Light signals constitute major factors in regulating gene expression and morphogenesis in plants and fungi. Phytochrome A and B were well characterized red and far-red light receptors in plants. Red light signals increased the phosphorylation of 18 kDa protein, which was identified to be nucleoside diphosphate (NDP) kinase. The NDP kinase catalyzed autophosphorylation and had a protein kinase activity similar to MAP (mitogen activated protein) kinase. As candidates for blue light photoreceptors, cDNAs for CRY1 and CRY2 were isolated. The N-teminal regions of these proteins showed a high hornology to DNA photolyase. The 120 kDa protein first detected in Pisurn sativurn, which showed blue light induced phosphorylation was also detected in Arabidopsis thaliana. The 120 kDa protein was encoded by the nphl gene, which regulated positive phototropism of the plant. In Neurospora crassa, blue light irradiation of the membrane fraction prepared from roycelia stimulated the phosphorylation of the 15 kDa protein, which was also identifmd to be an NDP kinase. Recent progress in understanding early events in light signal transduction mainly in Pisum sativum Alaska, Arabidopsis thaliana and Neurospora crassa was summarized.
CHO Jung Jong;LEE Jae Hyung;LEE Sang-Jun;LIM Woon Ki;KIM Yung-Jin;KIM Kyu-Won;KIM Young Tae
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.6
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pp.984-991
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1997
New tumor suppressor gene, snm23, homologous to human nm23/NDP kinase (human nucleoside diphosphate kinase) gene whose product has a tumor metastasis inhibitory activity, was first cloned from Korean tiger shark (Scyliorhinus forazame) skin cDNA library constructed by using a $\lambda$ ZAP-II cDNA synthesis kit. About $1\times10^5$ plaques were screened and several positive plaques were isolated and confirmed by second screening. The phagemid containing a positive clone from the Uni-Zap XR vector was excised in vivo and the gene containing the tumor metastasis suppressor protein was named as snm23. Cloned gene, snm23, was sequenced with ABI-PRISM 310 Genetic Analyzer. The nucleotide and deduced amino acid sequences of snm23 have shown an open reading frame consisting of 450 base pairs that correspond to a protein of 150 amino acid residues, with a calculated molecular mass of 16.8 kDa. Sequence comparison of snm23 with human nm23/NDP kinase was performed by using Blast protein data base of National Center for Biotechnology Information. In order to determine tissue specificity, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used. Good expression level of snm23/NDP kinase was detected at the tissues from skin, cartilage, and liver of Korean tiger shark.
Arabidopsis NDPK2 (AtNDPK2) is a key singaling component that regulate cellular redox state and known to enhance multiple stress tolerance when over-expressed in Arabidopsis plant (Moon et al. 2003). In order to develop transgenic potato plants with enhanced tolerance to multiple stresses, we placed an AtNDPK2 cDNA under the control of a stress-inducible SWPA2 promoter or enhanced CaMV 35S promoter. Transgenic potato plants (cv. Superior and Atlantic) were generated using an Agrobacterium-mediated transformation system and selected on MS medium containing 100 mg/L kanamycin. Genomic Southern blot analysis confirmed the incorporation of AtNDPK2 cDNA into the potato genome. When potato leaf discs were treated with methyl viologen (MV) at 10 $\mu$M, transgenic plants showed higher tolerance to MV than non-transgenic or vector-transformed plants. The NDPK2 transgenic potato plants will be further used for analysis of stress-tolerance to multiple environmental stresses.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.29
no.4
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pp.299-306
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2009
Oxidative stress is the main limiting factor in crop productivity. To solve global environmental problems using the plant biotechnology, we have developed on the oxidative stress-tolerant transgenic tall fescue plants via Agrobacterium-mediated genetic transformation method. In order to develop transgenic tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.) plants with enhanced tolerance to multiple environmental stresses, nucleotide diphosphate kinase gene under the control of CaMV35S promoter were introduced into genome of tall fescue plants. Proteomic analysis revealed that transgenic tall fescue not only accumulated NDP kinase 2 protein in their cells, but also induced several other antioxindative enzyme-related proteins. When leaf discs of transgenic plants were subjected to cold stress, they showed approximately 30% less damage than wild-type plants. In addition, transgenic tall fescue plants showed normal growth when transgenic plants were subjected to $4^{\circ}C$ for 3 days treatments. These results suggest that transgene is important in ROS scavenging by induction of antioxidative proteins, and could improve abiotic stress tolerance in transgenic tall fescue plants.
The transfer of Mn-Superoxide Dismutase (SOD2) gene, complex gene (SA) of CuZnSOD and ascorbate peroxidase (APX), and NDP kinase 2 (NDPK2) gene into Korean 4 cultivars (cvs. Millenium White, Glory Blue, Glory Red, and Glory Purple) and 15 purebred lines of petunia was conducted using Agrobaterium-mediated technique. Two (Wongyo A2-16 and A2-36) of 15 purebred lines and one (cv. Glory Red) of 4 cultivars were effective for the transfer of SOD2 gene. The putative transgenic plants survived on the 2nd selection medium were 124. From PCR analysis, 118 (derived from 4 cultivars and 2 purebred lines) of 124 plants were confirmed to contain marker (npt II ) gene, while 58 of 118 plants did not have target genes. There were no plants with both npt II and SA genes. Twenty seven of 28 SOD2 transgenic plants were re-confirmed as transformants by Sothern analysis. SOD2 and NDPK2 genes were expressed in the transgenic petunias as the ratio of 77.8 to 100.0 % and 23.5%, respectively. T1 seeds were obtained from 36 acclimated transgenic plants (SOD2 34 plus NDPK2) in a glasshouse by self-pollination.
K. C. Hwang;D. W. Ok;D. N. Kwon;H. K. Shin;Kim, J. H.
Proceedings of the KSAR Conference
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2001.03a
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pp.52-52
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2001
Many nucleoside diphosphate (NDP) kinases are ubiquitous enzymes responsible for the exchange of ${\gamma}$-phosphates between tri- and diphosphonucleosides. The catalytic Many nucleoside diphosphate (NDP) kinases are ubiquitous enzymes responsible for the exchange of ${\gamma}$-phosphates between tri- and diphosphonucleosides. The catalytic reaction follows a ping-pong mechanism in which the enzyme is transiently phosphorylated on a histidine residue conserved in all nucleoside diphosphate kinases. Beside their role in nucleotide synthesis, these enzymes present additional functions, possibly independent of catalysis, in processes such as differentiation, cell growth, tumor progression, metastasis and development. To clone murine nm23-M5, several expressed sequence tags (ESTs) of the GenBank data base, selected according to their homology to nm23-H5 cDNA, reconstituted a complete open reading frame (GenBank AF222750). To test whether murine NDPKs (1, 2, 3, 4, 5, and 6) can inhibit Bax-mediated toxicity in yeast, co-transformation was performed respectively. The yeast S.cerevisiae was transformed with a copy expression plasmid containing the histidine selection marker and expressing murine Bax under the control of a galactose-inducible promoter. Several clones were selected and found to be growth inhibited when Bax expression was induced with galactose. A representative clone was transformed again with a copy expression plasmid containing the tryptophane selection marker and expressing either murine Bcl-xL or NDPK under the control of a galactose-inducible promoter. Several subclones of the double-transformants were selected and characterized. The ability of Bcl-xL and NDPKs to suppress Bax-mediated toxicity was determined by growing yeast cells overnight in galactose media and spot-testing on galactose plates starting with an equal number of yeast cells as determined by taking the OD$_{600}$. Ten-fold serial dilutions were used in the spot-test. Plates were grown at 3$0^{\circ}C$ for 2-3 days. All murine NDPKs suppressed Bax dependent apoptosis. Futher study will be peformed whether Bax-toxicity inhibition was caused by NDP kinase activity or additional function.n.
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