씩 3반복으로 무작위 배치하여 4주간 사육한후, 성장속도가 비슷한 평균무게 6.8$\pm$0.3g의 어류를 동일한 사료군내에서 선택하여 20마리씩 2 반복 재배치하여 4주간 사육하였다. 8 주간 사료 공급후 사료 2는 다른 모든 사료구에 비해 증체율 (WG, $\%$)과 사료효율 (FE, $\%$)이 유의적으로 낮았다 (P<0.05). 어체의 혈액분석결과 헤마토크리트t는 전사료구간에 유의차가 없었다 (P>0.05). 전어체 일반성분 분석 결과 수분 및 조단백질 함량은 모든 사료구간에 유의적 차이가 없었으나 (P>0.05), 사료 1의 조지방 함량은 다른 사료구에 비해 유의적으로 높았다 (P<0.05). 어체의 비만도는 사료 2가 다른 사료구에 비해 유의적으로 높았다 (P<0.05). 혈액, 뼈 및 전어체의 인 함량 및 뼈의 회분 함량은 모든 사료구간에 유의적인 차이가 없었다 (P>0.05). 상업사료내 산화크롬을 첨가하거나 혹은 첨가하지 않고 8주간 사육한 결과 산화크롬 $0.5\%$의 8주간 첨가는 성장에 영향을 주지 않았을 뿐 아니라 전어체의 일반성분, 혈장 및 뼈 조직 중의 인과 회분 함량에도 영향을 주지 않았다. 본 실험 결과, 무지개 송어 사료내 어분단백질 대체원으로 본축산가공부산혼합물의 이용은 $40\%$ 수준 이하에서 가능하다고 판단되고 산화크롬은 성장 및 전어체의 일반성분에 영향을 주지 않았으므로 사료내 영양소의 소화율 측정에 $0.5\%$ 의 산화크롬 첨가는 별다른 문제가 없음을 보여주었다.