To overproduce endoxylanase from a recombinant Bacillus subtilis harboring the pJHKJ4 plasmid, the effects of carbon and nitrogen sources on the cell growth and expression level of endoxylanase were investigated in the flask cultures. Among the various carbon and nitrogen sources tested, glucose and maltose as carbon source and yeast extract as nitrogen source were found to be the most effective for the cell growth and the endoxylanase expression. When the concentration of glucose was increased from 0.5% to 5%, the highest activity of extracellular endoxylanse, 166 unit/$m\ell$, was observed at 2% glucose. In case of maltose, the endoxylanase was stably produced at the level of 180 unit/$m\ell$, regardless of the concentration of maltose. The higher the concentration of yeast extract, the greater cell growth and endoxylanase expression were obtained. However, the highest endoxylanase activity per unit cell mass was observed with 1% yeast extract. With the optimized medium (2% glucose, 1% yeast extract, etc), about 630 unit/$m\ell$ of endoxylanse was expressed through the batch fermentation in a fermentor, which expression level corresponded to about 0.7 g-endoxylanase protein /$\ell$. It was also found that the plasmid was stably maintained above 70% level, and more than 90% of endoxylanase activity was detected in the extracellular medium.
Saccharomyces cerevisiae strain M was cultured in a molasses-containing media with repeated transplantations of the yeasts from one culture to another to adapt to molasses. After that only different amounts of phosphorous and nitrogen sources were added to the media. And then some variations during the culture time and the effects of consituents of cell mass on the functional activity and sensitivity of the cell were investigated. The results obtained were summarized as follows : 1. In the same culture condition of yeasts, the carbohydrates and trehaloses contents were more remarkably increased when small amounts of phosphate and nitrogen sources were added, then when alrge amounts were added, but yield percentage on assimilated sugars was lower. 2. The content of trehalose in yeast cells was reduced remarkably at the early stage in the culture, but this increased remarkably at later stage. When small amounts of nitrogen and phosphate were added to the culture medium, the amount of thehalose in the cells increased greasly. 3. The more protein content was present in the yeast cells, the smaller the carbohydrate and trehalose content, but more amino-N, RNA and moisture content were present in the cells. And in this case fermentability of the cells was stronger, but sugar tolerance was lower. 4. During the preservation period of compressed yeast cells at different temperature, the higher the temperature was, the more rapidly the amount of trehalose in the cells decreased. And in the cell where the amount of trehalose in the cells decreased. And in the cell where the amount of trehalose(carbohydrate) was large and the amount of protein was small, the amount of trehalose decreased at a slower rate during the preservation period.
The fungal isolate Isaria javanica pf185 has potential as a mycopesticide because it demonstrates insecticidal activity against the green peach aphid and antifungal activity against Colletotrichum gloeosporioides. For commercialization of this isolate, determination of the optimal and least expensive culture conditions is required; however, these data are not currently available. This study describes the conditions for optimal development of conidia and production of metabolites for the biocontrol of the fungal pathogen. The optimal culture conditions were examined using cultures on solid agar and liquid media. High growth temperature enhanced spore formation but reduced antifungal activity in both solid and liquid media. The highest spore yield was obtained in a medium containing glucose as a carbon source and yeast extract as a nitrogen source. Soybean powder and wheat bran were effective nitrogen sources that promoted spore production and antifungal activity of the isolate. These results revealed the basic, cost-effective growth media for commercial production of a biopesticide with insecticidal and antifungal properties for use in integrated pest management.
The effects of carbon, nitrogen sources and culture conditions on glucoamylase production from Aspergillus sp. were investigated. Among tested carbon sources, soluble starch was most effective for the production of the enzyme, and the level of concentration for the optimal enzyme production was found to be 5%. For nitrogen sources, yeast extract was best for the enzyme production, with the level of 0.1%. The enzyme was maximally produced by cultivating the organism at medium of initial pH 6.0, and temperature of 28$^{\circ}C$. Wheat bran was most suitable for the enzyme production from the organism in solid state culture.
To increase the high production of 1-deoxynojirimycin (DNJ) from Streptomyces sp. SID9135, the effect of various carbon sources, nitrogen sources, cationic metal ions, the initial pH of the medium, and agitation speed were investigated. The most effective carbon and nitrogen sources were found to be lactose 2.5% (w/v) and soybean meal 2.0% (w/v), respectively. None of the cationic metal ions examined had any detectable stimulating effect on DNJ production except $Fe^{+2}$ ion. The initial optimum pH for DNJ production ranged from 6-8 and agitation speed was most effective at 400 rpm. In the jar fermentor experiments under optimal culture conditions, the accumulation of DNJ reached about $640{\mu}g$/ml after 5 days of cultivation and the level remained the same for a further two days.
Lactobacillus acidophilus A12 was isolated from chicken feces for use as an immunostimulating livestock probiotic. The purpose of this study was to optimize the production of L. acidophilus A12 using response surface methodology (RSM). Initially, the influence of growth medium was studied in terms of carbon sources (glucose, fructose, lactose, glycerol, sucrose, ethanol, and mannitol), nitrogen sources (beef extract, yeast extract, malt extract, and tryptone), and inorganic salts ($CaCl_2$, $MgSO_4$, $KH_2PO_4$, $(NH_4)_2SO_4$, $FeSO_4$, and NaCl). Through one factor-at-a time experiment, lactose, yeast extract, and $CaCl_2$ were determined to be the best sources of carbon, nitrogen, and inorganic salt, respectively. The optimum composition was found to be 17.7 g/L lactose, 18.6 g/L yeast extract, and 0.9 g/L $CaCl_2$. Under these conditions, a maximum cell density of 9.33 Log CFU/mL was produced, similar to the predicted value.
This study aims to prepare a technical protocol for identifying the source of nitrate in water using nitrogen (δ15N) and oxygen (δ18O) stable isotope ratios. The technical processes for nitrate sources identification are composed of site investigation, sample collection and analysis, isotope analysis, source identification using isotope characteristics, and source apportionment for multiple potential sources with the Bayesian isotope mixing model. Characteristics of various nitrate potential sources are reviewed, and their typical ranges of δ15N and δ18O are comparatively analyzed and summarized. This study also summarizes the current knowledge on the dual-isotope approach and how to correlate the field-relevant information such as land use and hydrochemical data to the nitrate source identification.
This study aimed to verify the nutritional and curative effects of protein hydrolysate in rats with cysteamine-induced duodenal uncer. Duodenal ulcer rat model was established by intraperitoneal injections of cysteamine. Sprague-Dawley, female rats weighing approximately 200g were intraperitoneally injected twice cysteamine(13mg/100g BW) at intervals of 3h per day. This procedure was repeated 3$\times$at intervals of 3d. Animals fed on 10% casein diet for infection periods. After last injection, 4 kinds of diets(10% casein, 20% casein, 10% casein hydrolysate, 20% casein hydrolysate) were given. Gastric montility, trypsin activity in gastrointestinal content, retention rate of nitrogen, plasma total protein, albumin, amino-N, urinary urea nitrogen, creatinine and hydroxyproline were analyzed for nutritional effects of dietary nitrogen levels(10%, 20%) and sources(casein, casein hydrolysate). In duodenal ulcer rat model, there was no differences between 20% casein diet and 20% casein hydrolysate in the view of severeness of ulcer, gastric emptying rate, serum total protein, serum albumin, plasma $\alpha$-amino-N, UUN, creatinine excretion, GFR, nitrogen retention. On the other hand, rats on 10% casein hydrolysate diet group had more curative effect of the ulcer, higher plasma albumin concentration and nitrogen retention than 10% casein diet group. The casein hydrolysate diet group was lower trypsin activity in small intestinal content than the casein diet group, at both nitrogen levels(10%, 20%). The results suggest that protein hydrolysate be applied in diet therapy for the patients with gastrointestinal ulcer.
To study the relationship between the concentrations of nitrogen in mountain streams, and anthropologic and natural factors, the water chemistry of the mountain streams in the entire Hyogo Prefecture, Japan, were investigated. A thousand mountain streams were investigated between 1998 and 2001. The concentrations of nitrate nitrogen ranged from 2.92 to 0.1 mg/L, with an arithmetic mean value of 0.45 mg/L. A number of streams showing more than 1.0 mg/L of nitrate nitrogen accounted for 8% of the mountain streams investigated. These results indicated that the concentrations of nitrate nitrogen in the mountain streams were low in the entire Hyogo Prefecture. In general, the mountain stream water in Hyogo Prefecture appears to not have been affected by wet and dry deposition originating from anthropologic sources in mountain streams and Japan. On the other hand, sites with more than 0.8 mg/L nitrate nitrogen were distributed over the entire Hyogo Prefecture, which were classified into five groups. Each group showed unique geographical, geological and anthropological characteristics. No common characteristic among five groups were discover. These results suggest that the cause of high concentrations of nitrogen in mountain streams is not from a uniform set of conditions.
The studies were carried out to examine the effects of supplementation of nutritional substances and physical conditions in substrate on the mycelial growth and yield of fresh sporophores of winter mushroom, Flammulina velutipes(Curt. ex Fr.) Sing. and to obtain further informations on the nutritional requirements of the fungus with reference to improvement of substrate through [analysis of chemical composition of the substrates during the cultivation period. The results obtained are summarized as follows: 1. The best yield of fresh sporophores, 84.4 g per 280 g substrate in a bottle, was obtained from the mixture of poplar sawdust 10 and rice bran 3 by volume when Flammulina velutipes was cultivated on the poplar sawdust supplemented by rice bran, wheat bran, cattle manure and various combinations of these materials as nutrient sources. The substrates of poplar sawdust 10 plus rice bran 3 and 2 or wheat bran 3 with a higher yield of fresh sporophores showed a comparatively higher content of total nitrogen. total sugar, and potassium. 2. The mycelial growth of the fungus was compared on the substrates of poplar sawdust supplemented by the several nutrient sources and poplar sawdust alone. The fastest linear growth occurred on substrates of poplar sawdust alone and poplar sawdust plus cattle manure deficient in sugar and nitrogen sources, but mycelial density was more sparse on the substrates. Also, growth in a solution extracted from these substrates was very meager. 3. In the substrates which varied with bulk density and moisture content optimum bulk density and moisture content for mycelial growth was 0.2g/cc and 72% on a dry weight basis, respectively, but the highest yield of fresh sporophores was obtained at the bulk density of 0.3g/cc and moisture content of 67%. 4. By increasing the ratio of rice bran in poplar sawdust the loss of total weight and ash, content at each stage was increased, and during the cultivation period of 75 days, loss of total weight of the substrates at inoculation was 17.8 to 28.8% and ash content increased about 12%. 5. 11 to 14% of the cellulose and 3 to 4% of the lignin content per original substrate were decreased without a great difference depending of the mixing ratio of rice bran. The soluble glucose concentration in the substrates was increased during the same period. 6. In the process of vegetative and reproductive growth of the fungus upon the substrates, the total nitrogen was increased in quantity per dry weight of sample but was reduced in absolute quantity to a minute extent. There is no great changes in content of organic nitrogen including amino acid nitrogen, and hydrolysable ammonium nitrogen during the vegetative growth period, but occurrence of sporophores resulted in a decrease in the nitrogen content of these forms. On the one hand, by an increase of additive amounts of rice bran, nitrogen contents of these forms were higher and the reduction range during the reproductive growth period became wider. 7. Mycelial growth of the fungus was accelerated in various liquid media supplemented with organic nitrogen sources such as peptone and yeast extract in comparison with addition of inorganic nitrogen sources. Furthermore, mycelial growth was mere vigorous in the media with higher content of organic nitrogen sources.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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