Somatic cell nuclear transfer (SCNT) is a useful tool for reproducing genetically identical animals or producing transgenic animals. Many reports have demonstrated that the efficiency of animal cloning by SCNT requires reprogramming of the somatic nucleus to a totipotent like-state. The SCNT-related reprogramming might mimic the natural reprogramming process that occurs during normal mammalian development. However, recent evidence indicates that the reprogramming event by SCNT is incomplete. In this study, the traditional SCNT procedure (TNT) was modified by injecting donor nuclei into recipient cytoplasm prior to the enucleation process to expose the donor nucleus before removing the karyoplast containing the chromosomes of the oocytes which might possess additional reprogramming factors, and this modified technique was named as reversing the usual order of SCNT (RONT). Other procedures including activation and in vitro culture were the same as TNT. Contrary to expectations, the rate of blastocyst development was not different significantly between RONT and TNT (8.6% and 7.9%, respectively). However, duration of micromanipulation performed by the same technician and equipments was remarkably reduced because the ruptured oocytes after nuclear injection were excluded from the enucleation process. This study suggests that RONT, a simplified SCNT protocol, shortens the duration of SCNT procedure and this less time-costing protocol may enable the researchers to perform murine SCNT easier.
Objectives : The present study investigated the anti-nociceptive and anti-inflammatory properties of the water extract of Geranii Herba (The stem and leaves of Geranium thunbergii Sieb. et Zucc.) in the animal models of pain and inflammation. Methods : We evaluated the anti-nociceptive and anti-inflammatory activities of Geranii Herba extract (GHE) using the writhing test, tail-flick test, carrageenan-induced paw edema and xylene-induced ear edema models. Two dose of GHE (100 and 1000 mg/kg) was administrated orally to the mice. Control group received normal saline and ibuprofen (50 mg/kg) was used as a positive control drug. Results : GHE 1000 mg/kg treated group showed an increased tail-flick response time in the tail-flick test and inhibitory effect on writhing syndrome induced by acetic acid. Treatment with GHE at the same dose inhibited ear edema induced by xylene and foot edema induced by carrageenan toxicity. Conclusion : The results demonstrate that GHE has anti-nociceptive and anti-inflammatory effects in the various models of nociception and inflammation.
The aims of this study are conducted to investigate the effect of Duck's egg oil no new functional characteristics in the diabetics induced by streptozotocin(STZ) and inhibition of antitumor activity toward Sarcoma-180 bearing mice. Serum glucose content by administration of Duck's egg oil in diabetic group induced by STZ were maintained with normal state than that of control. Phospholipid and triglyceride contents were significant decrease in group of administration with Duck's egg oil than that of control group. Total cholesterol, LDL + VLDL cholesterol and atherosclerotic index were decreased in the group of treatment of Duck's egg oil when does level compared with that of control group. On the other hand, the growth inhibition of the Sarcoma-180 showed the highest level of 63.89% when 150㎎/㎏ Duck's egg oil administrated. The life prolongation effect showed 19.7% at dose of 150㎎/㎏.
A novel antitumor agent, antibody-endostatin fusion protein $(anti-HER2/neu\;IgG3C_H3-Endostatin,\;AEFP)$ formed by genetic engineering procedure from antibody (Ab) which specifically targets to tumor cells ad angiogenesis inhibitor, endostatin (Endo) that has excellent antitumor effect, minimizes the toxicity of normal cells and selectively kills only tumor cells. The purpose of this study is to evaluate the phamacokinetic parameters and to analyze the localization of AEFP. After an intravenous injection of $150\;{\mu}l\;(5\;{\mu}Ci)\;[^{125}I]Ab,\;[^{125}I]AEFP$ to mice, blood was collected though retroorbital plexus from 15 min to 2880 min. Following the jugular vein injetion of $150\;{\mu}l\;(10\;{\mu}Ci)\;[^{125}I]Endo$, blood was collected by the use of carotid artery cannulation from 0.25 min to 30 min. Consequently, Endo was very rapidly removed from plasma compartment within 30 min. On the other hand, AEFP similar to Ab was slowly cleared from plasma. Also, Endo was metabolized about 40% within 30 min. However, AEFP was shown to metabolize less than 10% within 2880 min. The organ distribution of Endo was in order kidney, lung, spleen. Both Ab and AEFP were localized in order spleen, kidney, liver. Futhermore the tumor/blood distribution ratio of AEFP at 96 hours after injection is about 20 times higher than it of Endo at one hour after injection. In conclusion, these studies demonstrate that the anti-cancer or suppression of angiogenesis effect of Endo may be improved by the use of AEFP because the longer half life and stability of AEFP is able to selectively target antigens expressed on tumors.
Kim, Suel-Kee;Lee, Ho-Joon;An, Su-Yeon;Lee, Chang Joo;Yoon, Yong-Dal
Korean Journal of Environmental Biology
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v.22
no.4
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pp.550-558
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2004
The effects of postnatal exposure to octylphenol(OP) on the expressions of the steroidogenic enzymes and testosterone production were evaluated. Postnatal male mice (15-day-old) were injected with 2 or 20mg $kg^{-l}$ body weight (BW) of OP for 5 days and sacrificed on postnatal day 21. Testosterone concentration was measured by radioimmunoassay and the expressions of the testicular genes were determined by RT-PCR analyses. Significant reductions in the mean body and testis weight were observed in the OP treated animals. No marked alteration in the histological structure of the testis were observed, however, slight reduction in the seminiferous tubule diameter and the number of Leydig cells and several pyknotic cells could be identified in the 20 mg $kg^{-l}$ BW of the OP treated animals. Serum testosterone concentration was dramatically reduced and the mRNA expressions of the steroidogenic acute regulatory protein (StAR), cholesterol side-chain cleavage enzyme (P450scc) and $17\beta$-hydroxylase/Cl7-20 lyase $(P450_{17\alpha})$ were decreased. No significant changes of the gene expressions of the steroidogenic factor-l (SF-I) and estrogen and androgen receptor after the OP treatment showed that the decreased expressions of the steroidogenic enzymes in the present study did not correlate with these genes. Altogether, the present study demonstrates that postnatal treatment of OP inhibits steroidogenesis by decreasing the transcriptional expressions of the StAR and steroidogenic enzymes. The alteration in steroidogenesis may adversely affect the normal development of the testis and sper- matogenesis.
Objectives : We examined the effect of Jengjengamiyjin-tang, a traditional herbal formula, on the experimental pancreatitis induced by Dibutyltin Dichloride(DBTC). Methods : 15 mice were divided into 3 groups; the normal group and the control group which were administered water only after pancreatitis elicitation and the test group which were administered Jengjengamiyjin-tang for 7 days after pancreatitis elicitation. Results : In the activities of amylase, lipase and alkaline phosphatase in serum, the test group showed significant decrease compared with the control group after 21 days. In the common morphology and histochemical study, various injuries by hemorrhagic erosion were observed in the control group, while they were significantly decreased in the test group. In the immunohistochemical study, the manifestation of COX-1, 2, HSP27, HSP70, MAC387, Ki-67 decreased significantly in the 14th day in the test group, however, they increased in the 21st day more than the control group(p<0.05). Conclusion : According to the above results, it is supposed that Jengjengamiyjin-tang has anti-inflammatory effect on the experimentally induced pancreatitis and may be applicable to pancreatitis especially in the acute stage.
The usefulness of hypertermia for cancer therapy have well been established. The purpose of the present investigation was to ascess the effect of step-up $(42^{\circ}{\rightarrow}44^{\circ}C$ sequence) and step-down $(44^{\circ}{\rightarrow}42^{\circ}C$ sequence) heating on the skin of the hind foot of the mouse. Hyperthermic treatments were given by immersion the hind foot of the mouse in circulating water baths. Skin response was studied by the leg reaction, which was scored according to a numerical scoring system proposed by Urano et al (1980). The results were as follows 1. The skin damage of $44^{\circ}C$ control group was more severe than $42^{\circ}C$ control group (P<0.05), except for 15 min. heating group. 2. The Skin damage of step-down group was more severe than step-up group (P<0.05). 3. The skin damage of $44^{\circ}C$ control group was more severe than step-up group when there is no difference in $44^{\circ}C$ heating time of step-up group from $44^{\circ}C$ control group (P<0.05). 4. In step-down group, the skin damage was more severe than $44^{\circ}C$ control group after preheating 45 min at $44^{\circ}C$ (P<0.05). Therefore, the above findings suggest the normal tissue damage by step-up heating was correlated with heating time of post step-up. The dropping of heating temperature in late phase had more severe damage of the skin than that in early phase during hyperthermia, and so contineous control of satisfactory temperature should be considered as the one of the most important factor for prognosis, complications of clinical hyperthermia
The objective of this study was to elucidate the dynamics of microtubules in post-ovulatory aging in vivo and in vitro of mouse oocytes. The fresh ovulated oocytes were obtained from oviducts of superovulated female ICR mice at 16 hours after hCG injection. The post-ovulatory aged oocytes were collected at 24 and 48 hours after hCG injection from in vivo and in vitro, respectively. Immunocytochemistry was performed on ${\beta}$-tubulin and acetylated ${\alpha}$-tubulin. The microtubules were localized in the spindle assembly, which was barrel-shaped or slightly pointed at its poles and located peripherally in the fresh ovulated oocytes. The frequency of misaligned metaphase chromosomes were significantly increased in post-ovulatory aged oocytes after 48 hours of hCG injection. The spindle length and width of post-ovulatory aged oocytes were significantly different from those of fresh ovulated oocytes, respectively. The staining intensity of acetylated ${\alpha}$-tubulin showed stronger in post-ovulatory aged oocytes than that in the fresh ovulated oocytes. In the aged oocytes, the spindles had moved towards the center of the oocytes from their original peripheral position and elongated, compared with the fresh ovulated oocytes. Microtubule organizing centers were formed and observed in the cytoplasm of the aged oocytes. On the contrary, it was not observed in the fresh ovulated oocytes. The alteration of spindle formation and chromosomes alignment substantiates the poor development and the increase of disorders from the post-ovulatory aged oocytes. It might be important to fertilize on time in ovulated oocytes for the developmental competence of embryos with normal karyotypes.
With a view to searching after a new antihypertensive or hypotensive agents in the botanical crude plants, authors intended to reevaluate several natural products caltivated in Korea. This experiment was undertaken to compare pharmacogical actions of Machilus thunbergii Siebold et Zuccarini with those of Magnolia obovata Thunberg in anesthetized rats and in normal mice. Machilus thunbergii Sieb. et Zucc., a tree belonging to the Lauraceae family, is caltivated at Ull-ung Do, and their cortecies have been used as folk medicine mingled with those of Magnolia obovata Thunberg. These two cortecies have teen also applied in chinese medicine, it was advocated that these cortecies exerted good therapeutic effects on gastritis, convulsive abdominal pain, nausea, vomiting and urinary tract disorders. Therefore, we intended to determine the pharmacological action of two palnt of different family each other, especially their effects on blood pressure and heart rate, and also their mechanism of action were observed. We studied their action with extracts of hexane(MTHE), ether(MTEE), methanol(MTME) and water(MTWE) from Machilus thunhergii Sieb. et Zucc., and also fractionations of methanol(MOME), chloroform(MOCE) and water(MOWE) from Mapolia obovata Thunberg. The results of this experiment were as follows; 1) MTME, when intravenously administered to rats, elicited the significant hypotensive responses dependent on the administered dosage. 2) MOWE was also exhibited the hypotensive effect dependent on the treated dose. 3) Depressor effect of MTME was blocked by pretreatment with hexamethonium. 4) The hypotensive response of MOWE was blocked by pretreatment with hexamethonium or hrdralazine. 5) HTME and MOWE were also observed the anticonvulsive effect and sedative effect. These results suggested that MTME may induce the hypotensive response via central sympathetic effect, but the site of action in brain are not clarified, and the hypotensive effect of MOWE may be due to dual mechanism of central sympathetic action and direct vasodilation of blood vessel.
Choi, Hyeong Jwa;Lim, Yoo Jung;Lee, Eun Hee;Park, Jin Yeon;Prabagar, Miglena G.;Park, Hyung Soon;Kang, Young Sun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.41
no.2
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pp.242-248
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2013
Endotoxins are part of the outer membrane of the cell wall of gram-negative bacteria and are continuously released during bacterial growth. Endotoxins typically induce severe sepsis and septic shock, which cause more than 50% of mortalities. Endotoxins are easily measured in the serum by the limulus amebocyte lysate (LAL) test. However, a nonspecific result is obtained, because the high concentration of serum proteins disturbs the enzyme reaction of the LAL test. In order to solve this problem, the LAL test was performed in this study after the centrifugation of the boiled serum samples to remove the impurities. As a result, among the various conditions examined, endotoxin measurement with the LAL test was the most accurate and repeatable after centrifugation of the boiled serum at $100^{\circ}C$. Moreover, the endotoxin was accurately and repeatedly measured from the prepared sera of mice that had been administered an intraperitoneal injection of purified lipopolysaccharides (LPS) or E. coli. Therefore, the application of centrifugation to remove impurities from boiled serum gives an accurate measurement of endotoxins in the sera of normal subjects or patients, and this will lead to the improved diagnosis and prevention of diseases caused by endotoxins. In addition, the centrifugation of boiled serum samples should be considered and included in the development of endotoxin test kits.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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