N-nitroso-N-methylurea (NMU) and N-nitroso-N-ethylurea (NEU), direct alkylating chemical mutagens and carcinogens, are shown to be the upregulators of cellular $NF-{\kappa}B$, regulating various genes that mediate tumorigenesis and carcinogenesis. Nitric oxide (NO), a toxic reactive radical gas, has been known to induce programmed cell death or apoptosis in various cells. Therefore, the assessment of NO production was examined to elucidate the possible contribution of NO release to the chemical carcinogenic potency of NMU and NEU in human skin cells. NMU and NEU did not alter the NO production, but they caused a significant downregulation of the NO generation on lipopolysaccharide (LPS)-induced NO production at concentrations ranging from $2{\sim}5{\mu}M$. The degree of downregulation of NO by NMU and NEU decreased up to 15% and 20%, respectively, compared to the control. These results demonstrate that the LPS-inducible keratinocytes NO synthase is involved in modulating carcinogenic potency by NMU and NEU, and the regulation of the cellular $NF-{\kappa}B$ activity by NMU and NEU is negatively correlated with the level of LPS-induced NO production in human skin cells. The findings of this study suggest the hypothesis that NMU and NEU-induced carcinogenesis may be associated with the downregulation of NO production, and the inducible NO may play an important role in NMU and NEU-induced carcinogenicity in human epidermal keratinocytes.
N-nitrosoethylurea(NEU)에 의한 지질 과산화물의 함량 변화와 알데히드 대사효소 및 항산화효소의 활성변화를 쥐 간세포에서 측정하였다. 알데히드 대사효소로는 alcohol dehydrogenase와 aldehyde dehydrogenase가 사용되었고 항산화효소로는 glutathione transferase, superoxide dismutase, glutathione reductase와 catalase가 사용되었다. 쥐 간세포에 다양한 농도의 NEU를 처리한 후 지질 과산화물의 함량변화를 측정하였다. 그 결과 6.25mM NEU에 의하여 지질 과산화물의 함량이 최대 2.5배 증가하였다. Alcohol dehydrogenase의 활성은 NEU처리에 의하여 대조군보다 최대 2.3배 증가하였고 aldehyde dehydrogenase의 활성은 약 2배 증가하였다. 전암성 병변의 지표로 이용되는 glutathione transferase와 catalase의 경우 NEU처리에 의한 활성증가가 미미하였다. 그러나 superoxide dismutase의 활성은 최대 1.5배 증가하였고, glutathione reductase의 활성은 약 3배 증가하였다. 그러므로 superoxide dismutase와 g1utathione reductase의 활성증가가 NEU의 독성에 대한 세포내 항산화 방어과정에서 중요한 역할을 할 것으로 추측된다
Purpose: The purpose of this study was to investigate the effect of electroacupuncture on NeuN expression in ventral horn motor neurons of spinal cord, changes in pain thresholdchanges in motor function in rats with partially dissected sciatic nerves. Method: A total of 120 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups, a control group and a group administered electroacupuncture at ST36, LI11 and SP9 with 120 Hz and 0.5 mA. Animals were sacrificed on days 1, 3, 7, 14 and 28 after nerve injury (the sciatic nerve was partially dissected). The pain threshold was recorded by an Analgesia? meter and a BBB? score was calculated for motor function. After preparing lumbar spinal cord slide sections, they were immunostained with NeuN antisera (1:2,500). Results: The numbers of NeuN immunoreactive neuronsin the electroacupuncture group was increased compared to the control group. The numbers of NeuN immunoreactive neurons on days 14 and 28 day were different (p<0.05), as were the numbers on days 3 and 7 (p<0.01). The pain threshold BBB score for the electroacupuncture group was higher than for controls. Conclusion: The increase in pain threshold, BBB-score and number of NeuN immunoreactive neurons inventral horn motor neurons of spinal cord in rats withnerve dissection showed that electroacupuncture can attenuate pain transduction and increase motor function. Also, NeuN was a good marker for identifying the degree of nerve cell loss after nervous system injury.
HER2/neu is a well-established prognostic and predictive factor for invasive breast cancer. However, the role of HER2/neu in ductal breast carcinoma in situ (DCIS) is debated and recent data have suggested that it is mainly linked to in situ local recurrence. Although molecular data suggest that atypical ductal hyperplasia (ADH) and duct carcinoma in situ (DCIS) are related lesions, albeit with vastly different clinical implications, the role of HER2/neu expression in atypical ductal hyperplasia is not well defined either. The aim of this study was to evaluate over expression of HER2/neu in DCIS and cases of ADH in comparison with invasive breast carcinoma. Archival primary breast carcinoma paraffin blocks (n=15), DCIS only (n=10) and ductal epithelial hyperplasia and other breast benign lesions (n=25) were analyzed for HER2/neu immunoexpression. Follow up was available for 40% of the patients. HER2/neu was positive in 80%of both DCIS and invasive carcinoma, and 67% of atypical ductal hyperplasia (ADH) cases. Thus at least a subset of patients with preinvasive breast lesions were positive, which strongly suggests a role for Her2/neu in identifying high-risk patients for malignant transformation. Although these are preliminary data, which need further studies of gene amplification within these patients as well as a larger patient cohort with longer periods of follow up, they support the implementation of routine Her2/neu testing in patients diagnosed as pure DCIS and in florid ADH.
Purpose: To evaluate the expression of Her2/neu and Ki-67 in benign and malignant gallbladder lesions, and to establish correlations with clinico-pathologic parameters. Materials and Methods: A retrospective analysis was conducted on formalin fixed paraffin embedded (FFPE) benign (n=25) and malignant gallbladder (n=25) tissue samples. Hematoxylin and eosin stained slides of each case were reviewed for: type of malignancy (whether adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, or any other type), grade (well, moderate, and poor), depth of invasion, pre-neoplastic changes in adjacent mucosal epithelium like metaplasia and dysplasia. Immunohistochemistry for Her 2 neu and Ki-67 was performed and data analysis was conducted using SPSS 17 software. Chi-square test was used to compare categorical/dichotomous variables. P value of ${\leq}0.05$ was considered significant. Results: The difference of Her 2 neu expression and Ki67 index between benign and malignant groups was found to be statistically significant. Her2/neu positivity did not have any significant correlation with various clinicopathological parameters other than liver involvement. 5 cases of gallbladder cancer showed both Her2/neu and Ki67 positivity. Ten cases were Ki67 positive but Her2/neu negative while one case was Her2/neu positive but Ki67 negative. Conclusions: The present study demonstrated overexpression of Her2/neu and Ki67 in gallbladder cancer. A trend of decreasing Her2/neu expression with increasing grade of tumor was observed. Furthermore, greater Ki67 positivity was found in cases with lymph node metastasis and distant metastasis. Future studies with a larger number of patients will be required to precisely define the correlation of Her2/neu expression and Ki67 positivity with clinicopathological parameters. The results however are encouraging and suggest evaluation of Her2/neu as a candidate for targeted therapy.
The bioactive functions of oligosaccharides from human milk have been reported by many studies. Many of oligosaccharides isolated from colostrum and/or milk of dairy animals have been reported to have similar chemical structures with those in human colostrum and/or milk. It has been proved by several studies that the oligosaccharides with similar chemical structure shared common bioactivities. Among domesticated dairy animals, bovine/cattle, caprine/goat, and ovine/sheep are the most commonly used species to isolate oligosaccharides from their colostrum and/or milk. Several studies on the oligosaccharides from goat colostrum and milk have revealed similar properties to that of human milk and possess the highest content of sialyl oligosaccharides (SOS) as compared to other ruminants. Indonesia ranks first in Association of Southeast Asian Nations (ASEAN) for goat milk production. Therefore, goat milk is the second most consumed milk in the country. The most reared dairy goat breed in Indonesia is Etawah Grade. However, oligosaccharides from Indonesia dairy animals including goat, have not been characterized. This is the first study to characterize oligosaccharides from Indonesia dairy animals. The present study was aimed to isolate and characterize oligosaccharides, specifically SOS from the colostrum of Etawah Grade goats by using proton/1H-nuclear magnetic resonance. The SOS successfully characterized in this study were: Neu5Ac(α2-3)Gal(β1-4)Glc (3'-N-acetylneuraminyllactose), Neu5Ac(α2-6)Gal(β1-4)Glc (6'-N-acetylneuraminyllactose), Neu5Gc(α2-3)Gal(β1-4)Glc (3'-N-glycolylneuraminyllactose), Neu5Gc(α2-6)Gal(β1-4)Glc (6'-N-glycolylneuraminyllactose), Neu5Ac(α2-6)Gal(β1-4) GlcNAc (6'-N-acetylneuraminyllactosamine) and Neu5Gc(α2-6)Gal(β1-4)GlcNAc (6'-N-glycolylneuraminyllactosamine). This finding shows that Etawah Grade, as a local dairy goat breed in Indonesia, is having significant potential to be natural source of oligosaccharides that can be utilized in the future food and pharmaceutical industries.
Varun, Chopra;Dineshkumar, Thayalan;Jayant, VS;Rameshkumar, Annasamy;Rajkumar, Krishnan;Rajashree, Padmanaban;Mathew, Jacob;Arunvignesh, Rajendran K
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권14호
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pp.5773-5777
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2015
Background: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is thought to develop from precancerous dysplastic lesions through multistep processes of carcinogenesis involving activation of oncogenes and loss of tumor suppressor genes. The human epidermal growth factor receptor 2 (Her-2/neu [erbB-2]), a cell membrane glycoprotein, is a growth factor receptor that has receptor tyrosine kinase activity. Her2/neu activation plays a central role in cell proliferation and survival. It has been shown that overexpression of Her2/neu increases the rate of cell division and growth, leading to precancerous changes. The aim of the present study was to compare the serum and salivary Her2/neu levels between cases with premalignant and malignant oral lesions. Materials and Methods: Fasting blood samples and unstimulated saliva by passive drooling were collected from three groups of healthy control (n=20), premalignant disorder (PMD) (n=20) and OSCC (n=25) subjects. The HER2 extracellular domain (HER2 ECD) levels were measured using ELISA. Results: The levels of serum Her2/neu showed no significant differences between any of the groups but on the other hand salivary Her2/neu levels were found to be significantly (p<0.05) higher when compared between control (median 68.7 pg/ml, range: 21.5 - 75.8) and OSCC (median 145.6 pg/ml, range: 45.1-191.1). A similar trend was observed when comparing between PMD (median 43.3, range: 22.1 -94.7) and OSCC with a statistical significance of p<0.05. Conclusions: Our study provided evidence of increased salivary Her2/neu in OSCC when compared to PMD and control which was not the case for serum levels. This suggests that probably Her2/neu is not highly amplified as in breast cancer so as to be reflected in serum. Since saliva is in local vicinity of the OSCC, even a mild increase might be mirrored. On the whole, this study proposes Her2/neu as marker for distinguishing premalignant and malignant conditions.
기생충에서 세포 표면에 존재하는 당단백 말단 Glc-NAc(N-acetylglucosa-mine)와 NeuNAc (N-acetylneuraminic acid)가 숙주 면역계를 인식하고 영양물질 흡수와 막 투과성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 이들 당단백 말단 GlcNAc와 NeuNAc의 폐흡충 피낭유충과 유약성충, 성충의 충체 조직세포에 분포를 확인하기 위하여 WGA 황금입자 복합체를 반응시켰다. WGA 황금입자 복합체에 반응시킨 폐흡충 발육 단계별 조직을 전자현미경으로 관찰한 결과 폐흡충 피낭유충의 표피합포체에는 황금입자가 고밀도로 표지된 것이 관찰되어 폐흡충 피낭유충 표피세포질에 lectin수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 관찰되었다. 유약성충과 성충의 맹관 막구조물에 WGA 황금입자가 고밀도로 표지되어 맹관의 상피세포 막 구조물에 WGA 수용체들이 고밀도로 분포하는 것으로 확인되었다. 폐흡충 피낭유충과 유약성충 그리고 성충의 배설관 상피의 막구조물에 WGA 황금입자가 표지되어 배설관상피의 막구조물에 WGA 수용체가 분포하는 것으로 확인되었다. 따라서 피낭유충의 표피합포체와 표피세포의 세포질에 분포하는 WGA 수용체인 GlcNAc와 NeuNAc는 숙주의 면역계와 세포인식에 관여하며 유약성충과 성충은 표피세포의 GlcNAc와 NeuNAc는 소멸되고 맹관과 배설관 상피에 GlcNAc와 NeuNAc가 분포하여 영양물질 흡수와 막수송에 의한 재흡수작용이 활발한 것이 확인되었다.
Sialytrisaccharides based on $\beta$-galactosyldisaccharides were synthesized using $\beta$-galactosidase and trans-sialidase in one pot. Using $\beta$-galactosidase from Bacillus Ciculans and trans-sialidase from Trypanosoma cruzi simulaneously, 6mM sialyltrisaccharides composed of about 95% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc and 5% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNAc were produced from a reaction mixture containing 25mM o-nitropheny1-$\beta$-D-galsctolneuraminic acid. One beauty of this reaction was that a secondary hydrolysis of the disaccharide intermediate occurring between the activated galactopyranoside and N-acetylgucosamine was prevented. Using $\beta$-galactosidase from Escherichia cloi and the same trans-sialidase, 15mM sialyltrisaccharides composed of about 90% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNac and 10% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc were produced from a reaction misture containing 400nM galactose, 800nM N-acetylglucosylation rection between galactose and N-actylgucosamine was diminant since the disaccharide intermediate mainly resulted sreulted in the silylated product.
Reaves, Marshall Louis;Lopez, Linda Carolyn;Daskalova, Sasha Milcheva
BMB Reports
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제41권1호
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pp.72-78
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2008
Human NeuNAc-9-P synthase is a two-domain protein with ability to synthesize both NeuNAc-9-P and KDN-9-P. Its mouse counterpart differs by only 20 out of 359 amino acids but does not produce KDN-9-P. By replacing the AFL domain of the human NeuNAc-9-P synthase which accommodates 12 of these differences, with the mouse AFL domain we examined its importance for the secondary KDN-9-P synthetic activity. The chimeric protein retained almost half of the ability of the human enzyme for KDN-9-P synthesis while the NeuNAc-9-P production was reduced to less than 10%. Data from the homology modeling and the effect of divalent ions and temperature on the enzyme activities suggest conformational differences between the human and mouse AFL domains that alter the shape of the cavity accommodating the substrates. Therefore, although the AFL domain itself does not define the ability of the human enzyme for KDN-9-P synthesis, it is important for both activities by aiding optimal positioning of the substrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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