The effect of phytohormones, light and phosphate on in vitro production of ubiquinone 10 from the suspension cultures of Nicotiana tabacum cv. Xanthi callus was investigated. The inoculum size and cultured time in the suspension culture had to be at least over 2 % of medium volume at 15 days for the excellent growth of Xanthi callus. The growth of Xanthi callus in the suspension culture was improved by addition of NAA and 2,4-D, especially NAA 1.0mg/1 alone, at the light condition. The optimal concentration of phytohormone was 0.1 mg/l 2.4-D and 1.0 mg/l NAA for productivity of ubiquinone 10 in the suspenseion of Xanthi callus. Addition of 3mM KH$_2$PO$_4$ to the medium was more effective in promoting ubiquinone-l0 formation than other concentration in the light condition. Content and production of ubiquinone-l0 in the suspension cultures of Xanthi callus were the highest at the MS media containing 0.5mg/L kinetin, 0.5mg/L 2,4-D, 1.0mg/1 NAA, 3mM phosphate and 2 % inoculum in the light.
한국을 비롯한 5개국에서 잎담배로부터 8계통, 감자로부터 분리된 1계통 등 모두 9계통의 PVY에 대한 잎담배 품종별 내병성을 온실내에서 조사하였다. 조사된 품종중 Dixie Bright 244-2, McNair 30, 및 Golden Stock Penish 등의 품종은 7가지의 PVY 계통에 대해 높은 내병성 반응을 보였다. 이외 Chile 및 US-NN계통에 대해서도 감수성품종에 비해 내병성을 나타냈다. 품종별 병징의 심, 경에 따른 엽중 바이러스의 농도는 접종된 바이러스 계통과 품종에 다라 다르게 나타나 엽중 바이러스 농도에 따른 내병성 정도 구분은 할 수 없었다.
These studies were conducted to investigate effects of phytohormone and activated carbon on the growth and rooting of teratoma shoots induced from Nicotiana tabacum cv. NC2326 transformed by Aerobacterium tumefaciens C58. GA was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoots from teratoma shoot, however, leaves of teratoma shoot cultured on the medium with GA were pointed. ABA was also effective in promoting shoot elongation, but was not for reduction of multiple shoots. Teratoma shoot cultured on the medium with 1 n activated carbon promoted shoot elongation and inhibited the number of shoots differentiated, but was grown as abnormal shoot. Addition of 1% activated carbon and 0.5mg/l BA to culture media was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoot and for formation of round leaves as normal leaves. Though these shoots were inoculated on the rooting medium, they could not from roots but formed multiple shoots. Boric acid, myo-inositol and sucrose were also ineffective on the rooting of teratoma shoots.
본 연구에서는 hGM-CSF를 생산해 배지 내로 분바하도록 유전자 조작된 Nicotiana tabacum 세포를 수성이상계 내에서 배양하여 in situ recovery를 시도하였다. 특히 식물세포 자체의 생상에 큰 영향을 주지 않으면서도 일반 배지에서 회수한 단백질에 비해 많은 양을 생산할 수 있는 수성이상계 시스템을 선정하였다. 6% (w/w) PEG 20,000과 10% (w/w) dextran 2.000,000 을 이용하는 경우 최대 세포 농도가 18.6 g/L 로, 일반배지를 사용하는 경우 (15.7 g/L)에 비해 저해가 없음을 확인하였다. 또한 목적 단백질인 hGM-CSF의 생산에 있어서도 위의 시스템의 경우 dextran-rich phase인 아랫 상으로 분배됨으로 인해 회수가 쉬울 것으로 확인되었으며 그 생산량 또한 일반배지에서의 생산량 (1.5 ng/mL)에 비해 크게 다르지 않음을 확인할 수 있었다. 따라서 hGM-CSF의 회수를 위한 in situ recovery 시스템에 있어서 수성이상계의 이용 가능성을 확인하였다.
Transgenic Nicotiana tabacum cells were cultivated for the production of murine granulocyte macrophage-colony stimulating factor (mGM-CSF) in both a stirred tank bioreactor and an airlift bioreactor with draft tube. Cell growth and mGM-CSF production in the airlift bioreactor were found to be better than those achieved in the stirred tank bioreactor. In the airlift bioreactor, 9.0g/L of cells and 2.2ng/mL of mGM-CSF were obtained (11.0g/L and 2.4ng/mL, respectively in shake flasks). Although the lag period was prolonged and mGM-CSF production was lowered by 33% in the stirred thank bioreactor as compared to the control culture, the maximum cell density was increased up to 12.0g/L due to better mixing by agitation at the higher cell density.
피복재료별 및 품종간 피복종자의 발아율을 조사하기 위하여 연초의 NC 2326, Burley 21 및 소향 3품종을 공시하여 제오라이트, 사문석 및 연탄재분말을 피복재료로 이용, 제오라이트, 사교석, 연탄재사교석에 제오라이트 이중피복 및 연탄재에 제오라이트 이중피복의 5종류의 피복종자에 대하여 발아에 미치는 영향을 조사했던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 피복재료에 따라 발아가 달라서 대체적으로 나종자, 제오라이트, 사문석+제오라이트, 사문석, 연탄재+제오라이트, 연탄재피복 순으로 발아율이 높았다. 2. 품종간 피복종자의 발아는 Br 21이 피복에 따라 가장 발아억제가 심하였으며 특히 피복재료의 염농도에 따라 발아가 저해되는 것 같았다. 3. 제오라이트 피복종자에 대해서 온도별 품종간 발아율을 보면 Br.21이 저온에서 발아가 지연되었고 발아율도 낮았으며 훈탄상토에 집파했을 경우에도 동일한 결과를 보였다.
Field test were conducted to select the best method for soil phosphorus test and to obtain the critical levels of each method for P fertilizer recommendations based on tobacco production. Truog method was recognized to be the mort suitable one for soil P test. N. Carolina, Bray No.1 and Olsen methods were followed in order. Bray No. 2 and Lancaster methods showed the least satisfaction. The critical levels of available P by lancaster, Bray No. 1, N. Carolina,01sen, and Truog methods were 55ppm, 32ppm, 21ppm, 19ppm, and 22ppm, respectively. Below the critical level a large yield response can be expected with 10kg $P_2O_5$/10a, above critical level little or no response is expected. In soils the more the initial available p, the more available P was carried over, while the more the total amount of silt and clay, the less the residual P was found. The increase in residual P by 10kg of $P_2O_5$ was greater than that of 5kg/10a. The chemical composition and the price of the cured leaf were not affected by the $P_2O_5$ application, indicating that the increase in the rate of $P_2O_5$ application would not exert on the quality of tobacco.
This study was conducted to obtain the breeding information for the leaf breakdown, and correlation coefficients between leaf breakdown and some agronomic characters in flue-cured tobacco at Taegu Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute. NC 95 and NC 2326 were used as parents. The bulk method procedure was used from the F2 to the F4 generations, 54 plants were selected among F4, and 11 lines were selected among 54 F5 which based on high resistance to bacterial wilt compared with NC2326. The entries were composed of parents and 11 F6 advanced lines, and designed in randomized block with 3 replications. Plant seedlings were transplanted in 16 April. The number of breakdown leaf were investigated at flowering stage, 18 June. There were significant difference between NC 95 and NC 2326 for the number of breakdown leaf, number and weight of ground suckers, days to flower, yield and resistance to bacterial wilt, and similar results were appeared among lines. Estimated heritability in the broad-sense ranged from 59.3% to 87.4% for all characters. Most of genetic correlations were higher than phenotypic coefficients between characters. Number of breakdown leaf was positively correlated with days to flower, the number and weight of ground suckers, while it was negative to yield. One line among 11 had few breakdown leaf, low producted ground suckers and high resistance to bacterial wilt. Above results suggest that the number and weight of ground suckers can be use as a selection criterion for leaf breakdown even under the condition without leaf breakdown.
Tobacco (Nicotiana tabacum L.) cells were transformed with rice expansin genes, OsEXPA4, OsEXPB3, OsEXPB4, and OsEXPB6, to elucidate the function of the genes in tobacco cells. The transformation increased the mass of the callus by $36\%-65 \%$, and the cell length by $12\%-28\%$. The cell width was decreased by $3\%$ for OsEXPB3, not changed for OsEXPB4, increased by $25\%\;and\;20\%$ for OsEXPA4 and OsEXPB6, respectively. From database search, seven expansin genes were found and six of them belong to EXPA group and one of them belongs to EXPB group. EXLA and EXLB were not found. All tobacco expansin genes were evenly distributed in the phylogenetic tree of rice and Arabidopsis expansin genes.
Field experiment was conducted to find out the cause of calcium deficiency of burley tobacco (Nicotiana tabacum L.), Liming materials and application rate were CaSO4 : Ca 35kg/10a, CaCO3 : 35kg/10a and agricultural lime : Ca 142kg/10a. The breakdown in tissues at tips and margins of upper leaves was developed at maximum growth stage. If complete breakdown and death does not occur and growth takes place later, giving the leaf a scalloped appearance. Upper leaves contained lower calcium content than other leaves. The stem and midvein of calcium deficient plants contained lower calcium and calcium minus oxalic acid, but higher oxalic acid contents than those of normal plant. Fresh leaves of limed plot contained higher calcium and oxalic acid, but not significant increment of calcium minus oxalic acid than those of unlimed plot. Since calcium oxalate is insoluble, it could precipitate within the culls if the calcium and oxalic acid are accessible to each other. It suggest that high level of oxalic acid in stem and midvein could be interfering with translocation of calcium to upper leaves.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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