Background: There are no guidelines for the optimal incubation time or temperature to improve pregnancy outcomes in testicular sperm extraction-intracytoplasmic sperm injection (TESE-ICSI) cycles. We aimed to evaluate whether a 24-hour in vitro culture of testicular spermatozoa affects pregnancy outcomes in TESE-ICSI cycles. Methods: This was a retrospective study of 83 TESE-ICSI cycles using testicular spermatozoa in 46 couples with male partners suffering from nonobstructive or obstructive azoospermia. Sperm retrieval was performed either on the oocyte retrieval (OR) day (65 cycles in 33 couples; group A) or on the day before OR (18 cycles in 13 couples; group B) followed by in vitro culture for 24 hours. The clinical characteristics and pregnancy outcomes, including the number of retrieved oocytes, fertilization rates, embryo transfer rates, implantation and clinical pregnancy rates, were compared between the two groups. Results: There were no differences in terms of clinical characteristics except for the levels of luteinizing hormone (LH) in males. Group B had higher LH levels than group A (4.56±1.24 IU/L vs. 3.67±1.07 IU/L, p= 0.017). Group B showed higher fertilization rate (72.4%±32.1% vs. 59.2%±21.7%, p=0.045), implantation rate (35.0%±34.1% vs. 14.0%±21.5%, p=0.010), pregnancy rate per cycle (80% vs. 39%, p=0.033), and clinical pregnancy rate per cycle (80% vs. 37.5%, p=0.024) than those of group A. Conclusion: Testicular sperm retrieval performed on the day before OR followed by in vitro culture can potentially improve pregnancy outcomes.
Objective: This study aimed to describe a distinct subpopulation of azoospermic patients with isolated elevation of follicle-stimulating hormone (iFSH) and poor outcomes of microdissection testicular sperm extraction (microTESE). Methods: A retrospective analysis of microTESE outcomes was conducted among 565 patients with non-obstructive azoospermia (NOA). Testicular pathology was assessed by the dominant histological pattern and Bergmann-Kliesch score (BKS). Descriptive statistics were presented for the iFSH subgroup. Inhibin B levels, the sperm retrieval rate (SRR), and BKS were compared in iFSH patients and other NOA patients. Results: The overall SRR was 33.3% per microTESE attempt. The median BKS was 0.6 (interquartile range, 0-2). Of all NOA patients, 132 had iFSH, and microTESE was successful only in 11 of those cases, with an SRR of 8.3%, while the total SRR in other NOA patients was 38.1% (p<0.001). iFSH had a sensitivity of 32.1% (95% confidence interval [CI], 27.4%-36.8%) and specificity of 94.1% (95% CI, 90.8-97.5%) as a predictor of negative microTESE outcomes. Conclusion: Patients with iFSH may harbor a distinct testicular phenotype with total loss of the germ cell population and poor outcomes of surgical sperm retrieval.
Kim, Suel-Kee;Kim, Ho-Seung;Lee, Ho-Joon;Park, Yong-Seog;Seo, Ju-Tae;Yoon, Yong-Dal
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.32
no.2
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pp.121-132
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2005
연구목적: 본 연구에서는 비폐쇄성 무정자증 환자에서 나타나는 정자형성과정의 이상과 고환세포의 세포자연사와의 연관관계 여부를 확인하였다. 또한 SELDI-TOF MS 분석을 통하여 고환 내 단백질 발현 양상을 확인하고, 질환에 따른 효과적인 biomarker 개발 가능성 여부를 확인하였다. 재료 및 방법: RT-PCR 및 면역조직화학법을 사용하여 고환에서의 Fas, FasL, Bcl-2, Bax와 Caspase-3의 발현 양상을 확인하고, in situ DNA 3'-end-labelling 방법으로 고환세포의 세포자연사 양상을 확인하였다. SELDI-TOF MS 분석법에 의한 고환의 병리학적 소견에 따른 단백질 발현 변화는 소수성 칩 ($H_4$)을 사용하여 분자량 10~100 kDa 범위 내에서 분석하였다. 결 과: 정상적인 정자형성과정을 보이는 폐쇄성 무정자증 환자의 고환에 비해 지주세포 증후군 (Sertoli cell only syndrome)과 성숙정지 (maturation arrest)를 보이는 고환 내 생식세포와 지주세포에서 세포자연사가 현저하게 증가한 것을 확인할 수 있었다. 세포자연사 관련인자들의 발현 양상을 확인한 결과, 지주세포 증후군과 성숙정지 환자군에서 Fas와 FasL mRNA의 발현이 증가하였으나, bcl-2, bax와 caspase-3 mRNA 발현의 경우에는 두 질환 모두에서 유의한 차이를 확인할 수 없었다. FasL 단백질 발현의 경우, 세포자연사의 증가가 관찰되었던 지주세포 증후군과 성숙정지를 보이는 환자의 간질세포와 지주세포에서 증가하는 양상을 나타내었다. SELDI-TOF MS 분석 결과에서 폐쇄성 무정자증 환자군에 비해 전체적인 단백질 발현양이 지주세포 증후군과 성숙정지 환자의 고환에서 감소하는 양상을 보였으며, 특히, 16.730 kDa 단백질의 현저한 감소를 확인할 수 있었다. 결 론: 본 연구결과를 통해 비폐쇄성 무정자증 환자에서 나타나는 정자형성과정의 장애는 생식세포의 비정상적인 세포자연사와 연관되어 있으며, 고환 내 Fas와 FasL의 비정상적인 발현이 주된 원인인 것을 확인할 수 있었다. 또한, SELDI-TOF MS 분석법을 통한 단백질 발현 양상의 연구는 무정자증 환자에서의 다양한 병리학적 소견을 쉽게 파악할 수 있는 biomarker 발굴뿐만 아니라 질환의 원인규명을 위한 연구에도 유용하게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Kim, H.J.;Kim, Y.C.;Oum, K.B.;Oh, J.H.;Lee, W.S.;Han, S.Y.;Choi, D.H.;Yoon, T.K.;Cha, K.Y.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.22
no.2
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pp.143-148
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1995
To present and assess the efficacy of combination of microsurgical epididymal sperm aspiration(MESA) and intracytoplasmic sperm injection(ICSI) for the treatment of infertility due to unreconstructable obstructive azoospermia or congenital bilateral agenesis of vas deferens (CBAVD), MESA was performed in the 45 husbands ( 16 CBAVD, 29 unreconstructable genital tract obstruction), followed by ICSI of oocytes recovered from the wives hyperstimulated by GnRH agonist in combination with hMG and FSH. Cleaving embryos were transfered to the uterine cavity or follopian tube(ZIFT) 18 or 24 hours after ICSI procedure. In 45 cycles of MESA, 492 oocyte complexes were recovered. ICSI was carried out on 355 metaphase II oocytes and 226 oocytes (63.7%) showed normal two pronucleus fertilization. After 198 embryos were transferred in 43 cycles, an average of 5 per cycle, 20 patients presented a positive HCG and intrauterine pregnancy was confirmed by US. So, the clinical ongoing pregnancy rate per transfer was 46.5%. Until now, 8 patients have given birth to 9 babies, 5 male and 4 female, including 1 twin. The babies were all healthy except 1 twin female baby. There was 1 miscarriage at 7 weeks and chromosomal study of abortus revealed as 45X, monosomy. These results suggested that it was possible to achieve high normal fertilization and pregnancy rate by ICSI using epididymal sperm.
Objective: ICSI with testicular sperm could achieve optimal fertilization and pregnancy. This study was performed to observe the influence on fertilization and pregnancy of motility of fresh testicular sperm and sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubules in obstructive azoospermia. Materials and Methods: We analysed clinical outcome of ICSI using fresh testicular sperm and sperm extracted from thawed seminiferous tubules. The presence of motility were compared to determine the factor for optimal fertilization and pregnancy rates. Results: In 316 cases of TESE-ICSI in obstructive azoospermia, ICSI with fresh testicular sperm (fresh sperm group) were 163 cases and ICSI with sperm testicular sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubule (thawed sperm group) were 153 cases. The fertilization rates were 71.3% and pregnancy rates were 32.5% in fresh sperm group, in thawed sperm group, 65.1% and 33.3% respectively. The fertilization and pregnancy rates of motile and non-motile testicular sperm were 72.9% and 33.6%, 50.0% and 18.2%, respectively (p<0.05). The fertilization and pregnancy rates of motile and non-motile sperm extracted from the thawed seminiferous tubule were 67.8% and 34.7%, 55.1% and 28.1%, respectively (p<0.05). The comparative of the results of ICSI using motile fresh testicular sperm and motile sperm extracted from thawed seminiferous tubule, fertilization and pregnancy rates were not significantly different (72.9% and 33.6%, 67.8% and 34.7%, respectively). Conclusion: These results suggest that successful pregnancy in TESE-ICSI treatment is influenced by the motility of fresh testicular sperm and sperm extracted from thawed seminiferous tubule in obstructive azoospennic patients.
Park, Chan Woo;Cha, Sun Wha;Kim, Hae Suk;Kim, Hye Ok;Yang, Kwang Moon;Kim, Jin Young;Song, In Ok;Yoo, Keun Jae;Kang, Inn Soo;Koong, Mi Kyoung
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.32
no.3
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pp.261-268
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2005
Objective: To compare the clinical results and pregnancy outcomes of in vitro fertilization (IVF) between GnRH antagonist cycles and GnRH agonist (GnRH-a) cycles including flare-up and long protocol in women with advanced age. Materials and Methods: Retrospective clinical study. From January 2001 to September 2003, IVF cycles of female patient 37 years over were included in this study. GnRH-a long protocol (62 cycles, 61 patients) and GnRH antagonist multi-dose flexible protocol (66 cycles, 51 patients) were compared with the control group of GnRH-a flare-up protocol (151 cycles, 138 patients). IVF cycles for non-obstructive azoospermia (NOA), endometriosis III, IV and polycystic ovarian syndrome (PCOS) were excluded in this study. Clinical results such as total gonadotropin dose, serum E2 on hCG administration, the number of retrieved oocytes and the pregnancy outcomes - clinical pregnancy rate (CPR), implantation rate (IR) and live birth rate (LBR) per embryo transfer - were compared. Results: There were significant differences in the total dose of gonadotropin (GnRH-a flare-up vs. GnRH-a long vs. GnRH-antagonist; 41.8 vs. 54.7 vs. 24.8), serum E2 on hCG administration (1787.2 vs. 1881.6 vs. 788.0), the numbers of retrieved oocytes (8.1 vs. 11.1 vs. 4.5) and endometrial thickness (9.1 vs. 10.4 vs. 8.0) which were significantly lower in GnRH-antagonist cycles. But pregnancy outcomes shows no significant differenced in CPR (25.0% vs. 35.8% vs. 24.5%), IR (11.7% vs. 12.3% vs. 10.1%) and LBR (15.8% vs. 28.3% vs. 15.1%) Conclusion: In women with advanced age, GnRH-antagonist cycles can result in comparable pregnancy outcomes to GnRH-a cycles including flare-up and long protocol. GnRH-a long protocol show higher CPR, IR and LBR than GnRH antagonist multi-dose flexible protocol and flare-up protocol without significant differences.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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