• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제2권2호
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• pp.102-107
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• 1992

For the purpose of producing L-ornithine by microbial fermentation, mutant strains were developed from glutamate-producing bacteria by mutagenesis using N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and UV irradiation. Brevibacterium ketoglutamicum BK1046, a L-citrulline auxotroph which is also resistant to arginine hydroxamate (Arghx), was isolated and selected as the best producer of L-ornithine. This strain was capable of producing L-ornithine at a concentration of 24 g/l after 69 hours of cultivation in the 21 jar fermentor. The optimum supplementary level of L-arginine, a substitute for L-citrulline, was found to be about 0.2 g/l in the shake-flask fermentation.

• 미생물학회지
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• 제25권4호
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• pp.290-296
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• 1987

Some streptomycin resistant strains of Rhizobium trifolii having nodulation ability were selected, and their nitrogenase activities, symbiotic effects on plant growth, and nodule electronmicroscope were compared with those of the wild type. After NTG treatment, as a mutagen, at the concentration exhibiting 99.7% lethal rate, 5 strains of streptomycin resistant mutant having nodulating ability were selected. Among these nodulating mutant strains, 3 strains produced more nodules and 2 strains showed less nodules than wild type. But their nitrogenase activities were decreased significantly, and nodule formation time was also delay compared with those of the wild type, and there was no remarkable difference in effects on plant growth. Microstructure of nodules by electronmicroscopy had mant distinctive differences between red clover nodules inoculated with wild type and mutants.

• 한국식물병리학회지
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• 제13권3호
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• pp.179-183
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• 1997

십자화과 식물에 검은썩음병을 일으키는 Xanthomonas campestris pv. campestris에 대하여 담배 18품종 중 가장 과민반응을 강하게 나타내는 품종(Nicotiana tabacum cv. TC500)을 과민반응 비기주식물로 선발하였다. NTG 돌연변이를 실시하여 얻은 약 4,500개의 mutant들을 $10^{8}$ cells/ml의 농도로 주사 접종하여 비기주식물인 담배 잎에서 과민반응을 유도하지 않는 HR-mutans(XHN 514-774, XHN 620-831)를 선발하였고, 기주식물인 양배추 잎에서 병원성을 나타내지 않는 비병원성변이주(XPN 1001)를 선발하였다. HR mutant를 기주식물인 양배추에 접종한 결과 병원성을 나타내었고, nonpathogenic mutant를 비기주식물인 담배잎에 접종한 결과 과민반응을 유도하였다. 담배 잎에서 HR-mutant와 wild type의 population를 조사한 결과 wild type은 24시간 이후 급격히 감소하는 반면, HR mutant는 일정수준을 유지하였으나 72시간 이후에 감소하였다. 그리고 mutant들의 protease, cellulase, amylase, polygalacturonate lyase 분비여부를 조사한 결과 wild type과 비슷하게 분비하였다.

• 대한치과보철학회지
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• 제36권1호
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• pp.26-49
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• 1998

The purpose of this study was to confirm the formation of hybrid layer and resin tags in dentin tissue and the possibility of bonding between luting cements used for the prosthesis and the resinous surface coated with resin bonding agents to prevent the dentin hypersensitivity after abutment preparation. Some resin bonding agents, which may have the possibility of bonding with polyacrylic acid as a liquid ingredient of polycarboxylate and glass ionomer cements, were selected. All-Blond desensitizer containing NTG-GMA and BPDM, Scotch-Bond Multipurpose plus containing HEMA, and XR-bond containing organophosphate were selected as a coating agent. Dental cements were zinc phosphate, polycarboxylate, and glass ionomer cement. After the exposed dentin surface of premolars was ethced with 10% phosphoric acid and coated with resin bonding agents, the morphology of treated surfaces and the resin tags and hybrid layers on sectioned surfaces were observed by SEM. Shear bond strength between the resin bonding agents and 3 kinds of cements was measured 24 hours after bonding. On the debonded surfaces of the shear bond strength tested specimens, the cement tags and the bonding sites between the resin materials and cements were examined by SEM. Following conclusions were drawn : 1. Coating of dentin with resin bonding agents had no effect on the shear bond strength of zinc phosphate cement. 2. Both of polycarboxylate and glass ionomer cements showed the increased shear bond strength by the dentinal coating with Scotch-Bond Multipurpose plus containing HEMA. However, in the case of dentinal coating with some agents containing NTG-GMA and BPDM or organophosphate, polycarboxylate cement exhibited the lowered shear bond strength, and glass ionomer cement showed the unchanged shear bond strength. 3. Complete obstructions of dentinal tubules were observed on the dentin coated with All-Bond desensitizer or XR-bond, but distinct shape of the orifices of dentinal tubules was observed consistently on the dentin coated with Scotch-Bond Multipurpose plus. 4. The hybrid layer was thickest on the dentin coated with All-Bond desensitizer, and the length of resin tags was longest on the dentin coated with Scotch-Bond Multipurpose plus. 3. On the debonded specimens which had been bonded with polycarboxylate cement or glass ionomer cement after coating with Scotch-Bond Multipurpose plus, the cement tags and the bonding sites between the resinous surface and the cements could be examined.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
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• 제10권
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• pp.125-135
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• 1992

Xylose 오페론의 조절기구(調節機構)를 밝히고 xyl 유전자(遺傳子)를 가진 재조합유전자(再組合遺傳子)들의 수용세포(受容細胞)로 사용(使用)하기 위해 대장균(大腸菌)에 NTG를 처리(處理)하여 xylose를 이용(利用)할 수 없는 xyl 변이주(變異株)를 최종(最終) 9주(株) 선발(選拔)하였다. MC-Xyl 한천평판배지(寒天平板培地)에서 백색(白色) 콜로니로 분리(分離)된 xyl 변이주(變異株)들은 모두 LB와 DM-Glc 배지(培地)에서는 친주(親株)인 E. coli JM109와 동일(同一)하게 자랐으나, DM-Xyl 배지(培地)에서는 생육(生育)하지 못했다. 그러나 xyl 유전자(遺傳子) 전체(全體)를 가진 pBX1으로 형질변형(形質變形)시킨 결과(結果) 모두MC-Xyl 한천평판배지(寒天平板培地)에서는 적색(赤色) 콜로니를 나타내고 xylose isomerase 활성(活性)도 친주(親株)와 유사(類似)하게 되살아 났다. 이들의 부귀(復歸) 돌연변이빈도(突然變異頻度)는 $10^{-8}{\sim}10^{-11}$ 이하(以下)로 유전적(遺傳的)으로 안정(安定)되었다. 분리(分離)된 xyl 변이주(變異株)와 그들의 형질전환주(形質轉換株)에 대하여 MC-Xyl과 MC-Xylu 한천평판배지(寒天平板培地)에서 콜로니의 색(色)을 관찰(觀察)하였고 xylose isomerase와 xylulokinase의 활성(活性)을 측정(測定)하여 다시 xylT 변이주(變異株) 3주(株)(DH13, DH121, DH125) xylA 변이주(變異株) 1주(株)(DH77), xylB 변이주(變異株) 1주(株)(DH43) 그리고 xylose 존재하(存在下)에서 이들 효소(酵素)들의 생성(生成)을 조절(調節)하는 xylR 변이주(變異株) 3주(株)(DH10, DH53, DH60), 마지막으로 xylR, A 유전자부위(遺傳子部位)에 변이(變異)가 일어난 것(DH35)으로 최종선별(最終選別)하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제18권3호
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• pp.167-176
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• 1975

ATP-저해 ribonuclease는 Bacillus subtilis와 같은 Bacillus속에서만 발견 되는 것으로서 이들 효소의 생리적 역활을 규명할 목적으로 Bacillus subtilis 균주를 사용하여 ATP저해성 negative ribonuclease변이주의 취득을 시도하고 선정된 균주가 생산하는 ribonuclease의 정제 및 몇 가지 성질에 대하여 실험한 결과는 아래와 같다. 1. Bacillus subtilis로 부터 ATP-저해 ribonuclease negative mutant의 취득을 시도한 결과 시험된 1817주의 균중에서 101균주가 변이주주로 선정 되었다. 2. 수개의 개별적인 column chromatography에 의하여 당균주가 생산하는 ATP-저해성 ribonuclease의 정제를 시도한 결과 DEAE-Sephadex A-50 column chromatography을 이용한 경우는 30배의 정제 효과와 99%의 회수율을 나타냈고 Sephadex G-75 column의 경우는 20배의 정제 효과와 98%의 회수율을 각각 나타냈다. 3. pH 5침전, 유안염석, Sephadex G-75 및 CM Sephadex를 연속적으로 통과시켜 당효소에 대한대량정제 시험을 시도한 결과 최초의 step(crude extract) 과정에 비하여 60배의 정제효과를 나타냈다. 4. 본정제 효소액에 대하여 전기영동을 실시한 결과 비정제 효소액에 비하여 매우 감소된 수의 담백 pattern을 나타냈다. 5. 당균주가 생산하는 ATP저헤 ribonuclease는 single stranded RNA를 분해하여 2',3'-cyclic AMP, 2',3'-cyclic CMP, 2',3'-cyclic GMP, 2',3'-cyclic UMP와 몇종의 미지물을 생성하였고 또한 본효소는 double stranded RNA를 분해하지 않었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권1호
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• pp.81-88
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• 1990

근채류식물의 근부원인이 되는 토양유래의 식물병원 성진균에 대한 생물학적 방제를 위하여 저병해인삼경작 지토양으로부터 식물근부균 Fusarium solani의 생육을 강력히 길항하는 억제세균 YPL-1을 분리, 선발하였으며 이들 동정한 결과 Pseudomonas stutzeri이거나 그 근연종으로 확인하였다. 선발된 P.stutzeri YPL-1에 의해 생산된 근부균생육억제물질은 열에 민감하고 고분자의 단백질물질로서 chitinase 및 laminarinase 등 F.solani의 외막가수분해효소인 것으로 추정된다. 더욱이 chitinase 생산능과 근부균생육억제능은 정관계로 비례한다는 것도 알았다. 이는 NTG를 이용하여 얻은 chitinase 및 laminarinase 생산불능변이주 P.stutzeri YPL-M122(chi-, lam-), P.stutzeri YPL-M153(chi-)에 의해서도 확인되었다. 그러나 본 P.stutzeri YPL-1은 siderophore를 전혀 생산하지는 못하였다. 이 결과로 미루어 보아 선발된 억제균 P.stutzeri YPL-1 균주에 의한 식물근부균 F.solani의 생육억제기작은 저분자물질인 항생물질이나 siderophore가 아닌 chitinase를 주로 하는 외막가수분해효소에 의한 근부균 F.solani의 세포벽분해에 기인된 것으로 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제13권3호
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• pp.245-250
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• 1985

효모의 구연산 생산성을 향상시키기 위하여 구연산 생성이 향상된 변이균주를 분리.사용하여 비교적 높은 당농도에서의 구연산발효 및 균체 순환식 반연속배양에 의한 구연산발효 실험을 실시하였다. 친균주인 Candida lipolytica S-109를 NTG처리하여 친주균에 비하여 구연산생성능이 30%정도 향상되고 fumarate, malate, isocitrate 생성이 억제된 변이균주 J-24를 분리하였다. 친균주 S-109와 변이균주 J-24를 10% glucose 함유 배지에서 6일간 배양하여 각각 56g/l, 72g/l의 구연산을 생성하였다. 배양액내의 구연산축적량을 향상시키기 위한 비교적 높은 glucose농도는 16%였으며 85g/l의 구연산을 생성하여 53% 수율을 보였다. P/C비, urea 및 yeast extract 농도를 각각 0.8-1.0 $\times$ $10^{-3}$, 0.15%, 0.25%로 할 때 93g/l의 구연산을 축적하여 58% 수율로 향상되었다. 효율적인 생산기를 연장하고 생산물 저해를 억제하며 유도기를 단축하기 위하여 균체순환식 반연속배양을 실시한 결과 그 생산성이 0.79g/l.h로서 회분식의 053g/l.h에 비하여 1.5배 높았다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제11권3호
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• pp.175-180
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• 1983

Lysine의 analogue인 thialysine은 야생주 Candida utilis NCYC-359의 생육을 강력하게 저해했으며 0.1%에서는 18시간까지 9.5%에서는 24시간까지 본 효모의 유도기를 지연시켰다. thialyssine에 의한 야생주의 생육저해의 회복에 미치는 아미노산 및 비타민의 영향을 조사한 결과 glycine, mthionine, arginine, histidine 그리고 trypphan등은 어느정도 효과가 있었으며 비타민은 거의 효과가 없었다. 특히 최소배지에 L-lysine을 thialysine의 1/8량만 첨가해도 thialysine에 의한 생육저해는 거의 일어나지 많았다. NTC 1회 처리시 thialysine에 대한 내성을 나타내는 빈도를 보면 최소배지에 thialysine 0.1% 첨가시 그 빈도가 0.11%, 0.5%시 0.03%로 나타났으며 이 내성맥리주에 의한 lysine 생산능을 검토한 결과 최소배지에 첨가된 thialyslne의 농도와 lysine생산능과는 뚜렷한 관계가 성립되지 않았으며 NTC를 회복처리하여 균체외로 lysine을 다양 분필 하는(450$\mu\textrm{g}$/$m\ell$) thialysine 내성맥리주 Candida utilis TRN-4006을 최종적으로 분리선별하였다.

• 미생물학회지
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• 제30권4호
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• pp.291-298
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• 1992

비변성 폴리아크릴 아미드 겔에서 Streptomyces coelicolor 의 catalase 활성 염색을 실시하여 여러개의 catalase 활성 띠를 관찰하였으며, 그 유형이 성장기에 따라 달라짐을 알았다. 포자와 정체 성장기에는 정체 성장기에만 특이적인Cat1(760kD) 이 관찰되었고, Cat2(300kD) 를 제외한 모든 활성 띠들이 나타났다. 중기 대수 성장기에는 Cat2 와 Cat 3-2, Cat3-2(140kD) 등 2개의 catalase 띠가 나타나며, 후기 대수 성장기에는 Cat3-1(170 kD), Cat3-2, Cat3-3(130kD). Cat4(70kD)등의 활성 띠가 나타났다. NTG 처리로 돌연변이화된 S. coelicolor 의 포자를 Bennet 평판 배지네서 배양한 후 과산화수소 거품 test 를 실시하여, 약 5000 여개의 콜로니 중 거품형성 속도나 양이 감소한 콜로니를 12개 얻었다. 야생형에 견주어 대부분 catalase 활성이 감소하였으며, 대수 성장기와 정체 성장기에서 모두 감소하였다. 거품형헝을 하지 않는 모든 돌연변이에서 Cat3-2 띠의 강도라 현저히 약해저 있음으로 보아 Cat3-2가 주된 catalase 인 것으로 추정된다. 대수 성장기에서 수확한 S. coelicolor 세포 추출액에서 Sepharose CL-4B, DEAE Sepharose CL-6B, Phenyl Sepharose CL-4B, Hydroxylapatite 크로마토그래피등 4단계의 크로마토그래피를 수행하여 Cat3-2 를 정제하였다. 비변성 폴리아크릴마드 겔 전기 영동을 수행한 결과 Cat3-2 는 67 kD 의 동일한 subunit 을 2개 가지고 있는 효소로 추정된다.