It has been reported that hepatic microsomal cytochrome P450(CYP) 2E1 is responsible for the metabolism of chlorzoxazone(CZX) to 6-hydroxychlorzoxazone. The present study was undertaken to assess the possible interaction of rutaecarpine, an alkaloid originally isolated from the unripe fruit of Evodia rutaecarpa, with CZX. Male Spraque-Dawley rats were administered with 80 mg/kg/day of oral rutaecarpine for three consecutive days. Twenty four hr after the pre-treatment with rutaecarpine, the rats were treated with 20 mg/kg of intravenous CZX. Rat hepatic microsomes isolated from rutaecarpine-treated rats showed greater(50% increase) activity of p-nitrophenol hydroxylase(a marker of CYP2E1) when compared with the control rats. Compared with control rats, the AUC of CZX was significantly smaller(84% decrease) possibly due to significantly faster CL(646% increase) in rats pretreated with rutaecarpine. This could be, at least partially, due to induction of CYP2E1 by rutaecarpine.
The role of cytochrome P-450 2E1 (P450 2E1) in the early phase of alcoholic fatty liver was examined. Female rats were pretreated with either allyl sulfide (200 mg/kg, po), disulfiram (500 mg/kg, po), YH 439 (250 mg/kg, po) or pyrazine (200 mg/kg/day$\times$2 days, ip). Marked changes in carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity and caboxyhemoglobin (COHb) elevation due to dichloromethane administration were observed in rats treated with one of the P450 2E1 modulators. A single dose of ethanol (6 g/kg, po) increased the hepatic triglyceride contents approximately 2 fold, which was inhibited completely by YH 439 pretreatment. However, the other P450 2E1 modulators failed to alter the ethanol-induced hepatic triglyceride accumulation. In vitro hepatic microsomal enzyme activity was determined in 4 week old premature and 12 week old adult rats. Aminopyrine-N demethylation was not different, but p-nitrophenol hydroxylation and p-nitroanisole O-demethylation were significantly higher in premature rats. However, no difference in the triglyceride accumulation induced by an intraperitoneal dose of ethanol (3 g/kg) was noted between premature and adult rats. The results suggest that the P450 2E1 activity dose not play an important role in the induction of acute alcoholic fatty liver.
A new sensing system based on the immobilization of luminescent batcteria, Photobacterium phosphoreum, was proposed for continuous real-time monitoring of polluants. The response curves demonstrate that Photobacterium phosphoreum immobilized on the strontium alginate was very sensitive to seven reference chemicals used. The significant inhibitory concentrations for bioluminescence emission were 5 ppm for Pb(NO3)2, NiCl2, CdCl2, 50 ppm for NaAsO2, 0.1ppm for HgCl2, 0.5ppm for pentachlorophenol and less than 5ppm for SDS, respectively. The alginate mixed-cells (AMC) retained their luminescence during experimental period (29 days) under storage condition of -8$0^{\circ}C$. The variables affecting performance of continuous flow through monitoring (CFTM) were optimized in order to ensure stability and efficiency. The flow through cell with strontium-alginate immobilized luminescent bacteria was tested with salicylate and 4-nitrophenol and a rapid response of luminescence was recorded by time drive mode in bioluminescence spectrometer after exposure to both toxicants.
This paper investigates the production and optimization of $\beta$-galactosidase enzyme using synthetic medium by Kluyveromyces lactis NRRL Y-8279 in stirred tank bioreactor. Response surface methodology was used to investigate the effects of fermentation parameters on $\beta$-galactosidase enzyme production. Maximum specific enzyme activity of 4,622.7 U/g was obtained at the optimum levels of process variables (aeration rate 2.21 vvm, agitation speed 173.4 rpm, initial sugar concentration 33.8 g/L, incubation time 24.0 hr). The optimum temperature and pH of the $\beta$-galactosidase enzyme produced under optimized conditions were $37^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. The enzyme was stable over a pH range of 6.0-7.5 and a temperature range of $25-37^{\circ}C$. The $K_m$ and $V_{max}$ values for O-nitrophenol-$\beta$-D-galactopyranoside (ONPG) were 1.20 mM and $1,000\;{\mu}mol/min{\cdot}mg$ protein, respectively. The response surface methodology was found to be useful in optimizing and determining the interactions among process variables in $\beta$-galactosidase enzyme production. Hence, this study fulfills the lack of using mathematical and statistical techniques in optimizing the $\beta$-galactosidase enzyme production in stirred tank bioreactor.
The monoclonal antibody to chloramphenicol(CAP) was produced to develop an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for residual CAP. An immunogen(CAP-BSA) was prepared by immunogen, antibody titer was measured by indirect ELISA. Spleen cells form the immunized mouse were fused with SP2/OAg14 myeloma cells. Among hybridomas selected in HAT media, 6 clones shown high antibody titer to CAP were subjected to cloning by limit dilution, and all of the monoclonal antibodies(MCA1, 2, 3, 4, 5, 7 and 9) produced by each clone were identified as IgG1 by ELISA isotyping analysis. Competitive ELISA condition was established by using the purified monoclonal antibody MCA1 as primary antibody and CAP-HSA conjugate as coating antigen. Standard curve of CAP(n=28) showed that the lowest detection limit of CAP is 20ng/ml level. The cross-reactivities of the 6 monoclonal antibodies showed that CAP sodium succinate. CAP base, P-nitrophenol, and p-nitrobenzyl alcohol were 89∼178, 0.050∼2.237, 0.056∼0.794 and 0.013∼7.939%, respectively. No cross-reactivities were observed with phenylalanine, tyrosine, glutamine, thiamphenicol, neomycin, streptomycin, gentamicin, sulfamethazine, sulfathiazole, chlortetracycline and p-aminobenzoic acid.
Han Sang-Hun;Shon Yun-Hee;Nam Kyung-Soo;Lim Jong-Kook
Korean Journal of Acupuncture
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v.19
no.2
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pp.57-61
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2002
The activities of phase I enzymes in the liver of mice were examined following the intragastric application of Cnidium officinale Makino aqua-acupunture solution (COMAS). Treatment of mice with COMAS resulted in decreases of cytochrome P450 1A1-dependent ethoxyresorufin-O-deethylation and cytochrome P450 2E1-dependent p-nitrophenol and aniline hydroxylation activities. These findings suggest that COMAS has chemopreventive potential by inhibiting cytochrome P450 1A1 and cytochrome P450 2E1 activities in mice.
Crushed peach stone shells were impregnated with $H_3PO_4$ of increasing concentrations (30-70%) followed by heat treatment at 773 K for 3 h. Produced carbons (ACs) were characterized by $N_2$ adsorption at 77 K using the BET-equation and the ${\alpha}$-method. High surface area microporous ACs were obtained, with enhanced internal pore volume, as function of % $H_3PO_4$. Adsorption isotherms from aqueous solution were determined for methylene blue (MB) and p-nitrophenol (PNP), as representatives for dye and phenolics pollutant molecules. Application of the Langmuir model proved the high limiting capacity towards both solute molecules, MB was uptaken in increasing amounts as function of $H_3PO_4$ concentration and generated porosity. High removal of PNP was almost the same irrespective of porosity characteristics. Competitive adsorption of $H_2O$ molecules on the hydrophilic carbon surface seems to partially reduce the available area to the PNP molecules. Application of the pseudo-second order law described well the fast adsorption (${\leq}$ 120 min) at two initial dye concentrations.
Licorice has been widely used in combination with other herbs or synthetic drugs for various disorders. In an effort to study the effect of licorice roots (Glycyrrhizae Radix, GR) and glycyrrhizin on the hepatic glucuronidation, we have previously found that the pretreatment of GR or glycyrrhizin for 6 days resulted in a marked increase in the enzymatic activity of 3-methylcholanthrene (3-MC)-inducible hepatic UDP-glucuronosyltransferase (UGT) isozyme that has high affinity toward phenolic substrates (p-nitrophenol form, UGTIA) in Sprague-Dawley rats. As an approach to elucidate the mechanism for the enzyme activation by licorice in rat liver, we examined the levels of hepatocellular mRNAs for UGTIA upon the treatment of GR or glycyrrhizin. The hepatic mRNAs were extracted from Sprague-Dawley rats and Wistar rats after the treatment of the methanol extract of GR (1 g/kg, p.o.), glycyrrhizin (23 mg/kg, p.o.) for 6 days, or 3-MC (40 mg/kg, i.p.) for 3 days. Using the UGT1A1 CDNA as a probe, we found that the mRNAs for the enzyme were induced by 3-MC treatment while those were influenced neither by GR nor by glycyrrhizin in both strains of rats. These results indicate that the activation of rat liver UGTI A by licorice and glycyrrhizin was not due to the induction of mRNAs for the enzyme.
Proceedings of the Korean Environmental Health Society Conference
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2004.06a
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pp.160-164
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2004
This study was carried out to investigate the removal of TNT (2,4,6-trinitrotoluene) and parathion in the batch and the continuous constructed wetland microcosms consisting of marsh and pond. The batch system study showed that TNT was almost reduced in the marsh and pond system within 20 days and parathion was within 8 days. The major reductive metabolites of TNT includes 2,4-diamino-6-nitrotoluene (24DANT) >2,6-diamino-4-nitrotoluene (26DANT) >4-diamino-2,6-nitrotoluene(4ADNT) > 2-diamino-4,6-nitrotoluene (2ADNT), and the concentrations of these metabolites were decreased during further operation. The generation rates of 4-nitrophenol, the major metabolite of parathion, were 82% and 15% in the bottom of marsh and pond system, respectively. In the continuous system study, although TNT/parathion degradation pattern was similar to the batch's, marsh-pond system showed the most stable TNT/ parathion removal among various continuous reactor combinations.
Reaction of thianthrene cation radical perchlorate (1) with cumene (4), p-chlorocumene (2), and p-nitrocumene (3) hydroperoxides in acetonitrile at room temperature afforded, inter alia, thianthrene as a common product and 5-(4'-hydroxyphenyl) thianthrenium perchlorate (5) for 4, 5-(5'-chloro-2'-hydroxyphenyl) thianthrenium perchlorate (7) and 5-acetonylthianthrenium perchlorate (6) for 2 and 6 for 3, respectively. Stoichiometry of these reactions showed that 2 moles of 1 gave rise to 1mole of thianthrene and 1 mole of thianthrenium salt (or salts). Nucleophilic reactivity to 1 was found to be in the order of phenol > > p-chlorophenol ${\sim}$ acetone > > p-nitrophenol. Apart from acid-catalyzed heterolytic decomposition of hydroperoxides, small amount of homolytic decomposition products were found from 3 and 4.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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