Kim, Se Jeong;Kim, Tae Hyung;Park, Jae Kyun;Eum, Jin Hee;Lee, Woo Sik;Lyu, Sang Woo
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제47권4호
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pp.306-311
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2020
Objective: The aim of this study was to determine whether co-administration of a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonist and human chorionic gonadotropin (hCG) for final oocyte maturation improved mature oocyte cryopreservation outcomes in young women with decreased ovarian reserve (DOR) compared with hCG alone. Methods: Between January 2016 and August 2019, controlled ovarian stimulation (COS) cycles in women (aged ≤35 years, anti-Müllerian hormone [AMH] <1.2 ng/mL) who underwent elective oocyte cryopreservation for fertility preservation were retrospectively analyzed. Results: A total of 76 COS cycles were triggered with a GnRH agonist and hCG (the dual group) or hCG alone (the hCG group). The mean age and serum AMH levels were comparable between the two groups. The duration of stimulation, total dose of follicle-stimulating hormone used, and total number of oocytes retrieved were similar. However, the number of mature oocytes retrieved and the oocyte maturation rate were significantly higher in the dual group than in the hCG group (p=0.010 and p<0.001). After controlling for confounders, the dual-trigger method remained a significant factor related to the number of mature oocytes retrieved (p=0.016). Conclusion: We showed improved mature oocyte collection and maturation rate with the dual triggering of oocyte maturation in young women with DOR. A dual trigger appears to be more beneficial than hCG alone in terms of mature oocyte cryopreservation for young women with DOR.
The oocyte and its surrounding granulosa cells co-exist in a closed compartment called a follicle, although they receive many signals from other parts of the body. It is well established that the intercellular communications between the oocyte and granulosa cells are required for normal oocyte development and ovulation during folliculogenesis. Gap junctions are intercellular channels allowing the direct transmission of ions and small molecules between coupled cells. Several lines of studies have shown that multiple connexins (Cx, subunits of gap junction) are expressed in mammalian ovarian follicles. Among them, two major connexins Cx37 and Cx43 are expressed in different manner. While the gap junction channels formed by Cx37 are localized between the oocyte and encompassing granulosa cells, the intercellular channels by Cx43 are located between granulosa cells. In this review, I will summarize the general properties of gap junction channels and discuss their possible formation (or compatibility) of intercellular channels formed by the oocyte and granulosa cells.
Ultastructural studies of oocyte degeneration and follicle cells in female Spisula sachalinensis are described for clams collected from Jumunjin, Gangwondo, Korea. The follicle cells playan integral role in vitellogenesis and oocyte degeneration by assimilating products originating from the degenerated oocytes (thus allowed the transfer of yolk precursors needed for vitellogenesis). The functions of the follicle cells include phagocytosis and intracellular digestion of products originating from oocyte degeneration. During the period of oocyte degeneration, follicle cells of this species probably have lysosomal systems for the breakdown and reabsorption of various phagosomes(phagolysosomes) in the cytoplasm for nutrient storage; this process has been observed in other bivalves.
Fertilization is a complex process comprised of numerous steps. During fertilization, two highly specialized and differentiated cells (sperm and egg) fuse and subsequently trigger the development of an embryo from a quiescent, arrested oocyte. Molecular interactions between the sperm and egg are necessary for regulating the developmental potential of an oocyte, and precise coordination and regulation of gene expression and protein function are critical for proper embryonic development. The nematode Caenorhabditis elegans has emerged as a valuable model system for identifying genes involved in fertilization and the oocyte-to-embryo transition as well as for understanding the molecular mechanisms that govern these processes. In this review, we will address current knowledge of the molecular underpinnings of gamete interactions during fertilization and the oocyte-to-embryo transition in C. elegans. We will also compare our knowledge of these processes in C. elegans to what is known about similar processes in mammalian, specifically mouse, model systems.
목적: Guinea pig heart의 ATP sensitive $K^{+}$ channel xenopus oocyte에 발현시켜 연구하고져 본 실험을 행하였다. 실험방법: 기니픽 심장으로부터 ,RNA를 분리하여 50ng/$\mu$l의 농도로 50nl를 xenopusdp 주입하였다. Xenpus oocyte에서 conventional electrode를 이용 막전휘를 측정하였고, pH selective 미세전극으로 세포내 pH를 측정하였다. 막전위에 미치는 potassium channel opener, blocker, KCN의 작용을 관찰하였다. 결과: 기니픽 심장 mRNA를 주입하거나 주입하지 않은 xenopus oocyte에서 $K^{+}$channel opener인 cromakalin, RP49356등은 과분극을 일으키지 못하였다. 그러나 세포내 ATP 감소제인 KCN은 농도 의존적으로 과분극을 일으켰으나 ,glibenclamide에 의해 차단되는 않았다. mRNA를 주입한 oocyte에서 Na-H 자극제인 NH$_4$Cl은 pH 변동을 일으켜 NA-H exchange를 expression 시켰다. 결론: Xenopus oocyte는 cromakalin등에 의해 open되는 $K^{+}$channel 은 없었고, 기니픽 심근의 ATP sensitive $K^{+}$channel로 expression 되지 않았으나 Na-H exchange 는 expression 됨을 알 수 있었다. KCN으로 open 되는 $K^{+}$channel이 있었으나 glibenclamide에는 차단되지 않는 channel이였다.
Vitrification method is widely used in oocyte cryopreservation for IVF but the birth rates are lower than that of the fresh oocyte. One of the known main reasons is structural instability of meiotic spindle and chromosome systems of mature oocyte. To get the best way for keeping competence of matured oocytes, we studied the best conditions for vitrification focused on equilibration times. The mature oocytes were underwent vitrification with current popular method and analyzed the survival rates, microtubule stability and DNA integrity. The survival rates of recovered oocyte are almost same between groups and are more than 93%. The structural configuration of meiotic spindle was well kept in 10 min equilibration group and the stability rate was almost same with that of control. The chromosomal breakdown was observed in all experimental groups, but the chromosomal stability was higher in 10 min equilibration group than the other groups. The 10 min equilibration group showed best condition compared with the other groups. Based on these results, the equilibration time is one of the key factors in successful keeping for competence of mature oocyte. Although, more fine analysis about the effects of physical stress on oocyte during vitrification is needed to define the optimal condition, it is suggested that the optimal equilibration time to get competent oocyte in mouse is 10 min. Information acquired this study may provide insight into intracellular structural events occurring in human oocytes after vitrification and application for cryopreservation of human oocyte.
Objective: To investigate the association of individual follicular fluid (FF) leptin and adiponectin levels with the quality of the corresponding oocyte and embryo. Methods: We prospectively enrolled 67 women who underwent controlled ovarian hyperstimulation with 89 FF samples. FF and the corresponding oocyte was obtained from a single dominant preovulatory follicle at the time of oocyte retrieval. Concentrations of leptin and adiponectin were measured by enzyme-linked immunosorbent assay in an individual follicle. The oocyte quality, fertilization rate, and corresponding embryo development were assessed. Results: The FF level of leptin was significantly associated with body mass index (r=0.334, p<0.01). The FF adiponectin level was significantly higher in the normal fertilization group than the abnormal fertilization group (p=0.009) in the non-obese women. A lower FF leptin level was associated with a trend toward mature oocytes, normal fertilization, and good embryo quality, although these relationships were not statistically significant. The leptin:adiponectin ratio of FF did not differ significantly according to oocyte and embryo quality. The quality of the oocyte and embryo was not associated with the FF leptin level tertile. However, the normal fertilization rate was positively associated with FF adiponectin level tertile. There was a trend towards improved oocytes and normal fertilization rates with the lowest tertile of the FF leptin:adiponectin ratio, but this difference was not statistically significant. Conclusion: Our results suggest that a high FF adiponectin concentration could be a predictor of normal fertilization. However, the FF leptin concentration and leptin:adiponectin ratio is not significantly related to oocyte maturity and corresponding embryo development.
Recently, we have shown that some endocrine disruptors, heavy metals, organotins and azoles suppressed steroidogenic enzymes such as P450 side-chain cleavage enzyme (P450scc) and aromatase in bullfrog ovarian follicles. In the present study, by using an amphibian ovarian follicle culture system, we examined the effects of these endocrine disruptors on maturation and ovulation of oocytes from Rana dybowskii in vitro. Ovarian fragments or isolated follicles were cultured for 24 h in a medium containing frog pituitary homogenate (FPH) or progesterone ($P_{4}$) with or without endocrine disruptors, and oocyte maturation (germinal vesicle breakdown, GVBD) and ovulation were examined. Among the organotins, tributyltin (TBT) strongly inhibited both FPH-and $P_{4}-induced$ oocyte maturation ($ED_{50}$:0.6 and 0.7 ${\mu}M$, respectively); however, tetrabutyltin (TTBT) and dibutyltin (DBT) showed only partial suppression, while monobutyltin (MBT) showed no inhibitory effect. All of the organotins suppressed $P_{4}-induced$ oocyte ovulation very effectively at a low concentration, and TBT and DBT exerted an inhibitory effect on FPH-induced ovulation. Among the heavy metals, mercury (Hg), cadmium (Cd) and cobalt (Co) were very effective in inhibiting FPH-induced oocyte maturation and ovulation, while lead (Pb), arsenite (As) and zinc (Zn) were less effective. However, all of the heavy metals suppressed FPH-induced oocyte ovulation at a high dose ($100{\mu}M$). Among the azoles, itraconazole (ICZ), ketoconazole (KCZ) and clotrimazole (CTZ) effectively inhibited FPH-induced oocyte maturation and ovulation, while econazole (ECZ), miconazole (MCZ) and fluconazole (FCZ) were considerably less effective. These results demonstrated that the abovementioned endocrine disruptors exhibited differential effects on oocyte maturation and ovulation in amphibian follicles and that the frog ovarian culture system could be used as an effective experimental tool to screen and evaluate the toxicity of various endocrine disruptors in vitro.
The oocyte undergoes various events during maturation and requires many substances for the maturation process. Various intracellular organelles are also involved in maturation of the oocyte. During the process glucose is essential for nuclear and cytoplasmic maturation, and adenosine triphosphate is needed for reorganization of the organelles and cytoskeleton. If mitochondrial function is lost, several developmental defects in meiotic chromosome segregation and maturation cause fertilization failure. The endoplasmic reticulum, a store for $Ca^{2+}$, releases $Ca^{2+}$ into the cytoplasm in response to various cellular signaling molecules. This event stimulates secretion of hormones, growth factors and antioxidants in oocyte during maturation. Also, oocyte nuclear maturation is stimulated by growth factors such as epidermal growth factor. This review summarizes roles of organelles with focus on the Golgi apparatus during maturation in oocyte.
Purine metabolism is known factor for nuclear maturation of oocytes through both follicle cells and oocyte itself. However, it is largely unknown the roles of purine metabolism in the oocyte competence for fertilization and early development. In this study, the effects of adenosine in oocyte competence for development were examined using adenosine and its synthetic inhibitors. Adenosine treatment from GV intact stage for 18 hr (fGV) caused of decrease the fertilization rate but of increase the cleavage rate compared from the other stage treatment groups. Hadacidin did not effect on fertilization rate but increased cleavage rate without stage specificity. Adenosine did not block the effects of hadacidin with the exception of fGV group. Inhibition of purine synthetic pathways the fertilization rate was decreased in the fGV and fGVB groups but increased in the fMII group. Exogenous adenosine caused of decrease fertilization rate in the fGVB group but increase in the fMII group. Cleavage rate was dramatically increased in the adenosine treatment with synthetic inhibitors. It means that the metabolism of purine has stage specific effects on fertilization and cleavage. Exogenous adenosine had only can improve oocyte developmental competence when it treated at GV intact stage. On the other hand, endogenous synthesis in all maturation stage cause of increase the cleavage rate without effects on fertilization. These data suggest that adenosine at GV stage as a paracrine fashion and inhibitions of endogenous adenosine in all stage improve oocyte developmental competence.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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