The present experiment was carried out to study the pathogenesis of Newcastle disease(ND), ND virus (NDV) antigens and genes in various organs from NDV inoculated chickens were detected by immunohistochemistry and RT-PCR. Immunohistochemically, NDV antigens were detected in the spleen, thymus, cecal tonsil, proventriculus, trachea and lungs at 12 hour post-inoculation (hpi). Viral antigens were localized mainly in the cytoplasm of lymphocytes and macrophages. After 48 hpi, clinical findings of the affected chickens were open-mouth breathing, conjunctivitis, watery diarrhea and edema around the eye and neck. After 72 hpi, chickens showed muscular tremor, paralysis of the legs and wings, and coma. Histopathological results consist of multi-focal necrosis with hemorrhages in lymphoid aggregates of the intestinal tracts, necrosis of the lymphoid tissues, neuronal degeneration and necrosis, and perivascular cuffing. Using RT-PCR, virus genes were detected in the spleen and proventriculus at 48 hpi, and in the brain at 60 hpi.
Newcastle disease virus (NDV) vaccines were produced from Vero cells by using lively attenuated virus strain. The MOI of 0.1.' serum concentration of 2%. initial pH of 8.0. and infection time of 3 days were found to be optimum conditions for vaccine production. The treatment of polycation enhanced the virus production. When ascorbic acid was added as an antioxidant, NDV production was also enhanced. Utilization of $CaCl_2$ showed an inhibitory effect on the propagation of NDV. It was also found the ammonium ion concentration higher than 4mM inhibited virus production. Thus ammonium ion removal system was tried for the efficient production of NDV vaccine.
전염성기관지염 바이러스(infectious bronchitis virus: IBV), 조류 뉴모 바이러스(Avian pneumovirus: APV), 뉴캣슬병 바이러스 (Newcastle disease virus: NDV), 조류인플루엔자 바이러스(avian influenza virus: AIV) 전염성 후두기관염 바이러스 (infectious laryngotracheitis virus: ILTV)는 닭의 호흡기에 직접 감염하여 호흡기질환을 일으키는 대표적인 바이러스로 알려져 있다. 그 밖에 아데노바이러스(adenovirus)와 레오바이러스 (reovirus)도 닭의 상부호흡기에 침투하여 피해를 입히는 이차적 원인체로 작용할 수 있다. 이들중 APV와 ILTV는 닭의 호흡기도에 국한되어 증식하지만 IBV, NDV, AIV의 경우 호흡기도 이외의 장기에서 증식이 가능하여 그 피해가 다양하게 나타나 문제 시 되기도 한다 (예: 산란장기 및 신장 (IBV), 소화기 (NDV, IBV, AIV), 중추신경계 (NDV, AIV)). 이외에도 상당수의 감염성 질환이 닭의 호흡기에 영향을 미칠 수 있으나, 해당 농장의 호흡기 피해가 어떤 질병에 의한 것인지 명확히 파악하지 못한 채 단순 항생제 처방에만 의지하는 경우가 많은 것이 현실이다. 따라서 국내 양계농가에서 문제시되는 주요 호흡기 질병과 이들의 감수성을 증대시키는 요인을 파악하는 것이 필요하고, 호흡기 질병의 피해에 대한 재인식과 아울러 호흡기 질병 피해 감소를 위한 진단과 예방노력이 하루속히 정착되어야 할 것이다. 본지에서는 대표적인 호흡기 질병 세가지(전염성기관지염, 조류뉴모바이러스감염증, 뉴캣슬병)의 최근 발생동향과 그 대처방안에 대하여 소개하고자 한다.
Chung Ok Choi;Chung Gil Lee;Sung Man Cho;Jin Soo Na;Soo Hwan An;Joon Hun Kwon
한국가금학회지
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제15권3호
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pp.207-210
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1988
뉴켓슬병바이러스(NDV)인 LaSota 주를 SPF 발육난의 요막강내에 증식시켜 순수 정제한 것을 BALB/c 흰쥐에 면역시킨 후 추출한 비강세포와 흰쥐 골수암세포와의 융합방법에 의하여 NDV에 특이하게 작용하는 단크론성항체(MCA)를 생산하는 3주의 Hybridoma틀 작성하였다. 이 3주의 MCA는 모두 IgG형에 속하였으며 흰쥐 복강 내에 접종하여 생산된 복수항체의 항체가는 간접형광항체법으로 $10^3$-$10^6$에 달하였고 약독 및 강독 NDV에 모두 동일한 수준으로 작용하였다. 중화능은 인정되지 않았고 3주중 1주만이 별구응집 억제능을 약하게 나타냈다. 이 MCA를 이용하여 간접형광항체법으로 인공 감염시킨 닭에서 NDV항원 검출을 시도한 결과 기관점막을 비롯한 각종 장기의 도말표본에서 접종 3일 후부터 뚜렷한 검출이 가능하였다.
Newcastle disease virus (NDV) is a single-stranded negative sense RNA virus, which has been classified as a member of the Avulavirus genus of the Paramyxoviridae family. It is also one of the most important pathogens in the poultry industry. The glycoproteins, fusion (F) and hemagglutinin-neuraminidase (HN), determine the virulence of NDV, and the relevant molecular structures have already been determined. NDV isolates differ in terms of virulence, and at least 2 of 9 genotypes (I-IX) have been shown to co-circulate. Therefore, it is clearly important to differentiate between vaccine strains and field isolates. In vivo pathogenicity tests have been the standard protocol for some time, but molecular methods appear preferable in terms of the rapidity of diagnosis, as well as animal welfare concerns. In this study, we have designed primer sets from HN gene for phylogenetic analysis and restriction enzyme analysis, and from F gene for pathotype-specific RT-PCR. Via the combination of 2 methods, 106 Korean NDV isolates obtained from 1980 to 2005 were differentiated into vaccine strains, and virulent genotypes VI and VII. The genotype VI viruses were only rarely isolated after 1999, and genotype VII, after it was initially isolated from poultry in 1995, recurred in 2000, and then became the main NDV constituting a threat to the Korean poultry industry.
Son So-Youn;Kim Duk-Soon;Kim Hyun-Soo;Kim Won-Seol;Park Jae-Myoung;Shin Hyun-Jin
한국동물위생학회지
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제28권4호
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pp.375-385
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2005
The present study was conducted to investigate the genetic profile of two prevalent avian pathogens in Korea namely, Newcastle disease virus (NDV) and infectious bursal disease virus (IBDV). Two farms located in Yeongi-gun, Chungnam were selected for this study. The two viruses were isolated from various organs (spleen, trachea, bursa of Fabricius) of deceased chickens that showed clinical symptoms of Newcastle Disease or Infectious bursal disease like swelling and congestion of the F bursa, facial edema, lacrimation, greenish yellow diarrhea as well as pathological signs like airsacculitis, haemorrhages in the intestines and so on. For analysis of NDV and IBDV, a 466 and 435 base pair fragments corresponding to the HN and VP2 regions which are highly conserved among related strains of NDV and IBDV, respectively, were amplified by RT-PCR and analyzed by sequencing. Comparison of the VP2 region showed a $99.3\%$ homology between the Korean IBDV isolate and the BJ836-attenuated vaccine strain. In contrast, the HN region of the Korean NDV isolate only has an 83 to $84\%$ homology with the vaccine strains LaSota, B1 and VGGA. Our findings reveal that the prevalent NDV strain in Korea is genetically different from the vaccine strains and may explain the recent outbreaks of Newcastle disease in the region.
Mean death time of inoculated embryonated egg is one of the methods to determine the virulence of the Newcastle disease viruses (NDV). Evaluation of tissue tropism of NDV in the host has been proposed as an another way to determine the pathogenicity of NDV based on the principal site of viral replication. To evaluate the tissue tropism among NDV, an immunohistochemistry(IHC) technique using monoclonal antibody was applied in one-day-old SPF chickens inoculated with different ND vaccine strains such as Ulster 2C, VG/GA and B1 viruses by eye drop instillation. The tissues used for this comparison were trachea, intestine, Harderian gland and cecal tonsil, which were collected at 0.5, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 14 days post inoculation. Among test groups, chickens inoculated with B1 viurs, which is known to replicate in the respiratory system, have IHC positive staining mainly in the trachea and those inoculated with Ulster 2C have IHC positive staining mainly in the intestine. However, chickens inoculated with VG/GA strain have IHC positive staining in both the trachea and intestine. Therefore, a differences in tissue tropism among ND vaccine strains has been proved by the IHC technique. Based on this results, the IHC staining technique could be used to classify the NDV or to study the pathogenesis of NDV in chickens.
연구는 방글라데시에서 조류인플루엔자와 뉴캐슬 질병 바이러스가 국내의 현장 샘플에서 혼합항원키트의 민감도와 특이성을 평가하기 위하여 육계 및 산란계와 토종 닭 그리고 사육 야생오리, 거위, 비둘기와 메추라기로부터 야외 샘플을 수집하였다. 샘플은 방글라데시의 5 지역에서 발생한 조류인플루엔자 자연감염된 것으로 의심되는 닭과 야생사육조수로부터 수집되었다. 각 지역으로부터 2마리씩 선택적으로 샘플을 수집하였으며, 각 조류에서는 면봉을 이용하여 기도, 총배설강, 구-비강으로부터 3가지 유형의 샘플을 채취하였다. 70 마리의 조류에서 총210개의 야외 샘플이 수집되었으며, 조류인플레인자와 뉴캣슬병 바이러스 혼합항원신속진단키트를 검사하였다. 210개 샘플 중에서 15개(5 마리)가 조류인플루엔자 바이러스, 63개(21 마리)가 뉴캣슬병 바이러스, 27개(9 마리)에서 두 가지의 혼합감염이 나 타났으며, 그 외에서는 모두 음성으로 나타났다. 5 곳의 조류인플루엔자 양성 중에서 Mymensingh, Netrokona, Gibandha와 Kurigram의 마켓으로부터 산란계에서, Kurigram의 마켓에서 토종닭에서 양성이 나타났다. 야생사육조수는 뉴캣슬병에 양성이거나 또는 조류인플루엔자와 뉴캣슬병 바이러스에는 감염되지 않았다. 조류인플루엔자 및 뉴캣슬병 바이러스 신속진단키트로 기도, 총배설강, 구-비강으로부터 채집한 샘플에서 동시에 검출할 수 있는 것으로서 효과적으로 사용될 것으로 평가되었다. 조류인플레인자와 뉴캣슬병 바이러스 혼합 항원 검사 결과는 명확히 두 개의 바이러스 검출을 위한 테스트 키트로서 적은 노력과 대규모의 필드 샘플로부터 이들 바이러스의 검출에 효과적으로 사용될 수 있는 최신의 과학적 방법이며, 신속하게 질병을 진단할 수 있었다.
Monoclonal antibodies against Taka virus, a variant of Newcastle disease virus (NDV), were produced to compare the antigenicites of several avian paramyxoviruses including NDV. It was also used to study the activesite(s) of haemagglutin (HA) and neuraminidase activities of NDV. Five independent hybrid cell lines, which produced monoclonal antibodies against haemagglutinin-neuraminidase (HN) molecule of Taka virus, were established. From the results of the cross haemagglutination-inhibition(HI) test the monoclonal antibodies, the HN molecule of Taka virus seemed to have at least three different antigenic determinats; one was specific for all NDV strain tested, the second was only for Taka virus and the third was for Take virus, Banger and Yucaipa Furthermore the differences in the ratio of HI to neuraminidase-inhibition titers suggested that the active sites involved in HA and neuraminidase activities might be different from each other. However, since each of five monoclonal anitbodies was not especially specific for either HA or neuraminidase, the possibility that a single active site on the HN molecule may be responsible for both activities has not been excluded.
Firas Taha Mansour Al-Mubarak;Harith Abdulla Najem;Hazim Talib Thwiny
대한수의학회지
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제63권4호
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pp.41.1-41.6
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2023
Many viruses can infect different types of birds, with poultry being the most susceptible. These viral diseases have a direct negative impact on the poultry industry, with significant economic losses. This study examined a group of the most important viruses that infect backyard chickens in 2 specific areas of Basrah Governorate, south of Iraq. The study analyzed avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), and infectious bronchitis virus (IBV). Two hundred and ninety oropharyngeal swabs, 150 from Abu Al-Khasib and 140 from Shatt Al-Arab regions in the Basrah governorate, were obtained from backyard chickens with clear respiratory signs. The samples were subjected to viral RNA extraction, and the viral nucleic acids were detected using a reverse transcriptase polymerase chain reaction technique. The overall rate of viral infections was 74.8%, which varied depending on the type of virus: 15.8%, 31.3%, and 27.5% for AIV, NDV, and IBV, respectively. The NDV and IBV had much higher infection rates than that of AIV. In addition, the prevalence of AIV in the Shatt Al Arab district was significantly higher than in the Abul Khasib district. Moreover, there were no significant differences between the NDV and the IBV distributions in either of the targeted regions in this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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