• 제목/요약/키워드: NTG

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섬유소분해효소 생산증진을 위한 Penicillium verruculosum의 균주개량 (Strain Improvement of Penicillium verruculosum for High Cellulase Production by Induced Mutation)

  • 정기철
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.388-395
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    • 1987
  • 천연섬유소 분해활성이 우수하고 그 효소 유도기구도 Trichoderma reesei와는 다른 Penicillium verruculosum F-3을 모균주로 사용하여 돌연변이 처리에 의한 유전적 개량을 시도함으로써 cellulase 생산성이 증진된 조절변이주를 얻고자 변이주 유도조건 변이주에 의한 cellulase 생성조건을 검토하였다. 한천평판상에서의 변이주의 선택분리 효율을 향상시키기 위하여 각종 colony 소형화제의 영향을 검토한 바 Oxgall을 배지에 1.5% 첨가하였을 때가 가장 좋았다. Cellulase 고생산성 변이주 선정의 한 지표로서 대사산물 억제의 해제를 선택했다. P. verruculosum F-3은 glucose 또는 glycerol 농도 1% 이상에서 본 효소생성이 억제되었다. 변이주 유도조건으로서 UV조사의 경우는 19분 처리로 약 0.2%, NTG 처리의 경우는 200$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도로 1시간처리로 48%의 생존율을 나타냈다. 변이처리 한 균주를 여지붕괴도, cellulose agar plate에서의 clear zone의 크기, cellulose powder 배지로 배양한 조효소액의 여지분해활 성을 조사하여 우수균주로서 UV-9, UV-10 및 NTG-3을 최종 선발했다. 각종 탄소원을 함유하는 배지에서의 cellulase 생산성을 조사한 바 KC-M-W 배지로 배양한 UV-9, UV-10 및 NTG-3의 여지분해 활성은 친주보다 각각 34%, 55%, 41% 증가되었으나, UV-9 및 NTG-3은 COA 자화능이 현저히 저하되었다. 변이주 UV-10은 COA-4 배지로 배양했을 때 친주에 비해 단백질량 30%, Avicel 분해활성 30%, 여지분해활성 20%, salicin 분해활성 50% 증가가 인정되었고, 비록 역가는 낮았지만 glucose 및 cellobiose를 함유하는 배지에서 CMC 및 salicin 분해활성을 구성적으로 생산하였다.

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스펙트럼영역 빛간섭단층촬영으로 측정한 갑상선 안병증 환자와 녹내장환자의 맥락막 두께 분석 (Choroidal Thickness in Thyroid-associated Ophthalmopathy between Normal Tension Glaucoma Using Optical Coherence Tomography)

  • 이보영;나태윤;최진아
    • 대한안과학회지
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    • 제58권8호
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    • pp.960-967
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    • 2017
  • 목적: 갑상샘눈병증과 정상안, 정상안압녹내장 환자의 황반하 맥락막 두께를 비교해 보고자 한다. 대상과 방법: 정상군 70안, 갑상샘눈병증군 74안, 정상안압녹내장군 60안을 대상으로 하였다. 모든 환자는 스펙트럼영역 빛간섭단층촬영의 Enhanced Depth Imaging 방법으로 중심와 맥락막두께를 측정하였다. 평균 중심와 맥락막 두께는 중심와아래, 중심와 아래에서 각각 1.5 mm 비측 및 이측의 세 지점의 평균으로 정의하였다. 일반화 추정 방정식을 통하여 맥락막 두께에 미치는 변수를 알아보았다. 결과: 평균 중심와 맥락막 두께는 정상 $252.07{\pm}55.05{\mu}m$, 갑상샘눈병증 $281.01{\pm}60.06{\mu}m$, 정상안압녹내장 $241.66{\pm}55.00{\mu}m$로 유의한 차이를 보였다(p=0.013). 중심와아래, 비측, 이측 중심와 맥락막 모두 정상안압녹내장에서 갑상샘눈병증에 비해 얇았다(p=0.014, 0.012, and 0.034). 갑상샘눈병증에서 나이, 성별, 굴절률, 안압을 보정한 후에도 정상안압녹내장군에 비해 맥락막 두께가 유의하게 두꺼웠다(${\beta}=32.61$, p=0.017). 결론: 갑상샘눈병증군에서 정상안압녹내장군과 정상군보다 유의하게 두꺼운 맥락막을 보였고 평균 망막신경섬유층 두께는 정상안압녹내장군이 갑상샘눈병증군보다 유의하게 얇았다. 갑상샘눈병증 환자에서의 두꺼운 맥락막이 녹내장 진행에 있어 어떠한 효과를 가지는지 향후 추가적인 연구가 필요할 것으로 보인다.

Studies on Development of Resistant Strains to Antibiotics and Antituberculosis Agents(II) -Isolation of Rifampicin Resistant Mutants from Clostridium butyricum-

  • Kim, Hyung-Soo;Choi, Eung-Chil;Kim, Byong-Kak
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제11권3호
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    • pp.218-224
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    • 1988
  • The preparation of Clostridium butyricum is used as a normalizing agent for human intestinal flora. When the microbe is simultaneously used with rifampicin, it is inactivated by the antibiotic. To develop rifampicin-resistant mutants, rifampicin-sensitive strain Miyairi II 588 of C. butyricum was treated with nitrosoguanidine (NTG). To ensure stable resistance to rifampicin, we examined whether the resistance was plasmid-mediated or chromosome-mediated. It was found that the resistance of four mutant strains was not mediated by its inherent plasmid, but by the chromosomal mutation. These strains were examined for the susceptibility and resistance to other antituberculosis agents and antibiotics. The results showed that these mutants were resistant to the high concentration of the antituberculosis agents.

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Tetraacctylphytospingosinc (TAPS) 생산을 위한 Pichia ciferrii의 균주 개량과 TAPS 생산에 대한 sodium acetate의 영향

  • 홍성갑;유연우
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
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    • pp.370-373
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    • 2001
  • Ultroviolet과 NTG 처리를 통한 mutagenesis를 통해 TAPS 생산균주인 Pichia ciferrii ATCC 14091로부터 많은 mutant들을 얻었으나 Sudan Black B 염색법과 콜로니 형태 관찰을 통하며 TAPS 생산이 우수한 변이균주를 선별하였다. 또한 sodium acetate 첨가를 통하여 TAPS 생산을 향상시켰다. 이는 TAPS가 포화중성 지방산인 palmitate와 serine의 축합반응으로 생성되며, sodium acetate로 부터 생성된 acetyl-CoA에 의해 아세틸화되어 세포 밖으로 분비되기 때문이다.

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耐熱性 ${\alpha}$-Amylase 高 生産性 Bacillus sp. No. 32H417의 分離 및 酵素 特性 (Isolation of Thermostable ${\alpha}$-Amylase Hyperproducing Bacillus sp. No. 32H417 and Some Properties of the Enzyme)

  • 김무성;오평수
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.122-127
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    • 1991
  • A bacterial strain NO. 32 which produced thermostable ${\alpha}$-amylase was isolated from soil and identified to genus of Bacillus. To enhance ${\alpha}$-amylase productivity, a successive mutation of Bacillus sp. No. 32 was attempted with treatment of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG). The resulting mutant, Bacillus sp. No. 32H417, which is risistant to refampicin and deficient in spore formation, produced about 90-fold high level of ${\alpha}$-amylase when compared with parental strain. The properties of the enzyme for thermostability were investigated. The optimal temperature and pH for enzyme reaction were 95$^{\circ}C$ and pH6.5, respectively, in the presence of 0.3mM $Ca^{2+}$ as an effective stabilizer.

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영양요구성주 및 유사체 내성 대장균 변이주에 의한 L-스레오닌 생산 (Production of L-Threonine by Auxotrophs and Analogue Resistant Mutants of Escherichia coli)

  • 이진호;오종원;현형환;이현환
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.583-587
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    • 1991
  • 대장균 W3110으로부터 NTG 및 UV를 사용하여 여러 단계의 돌연변이 실험을 거치면서 스레오닌 고생산균주인 대장균 TF427를 선별하였다. 선별된 변이주는 스레오닌 유사체인 AHV 내성, 메치오닌 및 이소루이신 요구성을 특징으로 한다. 5-L 발효조 실험에서 44시간 발효하였을 때 46.5g/l의 스레오닌이 생산되었다. 효모분석에 의하면, TF427의 아스파토키나아제 I의 활성은 스레오닌에 의해 저해받지 않았으며, 이 효소의 합성은 스레오닌과 이소루이신에 의해 억제를 받지 않았다.

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한천분해효소의 고생산성 변이주의 분리 및 최적배양조건 (Isolation and Its Optimal Culture Condition for High Agarase-Producing Mutant)

  • 황선희;하순득;김봉조;김학주;공재열
    • KSBB Journal
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    • 제14권3호
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    • pp.351-357
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    • 1999
  • A marine bacterium Bacillus cereus ASK202, agarase producing strain, was treated with some mutagenic agents, ultraviolte(UV), 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine(NTG), and ethyl methane sulfonate(EMS), several times for the increasing of the agarase production After mutagen treatment, we isolated one mutant strain treated with NTG showed the highest stability and agarase productivity and named as Bacillus cereus ASK202-N3. This Bacillus cereus ASK202-N3 strain was well grown in the modified marine medium containing 0.5%(w/v) agar, 0.3%(w/v) yeast extract, and 5.0%(w/v) NaCl, and the optimal initial pH, temperature and culture time were 7.8, $25^{\circ}C$ and 32h, respectively. In the optimal culture conditions, the agarase production was increased to 5.3 fold(850units/L) compared to that of the wild type.

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Monascus 속 균주의 균체 생산 및 고체배양에 의한 Monacolin K 생산 (Production of Cell Mass and Monacolin K from Monascus sp. on Rice Solid Culture)

  • 정혁준;유대식
    • 미생물학회지
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    • 제40권2호
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    • pp.160-166
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    • 2004
  • The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % KH$_2$PO$_4$, 0.05% The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % KH$_2$The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % $(KH_2PO_4$, 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.2% L-asparagine, pH 4.5, and the optimal inoculum size and shaking speed were $1.5{\times}10^6$ spores/50 m1 medium and 150 rpm, respectively. On optimal conditions, 4.1 g/l of the cell mass was obtained at 28$^{\circ}C$ for 3 days. The mycelium were inoculated on 500 g of steamed rice using vinyl bag ($30.6{\times}44$ cm) and incubated at $30^{\circ}C$, 85% humidity for 21 days. Lactone form monacolin K was rapidly increased for 2 days and reached highest concentration of monacolin K (2,930 mg/kg) for 15 days, and monacolin K was decreased after 15 days.

훈련방법의 차이가 SOD, Neutrophils 및 T세포에 미치는 영향 (The Effect of Different Type of Exercise on SOD, Neutrophils and T Lymphocytes)

  • 곽이섭;엄상용;김동은;황혜진
    • IMMUNE NETWORK
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    • 제5권4호
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    • pp.232-236
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    • 2005
  • Background: A physically active lifestyle and regular exercise training incurs many health benefits. One recently recognized benefit of regular moderate exercise is stress reduction and immune enhancement. Thus, a physical stress such as exercise may act at any number of points in the complex sequence of events collectively termed the immune response. Although exercise causes many propound changes in parameters of immune function, the nature and magnitude of such changes rely on several factors including the immune parameters of interest; type, intensity, and duration of exercise; fitness level or exercise history of the subject; environmental factors such as ambient temperature and humidity. Methods: This study was undertaken to investigate the effect of different type of exercise on superoxide dismutase (SOD), neutrophils, and T lymphocytes of Sprague-Dawley rats. Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups; a non-Trained group (NTG, n=6), a swim-Trained group (STG), and a treadmill-Trained group (TTG). The exercise regimen was designed in a treadmill (5 times/5 days/week) during 8-weeks for TTG, and swim training (5 times/5 days/week) during 8-weeks for STG, and the volume of exercise training was the same in both groups. Results: 8 weeks of regular swim and treadmill training significantly increased liver SOD concentration however, muscle SOD concentration was not statistically significant. In the level of neutrophils, TTG and STG showed significant difference, compared to NTG. TTG was the highest level of neutrophils. In the level of immune cell counts, there was significant difference among TTG, STG, and NTG both in the spleen and thymus. Conculsion: In conclusion, it can be stated that eight weeks swim and treadmill exercise training has beneficial effect in improving immune response and antioxidant defence capacity by augmenting immune cells and SOD activities of SD rats.

원형질체 융합에 의한 Avermectina B_{1a} 고생산성 Streptomyces avermitilis 균주 개발 (Development of High-yielding Mutants of Streptomyces avermitilis for Avermectin B_{1a} Production through Protoplast Fusion.)

  • 김경희;송성기;정연호;정용섭;전계택
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.101-109
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    • 2004
  • Streptomyces avermitilis가 생산하는 이차대사산물인 avermectin $B_{la}$ (AVM $B_{la}$ /)의 생산성을 향상시키고자, 고생산성 균주를 융합파트너로 이용하여 원형질체 융합에 필요한 기본 실험조건을 확립하였고, 대량 선별시스템을 이용하여 다양한 융합균주들을 선별하였다. 특별한 표지인자가 없는 경우에도 원형질체 융합에 의해 유전자재조합체들을 선별할 수 있는 방법을 개발하였다. 즉 고생산성 균주의 원형질체(L-isoleucine유사체인 O-methylthreoiune또는 azaleucine에 대한 저항성 변이주의 원형질체를 치사율이 약 95%정도 되도록 UV나 NTG로 각 원형질체를 돌연변이시킨 후, 융합을 시도하여 재생된 변이주를 원형질 융합된 유전자재조합체로 간주하는 방법을 고안하였다. 돌연변이원으로 UV를 이용할 경우 대부분의 유전자재조합 균주들의 AVM $B_{la}$ 생산성이 융합 모균주들에 비해 높게 나타났으며, 주목할 만하게도 최고 3배 정도 향상된, 거의 산업용 균주의 생산성을 갖는 균주들을 선별할 수 있었다.