• 환경위생공학
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• 제23권4호
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• pp.37-44
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• 2008

In this study we developed the analytical methods for the determination of three neurotoxin; anatoxin-a, saxitoxin and neosaxitoxin using HPLC/FLD system and this analytical methods were applied to real sample; algae culture and algae extracts. For the HPLC/FLD analysis of anatoxin-a samples were concentrated on WCX(Weak Cation Exchanger) SPE and then anatoxin-a in concentrate was derivatized with NBD-F solution. Supernatant was injected on HPLC system. For the HPLC/FLD analysis of saxitoxin and neosaxitoxin samples were separated on the column and then derivatizied by post column reactor for fluorescen detection. For post column reaction of saxitoxin we feed two kinds of reaction solution; Oxidizing Reagent of which composition was periodic acid(7mM) in 50mM potassium phosphate buffer, pH 9 and acidifying reagent of which Composition was 0.5M acetic acid. The LOD value for anatoxin-a, saxitoxin and neosaxitoxin in HPLC/FLD method was 24.3 ng. $35{\mu}g/L$, $27{\mu}g/L$ respectively. We determined the anatoxin-a content of lyophilized anabaena flos-aquae and $20{\mu}g/g$ d.w. of anatoxin-a was detected. We analyzed saxitoxin and neosaxitoxin in algae culture media and extracts of lypopyllized algal cell cultured and that of Deachung reservior. Saxitoxin and neosaxitoxin in real sample were below the limit of detection. Although there are various water treatment processes for removing neurotoxins were suggested no process give simultaneous and complete removal of neurotoxins. It was cocluded that nanofiltration which reject material by size can be a process for removal of neurotoxins.

• 한국수산과학회지
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• 제25권2호
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• pp.144-150
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• 1992

1989년 및 1990년도 진해만산 진주담치(Mytilus edulis)와 1989년도산 유독와편모조(Alexandrium tamareme) 배양 조체의 마비성패독 성분의 조성과 독성을 mouse assay법과 post column을 이용한 형광고속액체 chromatography법으로 조사하였다. mouse assay법으로 조사한 진주담치의 독성은 1989년산(3-4월)이 중장선 1g당 31-88 MU, 1990년도산이가식부 1g당 1.9-9.9 MU이었다. 독조성은 1989년도산의 경우, gonyautoxin1-4$(48-76\%), C1-C2\;(14-39\%),$ saxitoxin$(1-10\%)$, neosaxitoxin$(l-7\%)$ 그리고 미량의 decarbamoyl gonyautoxin 2,3가 포함되어 있었으며, 1990년도의 경우는 neosaxitoxin의 함량이 $44-50\%$의 비율을 나타내어 년도에 따라 큰 독조성의 차이를 나타내었다. 한편,A. tamarense의 배양조체의 독조성은 1989년도산 진주담치 와 유사하였으나, Cl, C2, decarbamoyl gonyautoxin 2,3의 비율이 다소 높았다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제2권2호
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• pp.155-160
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• 1999

Studies on detoxification of Paralytic Shellfish Poison (PSP)-infested oyster, Crassostrea gigas were carried out using available processing resources. Changes of paralytic shellfish toxin components and specific toxicity during canning process were also investigated with high performance liquid chromatography (HPLC). Toxic oysters collected at Hachong in Koje Bay were used for experimental samples. The toxicity of oysters with range of 185-778 ug/100g was reduced below the quarantine limit of 80 ug/100g or not detected level by the mouse bioassay after canning process. The mole $\%$ of toxin components in the shucked oyster was in the order of 25.1 mole $\%$ of gonyautoxin 1, 19.2 mole $\%$ of gonyautoxin 3, 17.2 mole $\%$ of gonyautoxin 4 and 14.6 mole $\%$ of gonyautoxin 2. This sample had tracing amounts of Cl, C2, saxitoxin and neosaxitoxin. In the case of specific toxicity, the major toxins were consisted of gonyautoxin 1-4. The sum of gonyautoxin 1, 2, 3 and 4 was 80% of total toxicity of oyster. Saxitoxin and decarbamoylsaxitoxin were the more thermostable than any other toxin components.

• 한국수산과학회지
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• 제29권6호
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• pp.900-908
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• 1996

Changes of paralytic shellfish toxin components and specific toxicity in blue mussel, Mytilus edu/is and oyster, Crassostrea gigas during canning process were investigated by high performance liquid chromatography (HPLC). The $mole\%$ of the frozen shucked blue mussel were in order of $27.5\;mole\%$ of gonyautoxin 1, $23.0\;mole\%$ of gonyautoxin 8 (C1) and $23.0\;mole\%$ of epi-gonyautoxin 8 (C2), while those of the frozen shucked oyster were in order of $29\;mole\%$ of C1, $22\;mole\%$ of C2, $16.7\;mole\%$ of gonyautoxin 2. Both samples had minor amounts of saxitoxin and neosaxitoxin. On the other hand, in case of specific toxicity, the major toxins were consisted of gonyautoxin $1\~4$ in both sample. The toxicity of gonyautoxin $1\~4$ were 88 and $84\%$ in blue mussel and oyster, respectively. According to the experimental results, C1, C2 and gonyautoxin 4 were very sensitive to heat treatment, while gonyautoxin 2 and saxitoxin were pretty heat resistant than any other toxin components.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제28권2호
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• pp.188-193
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• 2013

Aphanizomenon flos-aquae는 시아노박테리아 일종이며 anatoxin-a, saxitoxin, neosaxitoxin 등의 독소를 생산할 수 있어 국내에서는 식품원료로 사용이 금지되어있다. 전통적으로 시아노박테리아는 사상체 넓이, 세포 크기, 분열방법, 세포형태, 가스주머니의 존재유무 등의 형태학적 특징에 의한 분류가 가능하다. 그러나 가스주머니 혹은 무성포자와 같은 특징은 주변 환경 또는 생장조건에 따라 차이가 있으며 경우에 따라 소실되기도 한다. 따라서 PCR에 의한 Aph. flos-aquae를 함유하는 기능식품을 검출할 수 있는 분석법을 개발하였다. 프라이머를 설계하기 위하여 유전자은행(www.ncbi.nlm.nih.gov)에 등록되어있는 Aph. flos-aquae, 스피루리나의 16S rRNA 염기서열을 이용하였으며, 비교 및 분석에는 BioEdit ver. 7.0.9.0 프로그램을 사용하였다. 최종적으로 클로렐라, 스피루리나, 녹차, 시금치로부터 Aph. flos-aquae를 검출할 수 있는 AFA-F1/AFA-R1(363 bp) 프라이머를 최종 선정하였다. 그리고 상기 프라이머는 Aph. flos-aquae가 각각 1% 함유 되도록 제조된 클로렐라, 스피루리나 제품에서 모두 혼입여부의 확인이 가능함을 확인하였다.

• 한국물환경학회지
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• 제25권4호
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• pp.597-605
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• 2009

Algae bloom occurred in reservoir in summer can cause taste and odor in water and disturb the flocculation and sedimentation processes in water treatment plant and cause sand filter plugging. It was also reported that microcystins, anatoxin and saxitoxin released from cyanobacteria had acute toxic effects on liver and nervous system. For these reasons, many advanced countries inclusive of WHO set the guideline for these toxins and cyanotoxins have been managed with regular monitoring in Korea as well. However, complex sample preparation steps such as a solid phase extraction (SPE) and derivatization are required with an existing analysis method with HPLC. We needed to improve an analysis method for low extraction efficiency and long sample preparation time. In this study, we have established a new LC/MS/MS method which can simultaneously determine 6 cyanotoxins (Microcystins-LR, Microcystins-RR, Microcystins-YR, Anatoxin-a, Saxitoxin, Neosaxitoxin) with only simple filtration step. When $75{\mu}L$ filterated sample was injected onto the LC-MS/MS, the recovery ranged from 86% to 112% and the MDL was $0.025{\sim}0.581{\mu}g/L$. We can make the MDL be lower than the guideline ($1{\sim}3{\mu}g/L$) of advanced countries with simple preparation.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제16권3호
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• pp.159-164
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• 2013

The mouse bioassay and high performance liquid chromatography (HPLC) post-column oxidation method are different methods of quantifying paralytic shellfish poisoning toxins. In this study, we compared their ability to accurately quantify the toxicity levels in two types of field sample (oysters and mussels) with different toxin profiles for routine regulatory monitoring. A total of 72 samples were analyzed by both methods, 44 of which gave negative results, with readings under the limit of detection of the mouse bioassay ($40{\mu}g/100g$ saxitoxin [STX] eq). In 14 oysters, the major toxin components were gonyautoxin (GTX) 1, -2, -3, -4, -5, decarbamoylgonyautoxin-2 (dcGTX2), and decarbamoylsaxitoxin (dcSTX), while 14 mussels tested positive for dcSTX, GTX2, -3, -4, -5, dcGTX2, neosaxitoxin (NEO), STX, and dcSTX. When the results obtained by both methods were compared in two matrices, a better correlation ($r^2=0.9478$) was obtained for mussels than for oysters ($r^2=0.8244$). Additional studies are therefore needed in oysters to investigate the differences in the results obtained by both methods. Importantly, some samples with toxin levels around the legal limit gave inconsistent results using HPLC-based techniques, which could have a strong economic impact due to enforced harvest area closure. It should therefore be determined if all paralytic shellfish poisoning toxins can be quantified accurately by HPLC, and if the uncertainties of the method lead to doubts regarding regulatory limits.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제15권4호
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• pp.293-296
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• 2000

마비성패류독에 의하여 독화된 패류의 활용 방안 모색과 제독 방법 구명을 위하여 1997년 1월부터 12월까지 경남 진해만산 이매패류의 마비성패류독에 의한 독화 경향과 각각의 패류 종에 축적된 독소 구성성분 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 진해만 해역에서의 마비성패류독에 의한 이매패류 독화는 2월부터 시작하여 4월 중순에 최성기에 도달한 후 점차 감소하여 6월에는 완전히 소멸되었으며, 주요 양식 대상 품종인 진주담치와 굴 중의 마비성패류독이 식품에서의 허용기준치 (80$\mu\textrm{g}$/100g) 이상 지속되었던 기간은 각각 2개월과 40일이었다. 패류 종에 따른 마비성패류독에 의한 독화의 정도는 진주담치가 가장 높았으며, 바지락,굴, 피조개의 순이었다. 독소 출현 최성기인 4월 중순에서의 진주담치 독화의 정도는 굴의 6배에 달하였다. 독화된 진주담치와 굴의 경우 최고 독력 3,351 및 574$\mu\textrm{g}$/100g에서 50%수준으로 자연 감소하는데는 각각 15일과 7일이 소요되었으며, 기준치 이하로 감소하는데는 각각 1개월과 20일이 소요되었다. 패류의 체내에 축적된 마비성패류독의 구성성분은 진주담치, 바지락, 피조개, 그리고 왕우럭에서는 GTX1~4 group이 59.0~78.8%로 절대 우점을 차지하였으며, 검출 독성도 대부분 GTX group에 의한 것이었다. 그러나 굴의 경우 Cl과 neoSTX가 각각 37.9%, 26.2%를 차지하였으나 Cl에 의한 독성은 거의 없었으며, 검출 독성의 대부분 (80.0%)이 STX group에 의한 것으로 확인되었다.

• 한국수산과학회지
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• 제20권4호
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• pp.293-299
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• 1987

우리나라산 주요 패류에 대한 독의 분포특성 등에 대한 연구의 일환으로 우선 1986년 3월 부산시 사하구 구평동 지선에 소재하는 모회사(폐선을 해체하여 고철로 활용)의 작업인부들이 먹고 식중독 사고를 일으킨 원인식품인 진주담치를 시료로 하여 biassay를 통한 마비성 패류독의 독성을 조사하고 독소를 분리하여 electrophoresis, TLC, HPLC로 분석한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 식중독사고의 원인이 된 진주담치의 마비성 패류독 함량은 $132\~295MU/g$, 또는 $26.4\~58.9{\mu}g/g$ 였다. 2. 독화된 진주담치의 중장선부위에는 독성이 $439\~979MU/g$나 되어 육질부위의 약 9배에 달하였으며 전체 독성의 $70\%$ 정도가 중장선부위에 축적되어 있었다. 3. 마비성 패류독을 분리하여 전기영동, TLC, HPLC로 분석한 결과 주성분은 $Gonyautoxin_{1\~4}$ 였으며, Saxitofin 군은 아주 미량검출되었다. 이상의 결과로서 본 마비성 패류독에 의한 식중독 사고의 원인물질은 Saxitoxin이 아니고 Gonyautoxin 임을 알 수 있었다.