The cytoplasm in mammalian cells is a battlefield between the host and invading microbes. Both the living organisms have evolved unique strategies for their survival. The host utilizes a specialized autophagy system, xenophagy, for the clearance of invading pathogens, whereas bacteria secrete proteins to defend and escape from the host xenophagy. Several molecules have been identified and their structural investigation has enabled the comprehension of these mechanisms at the molecular level. In this review, we focus on one example of host autophagy and the other of bacterial defense: the autophagy receptor, NDP52, in conjunction with the sugar receptor, galectin-8, plays a critical role in targeting the autophagy machinery against Salmonella; and the cysteine protease, RavZ secreted by Legionella pneumophila cleaves the LC3-PE on the phagophore membrane. The structure-function relationships of these two examples and the directions of future research will be discussed.
K. C. Hwang;D. W. Ok;D. N. Kwon;H. K. Shin;Kim, J. H.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
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pp.52-52
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2001
Many nucleoside diphosphate (NDP) kinases are ubiquitous enzymes responsible for the exchange of ${\gamma}$-phosphates between tri- and diphosphonucleosides. The catalytic Many nucleoside diphosphate (NDP) kinases are ubiquitous enzymes responsible for the exchange of ${\gamma}$-phosphates between tri- and diphosphonucleosides. The catalytic reaction follows a ping-pong mechanism in which the enzyme is transiently phosphorylated on a histidine residue conserved in all nucleoside diphosphate kinases. Beside their role in nucleotide synthesis, these enzymes present additional functions, possibly independent of catalysis, in processes such as differentiation, cell growth, tumor progression, metastasis and development. To clone murine nm23-M5, several expressed sequence tags (ESTs) of the GenBank data base, selected according to their homology to nm23-H5 cDNA, reconstituted a complete open reading frame (GenBank AF222750). To test whether murine NDPKs (1, 2, 3, 4, 5, and 6) can inhibit Bax-mediated toxicity in yeast, co-transformation was performed respectively. The yeast S.cerevisiae was transformed with a copy expression plasmid containing the histidine selection marker and expressing murine Bax under the control of a galactose-inducible promoter. Several clones were selected and found to be growth inhibited when Bax expression was induced with galactose. A representative clone was transformed again with a copy expression plasmid containing the tryptophane selection marker and expressing either murine Bcl-xL or NDPK under the control of a galactose-inducible promoter. Several subclones of the double-transformants were selected and characterized. The ability of Bcl-xL and NDPKs to suppress Bax-mediated toxicity was determined by growing yeast cells overnight in galactose media and spot-testing on galactose plates starting with an equal number of yeast cells as determined by taking the OD$_{600}$. Ten-fold serial dilutions were used in the spot-test. Plates were grown at 3$0^{\circ}C$ for 2-3 days. All murine NDPKs suppressed Bax dependent apoptosis. Futher study will be peformed whether Bax-toxicity inhibition was caused by NDP kinase activity or additional function.n.
According to the intercombined review of chemical and biological investigation it has been noted that the metabolizable energy per gram dietary protein of mixed diet of daily intake patterned by Korean population has been found 3.4-3.6 Cal., which entails 10-12% level of the protein calorie percentage of total metabolizable energy, the biological value being fallen within the scope 63-73. The structure of dietary protein has revealed that the lysine and isoleucine were primary limiting amino acids and threonine secondary limiting as a general trend, however, it is assumed that the ultimate nutritional effect of dietary protein might be restricted uniformly among regions by the amount of lysine, since the lysine availability has been yielded as low as 72-82% level. As for the net protein utillization NPUst falls in the range of 52-62 and the NPUop 47-58. In either part the mountainous region has demonstrated lowest value and the urban area highest, these trend being obviously associated with the ratio of animal protein relative to the vegetable origin. The net dietary protein calorie percentage (NDpCal %) has been found within the range of 5-7 that may be capable of meeting the requirement for the maintenance of adult, though for the growth it is insufficient. Present level of total caloric intake would not influence on the fate of protein value of prevailing regional diet in terms of caloric restriction, since the present intake of food energy is higher than the lower limit of caloric intake that would impair the biological performance of dietary protein fed ad libitum basis. Based on the protein efficiency, the adequacy of current level of protein intake was analyzed in terms of utilizable protein, and it has been demonstrated that the 37.8g of utilizable protein in the fishery region and 38.2g in the mountainous region were bellow the FAO recommendation. Accordin to the hematological study it may be interpreted that the anemic symptoms of the mountainous region has some possibility of being related to the inferior status of dietary protein in quality as well as in quantity.
Roy, Pantu Kumar;Fang, Xun;Hassan, Bahia MS;Shin, Sang Tae;Cho, Jong Ki
한국수정란이식학회지
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제32권3호
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pp.111-122
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2017
The objective of this experiment was to explore the effects of Roscovitine (Rosco) prior to in vitro maturation (IVM) of immature pig oocyte. Brilliant cresyl blue test has been used to select the good quality of oocyte. Specifically, the effects of Rosco exposure on nuclear and cytoplasmic maturation, diameter, intracellular glutathione (GSH) and reactive oxygen species (ROS), and embryonic development after parthenogenetic activation (PA) and somatic cell nuclear transfer (SCNT), and gene expression levels in SCNT embryos have been measured. Cumulus oocyte complexes (COCs) have been exposed in $75{\mu}M$ of Rosco for 22 and 44 h. The COCs that were matured in the IVM for 44 h without Rosco used as control group. Diameter of matured porcine oocytes 44 h culture with Rosco was significantly lower than 22 h culture with Rosco and control groups. GSH was higher in control group than 22 h and 44 h with Rosco but reduction of ROS in 22 h than 44 h with Rosco. In PA, exposure with Rosco 44 h oocytes group has been significantly lower than 22 h and control group in rates of maturation, cleavage and blastocyst formation. Similarly, in SCNT embryos rates of maturation, cleavage and formation of blastocyst have been also significantly lower in 44 h Rosco treated group than other two groups. SCNT embryos treated with Rosco 22 h showed greater expression levels of POU5F1, DPPA2 and NDP52Il mRNA compared with other two groups. Our results demonstrate that Rosco treatment with 22 h prior to IVM improves the development competence of porcine oocyte.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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