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EFFECT OF $CEO_2$ ADDITION IN GLASS COMPOSITION ON THE STRENGTH OF ALUMINA-GLASS COMPOSITES (알루미나-유리 복합체용 글래스의 조성에서 $CeO_2$의 함량변화가 강도에 미치는 영향)

  • Lee, Hwa-Jin;Song, Kwang-Yeob;Kang, Jeong-Kil
    • The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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    • v.38 no.5
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    • pp.595-605
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    • 2000
  • Dental ceramics have good aesthetics, biocompatibility, low thermal conductivity, abrasion resistance, and color stability. However poor resistance to fracture and shrinkage during firing process have been limiting factors in their use, particularly in multiunit ceramic restorations. A new method for making all-ceramic crowns that have high strength and low processing shrinkage has been developed and is referred to as the Vita In-Ceram method. This study was performed to investigate the effect of $CeO_2$ addition in borosilicate glasses on the strength of alumina-glass composites. Porous alumina compacts were prepared by slip casting and sintered at $1,100^{\circ}C$ for 2 hours. Dense composites were made by infiltration of molten glass into partially sintered alumina at $1,140^{\circ}C$ for 4 hours. Specimens were polished sequentially from #800 to #2000 diamond disk. and the final surface finishing on the tensile side was received an additional polishing sequence through $1{\mu}m$ diamond paste. Biaxial flexure test was conducted by using ball-on-three-ball method at a crosshead speed of 0.5mm/min. To examine the microstructural aspect of crack propagation in the alumina-glass composites, Vickers-produced indentation crack was made on the tensile surface at a load of 98.0 N and dwell time of 15 sec, and the radial crack patterns were examined by an optical microscope and a scanning electron microscope. The results obtained were summarized as follows; 1. The porosity rates of partially sintered alumina decreased with the rising of firing temperature. 2. The maximum biaxial flexure strength of 423.5MPa in alumina-glass composites was obtained with an addition of 3 mol% $CeO_2$ in glass composition and strength values showed the aspect of decrease with the increase of $CeO_2$ content. 3 The biaxial flexure strength values of alumina-glass composites were decreased with rising the firing temperature. 4. Observation of the fracture surfaces of alumina-glass composites indicated that the enhancement of strength in alumina-glass composites was due to the frictional or geometrical inter-locking of rough fracture surfaces and ligamentary bridging by intact islands of materials left behind the fracture front.

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Development of nuclear Transfer Embryos using Somatic Cell Nuclei from Korean Native Cattle (Hanwoo) with High Genetic Value (고능력 한우 종모우 체세포를 이용한 핵이식 배아의 발달에 관한 연구)

  • Park, S. W.;M. R. Shin.;Kim, Y. H. .;H Shim;Kim, N. H.
    • Korean Journal of Animal Reproduction
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    • v.25 no.1
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    • pp.51-61
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    • 2001
  • This study was conducted to determine developmental ability of reconstructed embryos by nuclear transfer using somatic cell of Korean bull with high genetic value. Fibroblast cells obtained from ear biopsy of the bull were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's medium (DMEM) at 37$^{\circ}C$ in air containing 5% $CO_2$. The cummulus-oocyte complexes were collected from slaughterhouse and were matured in vitro for 20 h in TCM 199 culture medium and the oocytes were then enucleated in modified phosphate buffered saline with cytochalasin B. Matured bovine oocytes were enucleated by aspirating the first polar body and metaphase chromatin using a beveled pipette in modified phosphate buffered saline. The ear fibroblast cells were fused into enucleated oocyte by electrical stimulation. The reconstructed oocytes were activated with ionomycine and 6-dimethylaminopurine, and then cultured in CR1aa medium for 7.5 days. Out of 524 bovine eggs reconstructed by nuclear transfer 65.6%(277/422) embryos were cleaved, and 30.7% (85/277) cleaved embryos were developed to the morula to blastocysts. There was no difference of developmental ability in vitro of reconstructed embryos regardless of donor cell passages. In order to determine fate of foreign mitochondria of donor nucleus, the Mito Tracker stained cells were fused into enucleated oocytes. The donor mitochondria were detected early stage of embryos, but disappeared rapidly. The developmental ability of reconstructed embryos was not impaired by Mito Tracker treatments. The results indicate that viable reconstructed embryos can be producted by nuclear transfer using somatic cell of Korean bulls.bulls.

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A Comparison of Performances for Growing Periods of Duck Breeders (육성 기간 중 종오리의 품종별 생산성 비교 연구)

  • Na, J.C.;Bang, H.T.;Park, S.B.;Yu, D.J.;Kim, H.G.;Kang, G.H.;Park, M.N.;Choi, H.C.;Suh, O.S.;Kang, H.K.
    • Korean Journal of Poultry Science
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    • v.36 no.2
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    • pp.133-137
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    • 2009
  • This study was conducted to evaluate the performance of Cherry Valley and Grimaud strain. A total of two hundred eighty eight, one day old duck breeders (Cherry Valley and Grimaud strain) were randomly divided into two groups with 4 replicates of 36 birds each and fed a commercially available diet for 24 weeks. Overall body weight gain was significantly higher in Cherry Valley (3,064 g) than in Grimaud strain (2,851 g). Feed intake was significantly increased in Grimaud strain compared with Cherry Valley strain (p<0.05). Viability of Grimaud strain showed 100.0% and was higher than that of Cherry Valley strain. Uniformity was not statistically different between Cherry Valley and Grimaud strains.

버섯의 항암효과 -영자 균사체 다당류의 항종양 활성-

  • 이준우
    • Proceedings of the Korean Journal of Food and Nutrition Conference
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    • 1997.06b
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    • pp.13-14
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    • 1997
  • 영지의 약리효과는 triterpenoid계의 저분자와 polysaccharide인 고분자로 대별할 수 있다. 저분자 물질은 항염증작용, 항알러지작용, 간암세포 성장 억제작용, 혈압 강하작용, 혈소판 응집저해작용 등이 있으며, 고분자 물질은 혈압강하작용, 정혈작용, 고지혈증 개선작용, 혈당 강하작용, 면역 증강작용 및 항종양작용 등이 있는 것으로 알려졌다. 현재까지의 영지에 관한 연구는 주로 자실체에 대한 연구가 주류를 이루고 있으며 이들의 산지, 환경조건, 채집시기 및 실험자들에 따라 약리 효과 등에 많은 차이가 있다. 이들에 대한 효과가 영지의 대표적 약리효과라고 언급하기엔 부족한 점이 많으므로 약리효과가 우수하고 일관성이 있는 영지 유래 다당류를 얻기 위한 방법으로서는 균사체의 대량배양법 및 분리방법이 확립 되어야만 한다. 본 연구에서는 새로운 항암활성 다당류의 개발을 위해 국내 자생 영지를 채집하여 검색 및 계통적 분류를 행하였으며 분리된 균주의 최적 액체배양 조건, 다당류 분리 조건, 다당류의 물리화학적 특성 및 약리활성 등에 관한 연구를 실시하였다. 그 중 약리활성이 우수한 G- lucidum IY009 균주를 선발 하였다. 구조적 특징과 종양 면역 활성과의 관계 규명을 위해, G- lucidum IY009 배양균사체로부터 다당류를 T-AS, U-AS, M-AS, S 및 H로 분획 하였다. 추출조건에 따른 다당류 GLG의 수율은 열수 추출 분획이 2.98g/l로 가장 높았으며, U-AS및 T-AS에서 각각 2.32g/l, 2.07g/l이었다. GLG의 특성을 조사하기 위하여 수용성과 비수용성으로 분리한 결과 수용성 분획은 비수용성 분획보다 높은 당 함량을 나타냈으며, T-AS는 70.3%의 당과 7.8%의 단백질로 구성 되었다. GLG 대부분의 분획들은 60~93%의 glucose로 구성된 다당류 이었으며, 주로 $\beta$-glucose로 구성된 다당류 이었다. 아미노산은 Asp 및 Glu의 산성 아미노산과 Ala, Leu 등의 함량이 높게 나타났으며, 비알칼리 추출물에서 Ser과 Thr의 함량이 높게 나타났다. 다당류 T-AS는 평균 분자량이 2,000 kD와 12kD에서 주 peak를 나타냈으며, 수용성 분획의 평균 분자량은 12kD이고 비수용성 분획은 36~2,000 kD의 평균 분자량 분포를 갖는 것으로 나타났다. IR과 NMR 분석 결과 890 cm-1에서 흡수 peak를 나타내어 $\beta$-(1,3)0glucan과 $\beta$-(1,6)-glucan의 구조를 갖는 다당류로 확인 되었다. T-AS 분획은 C:H:O:N의 함량비가 38.9:5.7:49.6:1.84%이며, 이 물질의 융점은 163 $^{\circ}C$로 연한 갈색을 나타낸다. 분리된 GLG의 항암활성 기전 규명을 위해, in vivo 항암실험, 항보체 활성능, 항체 생성능, serum protein 분비능, 대식세포의 탐식능과 활성능 및 세포간 물질 분비 등의 상관관계를 조사하였다. 다당류 GLG 분획물들 가운데 항보체의 활성이 높았던 분획은 sarcome 180에 대한 항암 활성이 높게 나타났다. 다당류 T-AS의 보체 활성화 기작은 classical과 alternative complement pathway의 양 경로를 통해 활성화 되었다. T-AS 분획은 mouse내의 특정 혈청단백을 증가시켰으며, 항체 생성능의 증가가 관찰되어 effect T 세포의 활성화가 나타나고 있음을 알 수 있었다. T-AS는 생체내 투여시에 대식세포의 탐식능이 증진되었으며, 대식세포 기능 저해제에 의한 대식세포의 기능 저해 현상이 회복되었다. 이와 같은 결과들로부터, T-AS의 항암 활성은 활성화된 보체 성분 및 당 수용체들이 존재하는 대식세포의 개입을 시사한다.

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가스산업시설에서의 위험성 평가분야에서 지리정보시스템의 적용

  • 이정우;김윤화;김기수;고재욱
    • Proceedings of the Korean Institute of Industrial Safety Conference
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    • 1997.11a
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    • pp.69-75
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    • 1997
  • 우리나라는 그동안 가스산업에서 고속성장을 이룩해 왔으나, 근래에는 중대가스산업사고가 빈번하게 일어나고 있다. 그건 이유로 1996년도에는 중대산업사고 예방제도가 전면적으로 실시되고 공정안전보고서를 작성하여 제출하도록 함으로서 위험성 평가의 중요성이 점차 높아가고 있으며, 위험성 평가 기법들에 대하여 여러 연구 단체에서 연구ㆍ시도되고 있다. 또한 이러한 연구ㆍ보고된 위험성 평가 기법들을 프로그램화하고 적용하려는 시도가 많이 있어 왔다. 본 연구에서는 기존에 연구ㆍ개발된 위험성 평가 기법들에 최근 컴퓨터 산업의 발달에 힘입어 각광을 받고 있는 지리정보시스템을 적용하고자 한다. 이러한 가스산업시설의 위험성 평가 시스템은 위험성을 평가하기 위해서 필요한 여러 가지 정보들을 지리정보시스템이 속성 데이터로서 저장하고 있으나, 가스산업시설에 관련된 주변의 도면들을 공간 데이터로서 저장하고 있다. 그리고 위험성 평가 시스템의 세부적인 기능을 모듈화하였다. 우선 위에 언급한 속성 데이터와 공간 데이터를 관리하는 모듈과 이러한 데이터를 가지고 사고영향 범위를 산출해내기 위한 모듈, 그리고 산출된 사고 영향 범위를 도면에 나타내는 모듈로 나뉘어져 있다. 이렇게 지리정보시스템에 구축되어 있는 도면에 위험성을 평가한 결과치를 나타냄으로서 위험성 평가 숙련자가 아니더라도 위험성 평가를 할 수 있고 결과를 분석하도록 도와 줄 수 있도록 할 수 있다. 또한 향후 재난관리시스템에서는 도면상의 도로에 교통량 가중치와 인근 소방서와 경찰서등의 위치를 관리하도록 지리정보시스템을 적용할 수 있으면, 가스시설물 관리시스템에서는 최근 대형가스사고의 대부분이 타공사에 의한 것임을 고려하여 가스배관망을 포함하여 기타 다른 지하배관망을 관리하도록 지리정보시스템을 적용할 수 있다. (중략)램프에서 좋은 광학적 특성을 얻기 위해 가장 중요한 것은 수축이 없이 방전을 확산시키는 것이다. 이를 위해서 램프구조와 구동법을 최적화하는 것이 필요하다. 또한 기체압력을 높임으로서 Xe의 여기복사를 얻을 수 있었다. 동시에 새로운 적용영역의 가능성을 탐구하는데 있다 하겠다.[C/N]의 값을 나타내었다.다.다.화 기술, 구동방법등에 대한 기술개요와 국내외 기술동향에 대하여 소개하고자 한다.었다.다._{2}$가 0.25[wt%] 첨가된 시편의 20[.deg.C]에서의 유전상수는 16,700으로 최대값을 유전손실을 1.28[%]로 최소값을 나타내었다. 또한 모든 시편은 온도 및 주파수에 따라 유전상수가 완만하게 변화하는 유전이완 특성을 나타내었다.다.수적인 물의 양에 따른 DIAION WA30의 라세미화 효율에 관하여 실험한 결과, 물의 양이 증가할수록 그 효율은 감소하였다. DIAION WA30을 라세미화 촉매로 사용하여 아이소옥탄 내에서 라세믹 나프록센 2,2,2-트리플로로에틸 씨오에스터의 효소적 DKR 반응을 수행해 보았다. 그 결과 DIAION WA30을 사용하지 않은 경우에 비해 반응 전환율과 생성물의 광학 순도는 급격히 향상되었다. 전통적 광학분할 반응의 최대 50%라는 전환율의 제한이 본 연구에서 찾은 DIAION WA30을 첨가함으로써 성공적으로 극복되었다. 또한 고체 염기촉매인 DIAION WA30의 사용은 라세미화 촉매의 회수 및 재사용이 가능하게 해준다.해준다.다. TN5 세포주를 0.2 L 규모 (1 L spinner flask)oJl에서 세포간의 응집현상 없이 부유배양에 적응,배양시킨 후 세포성장 시기에 따른 발현을 조사한 결과 1 MOI의 감염조건 하에서는 $0.6\times10^6$cell/m

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A Study on the Color and Lighting in the Assisted Living Facilities for the Elderly - Focused on the facilities in Korea and the United States - (노인주거복지시설의 색채와 조명에 관한 연구 - 한국과 미국의 사례분석을 중심으로 -)

  • Chun, Jin-Hee;Dolores A. Ginthner
    • Korean Institute of Interior Design Journal
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    • v.13 no.2
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    • pp.120-132
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    • 2004
  • 고령사회 2001의 발표에 의하면, 노년인구의 증가는 전 세계적으로 21세기까지 지속될 전망이며, 우리나라도 예외가 아니어서 이에 대한 심각한 사회문제가 예상되고, 이들을 위한 특수주거시설에 대한 환경개선이 요망된다. 본 연구는 노인주거복지시설에서 색채와 조명에 대한 개선방향을 제시하기 위한 것으로, 색채와 조명환경을 정량적, 정성적으로 비교 분석하는데 연구의 목적이 있다. 이를 위해 2003년 2월부터 8월까지 우리나라와 미국의 양로시설 20사례에 대한 현장방문조사가 수행되었고, 모든 시설이 공통적으로 가지고 있는 로비, 복도, 식당, 침실 등 4개 영역이 집중적으로 조사되었다. 1) 색상분포도 조사 결과, 한국시설은 미국 시설과 달리 주조색으로 한색을 많이 사용하고 있으며, 보조색, 강조색의 활용도가 낮은 것으로 나타났다. 2) 색상$\cdot$명도의 간격별 조화 정도에 대한 정량적 평가를 통해 한국시설은 명도대비보다는 색상대비가, 유사조화보다는 대비조화가 두드러졌는데 기능적 측면에서는 이상적이나 친근한 분위기를 만들기에는 한계가 있다. 3) 미도(Aesthetic Measure) 측정 결과, 한국과 미국 시설 모두 평균 이상을 보였는데, 특히 한국시설은 색상 대비 이외에 유사색 조화와 같은 질서요소를 강화시킬 필요가 있다. 4) 한국시설은 미국에 비해 조명 환경이 매우 열악하였는데, 자연채광의 유입은 어느정도 만족스러우나 이를 양질의 조명으로 만들기 방안이 요구된다. 5) 조명방식, 광원유형 등 인공조명에 대한 분석 결과, 한국시설은 매우 단순하며 경제적인 방법에 의존하고 있는데 광원의 선택, 배치, 설치 등 기술적인 보완이 요구된다. 6) 한국시설들의 시설별, 영역별 평균조도는 매우 낮은데, 활동시간대의 권장조도 유지는 물론, 영역 간의 조도 차이를 줄이는 방안이 요구된다.신만의 고유한 해결책으로 발전시키는지를 고찰하고자 한다. 본 논문의 목적은 서울을 사례분석 중 하나로 사용하여 인테리어 디자인 분야의 경계를 대도시로 확장하는 동시에 새로운 적용영역의 가능성을 탐구하는데 있다 하겠다.[C/N]의 값을 나타내었다.다.다.화 기술, 구동방법등에 대한 기술개요와 국내외 기술동향에 대하여 소개하고자 한다.었다.다._{2}$가 0.25[wt%] 첨가된 시편의 20[.deg.C]에서의 유전상수는 16,700으로 최대값을 유전손실을 1.28[%]로 최소값을 나타내었다. 또한 모든 시편은 온도 및 주파수에 따라 유전상수가 완만하게 변화하는 유전이완 특성을 나타내었다.다.수적인 물의 양에 따른 DIAION WA30의 라세미화 효율에 관하여 실험한 결과, 물의 양이 증가할수록 그 효율은 감소하였다. DIAION WA30을 라세미화 촉매로 사용하여 아이소옥탄 내에서 라세믹 나프록센 2,2,2-트리플로로에틸 씨오에스터의 효소적 DKR 반응을 수행해 보았다. 그 결과 DIAION WA30을 사용하지 않은 경우에 비해 반응 전환율과 생성물의 광학 순도는 급격히 향상되었다. 전통적 광학분할 반응의 최대 50%라는 전환율의 제한이 본 연구에서 찾은 DIAION WA30을 첨가함으로써 성공적으로 극복되었다. 또한 고체 염기촉매인 DIAION WA30의 사용은 라세미화 촉매의 회수 및 재사용이 가능하게 해준다.해준다.다. TN5 세포주를 0.2 L 규모 (1 L spinner flask)oJl에서 세포간의 응집현상 없이 부유배양에 적응,배양시킨 후 세포성장 시기에 따른 발현을 조사한 결과 1 MOI의 감염조건 하에서는 $0.6\times10^6$cell/mL의 early exponential시기의 세포밀도에서 72시간 배양하였을 대 최대 발현양을 나타내었다. 나타내었다.

Effects of Dietary Supplementation of Glycyrrhiza uralensis Fisch and Solanum nigrum L. Mixture for Alternate the Antibiotics on Productivity and Blood Composition in Broiler Chickens (항생제 대체 감초와 용규 혼합 급여가 육계의 생산성과 체액 성상에 미치는 영향)

  • Cho, S.K.;Kim, H.I.;Lee, M.K.;Lee, J.J.;Kwak, Y.C.;Lee, S.C.;Lee, Y.
    • Korean Journal of Poultry Science
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    • v.36 no.3
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    • pp.215-222
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    • 2009
  • The objective of this study was to evaluate the effects of dietary Solanum nigrum L. (SNL) and Glycyrrhiza uralensis Fisch (GUF) mixture powder on performance and blood compositions of broilers. Seven-day old Ross broiler male chickens were randomly given into one of the 5 dietary treatments for 5 weeks: 1) no SNL-GUF and antibiotics (control); 2) 5 ppm avilamycin (T1); 3) 0.5% SNL and GUF (T2); 4) 1.0% SNL and GUF (T3); and 5) 2.0% SNL and GUF (T4). Each dietary group (n = 10) had three replicates. Body weight gain, feed intake and feed conversion ratio of broiler chickens were not significantly different among treatments. Carcass weight was highest at both 4 (P<0.05) and 6 weeks (P>0.05) in the treatment with 1.0% SNL and GUF. Liver, but not Spleen, weights at both 4 and 6 weeks were significantly higher in the treatments with 0.5% SNL and GUF treatment (P<0.05). The contents of protein, albumin, bilirubin, glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic-pyruvic transaminase (GPT), glucose, triglyceride (TG) and cholesterol in blood serum at the 4weeks and 6 weeks were not significantly influenced. These results suggest that addition of SNL and GUF could be use a substitutes for antibiotics since they did not influence to the productivity and the blood composition of the broilers.

Yield Potentials of Rice and Soybean As Affected by Cropping Systems in Mid-mountainous Paddy Soils of Korea

  • Kang, Ui-Gum;Choi, Jong-Seo;Kim, Jeong-Ju;Cho, Ju-Sik
    • Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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    • v.50 no.4
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    • pp.259-274
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    • 2017
  • To get some informations for sustainable paddy use, the productivities of soils with two years of cropping systems were estimated through pot experiment using two pretreated groups of not autoclaved 'natural'- and 'autoclaved'-soils without any fertilization. And then the relationship between the productivities, called yield potentials, and the characteristics of soils as affected by cropping systems, such as rice-rice (R-R), ricebarley-rice-barley (R-B-R-B), rice-barley-rice-wheat (R-B-R-W), soybean-barley-soybean-barley (S-B-S-B), of which barley and wheat were composted at a level of $10MT\;ha^{-1}$, and S-B-S-B without compost, was analyzed. These treatments were established in mid-mountainous loam paddy, which contained exchangeable Ca of $11.8cmol_c\;kg^{-1}$, located at the altitude of 285 m above sea level in Sangju of Korea. Crops for the estimation of soil productivity were rice cv. 'Seolemi' and soybean cv. 'Chamol'. As a result, under the natural soils condition, rice grain and straw were highly produced in composted S-B-S-B soils (p < 0.05) and lowly in R-R soils (p < 0.05). While soybean grain and stem were higher in R-R soils (p < 0.05) than other soils which not significantly different each other. In case of autoclaved soils, the yield potentials of rice and soybean were high together in either composted R-B-R-B/W or S-B-S-B soils compared to R-R and uncomposted S-B-S-B soils (p < 0.05). In especial, these yield potentials under the natural soils condition were commonly influenced by soil porosity showing negative correlation for rice (p < 0.01); positive for soybean (p < 0.05). And the porosity possibly reversed even the symbiotic contribution of indigenous Bradyrhizobium japonicum for soybean. Under autoclaved soils condition the potentials of rice and soybean showed negative correlations with soil C:N ratio (p < 0.05) similarly to the case of rice in the natural soils.

Regulation properties of phospholipase C$\delta$ cloned from Misgurnus mizolepis

  • Kim, Na-Young;Ahn, Sang-Jung;Jeon, Soo-Jin;Seo, Jung-Soo;Kim, Moo-Sang;Lee, Sang-Hwan;Je, Ju-Eun;Sung, Ji-Hea;Lee, Hyung-Ho;Lee, June-Woo;Chung, Joon-Ki
    • Journal of fish pathology
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    • v.20 no.2
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    • pp.119-127
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    • 2007
  • Phosphoinositide-specific phospholipase Cδ (PLCδ) plays an important role in many cellular responses and is involved in the production of second messenger. The present study was conducted to characterize the catalytic and regulatory properties of the PLCδ of Misgurnus mizolepis (ML-PLCδ). The ML-PLCδ gene was cloned and expressed under according to the method of the previous report (Kim et al., 2004), and its recombinant protein was purified by successive chromatography using Ni2+-NTA affinity column. The recombinant ML-PLCδ showed a concentration-dependent PLC activity to phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) or phosphatidylinositol (PI). Its activity was absolutely Ca2+-dependence, which was similar to mammalian PLCδ isozymes. The Ca2+ concentration yielding maximal activation of ML-PLCδ was 100 μM. However, the activity was decreased interestingly by a polyamine, such as spermine and spermidine. In vitro assay using cholate-micelle cell, ML-PLCδ activity was inhibited in dose-dependent manner by sphinogosine but increased by phosphocholine . In the lipid-binding assay, ML-PLCδ was strongly bound to LPA, PI(3)P, PI(4)P, PI(5)P, PI(3,5)P2, PI(4,5)P2, PI(3,4,5)P3 and PA, but it showed the low affinity to S1P, PI(3,4)P2 and PS. Taken together our results, it is suggested that the general catalytic and regulatory properties of ML-PLCδ are similar with those of mammalian PLCδ1 isozymes, but the N-terminal extended piscine phospholipase Cδ1 (ML-PLCδ) might reflect some distinctions in regulatory properties and inositol-lipid binding specificity between piscine ML-PLCδ and mammalian PLCδ isozymes.

Cloning and Overexpression of a Paenibacillus ${\beta}-Glucanase$ in Pichia pastoris: Purification and Characterization of the Recombinant Enzyme

  • Yang, Peilong;Shi, Pengjun;Wang, Yaru;Bai, Yingguo;Meng, Kun;Luo, Huiying;Yuan, Tiezheng;Yao, Bin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • v.17 no.1
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    • pp.58-66
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    • 2007
  • Isolation, expression, and characterization of a novel $endo-{\beta}-1,3(4)-D-glucanase$ with high specific activity and homology to Bacillus lichenases is described. One clone was screened from a genomic library of Paenibacillus sp. F-40, using lichenan-containing plates. The nucleotide sequence of the clone contains an ORF consisting of 717 nucleotides, encoding a ${\beta}-glucanase$ protein of 238 amino acids and 26 residues of a putative signal peptide at its N-terminus. The amino acid sequence showed the highest similarity of 87% to other ${\beta}-1,3-1,4-glucanases$ of Bacillus. The gene fragment Bg1 containing the mature glucanase protein was expressed in Pichia pastoris at high expression level in a 3-1 high-cell-density fermenter. The purified recombinant enzyme Bg1 showed activity against barley ${\beta}-glucan$, lichenan, and laminarin. The gene encodes an $endo-{\beta}-1,3(4)-D-glucanase$ (E. C. 3.2.1.6). When lichenan was used as substrate, the optimal pH was 6.5, and the optimal temperature was $60^{\circ}C$. The $K_m,\;V_{max},\;and\;k_{cat}$ values for lichenan are 2.96mg/ml, $6,951{\mu}mol/min{\cdot}mg,\;and\;3,131s^{-1}$, respectively. For barley ${\beta}-glucan$ the values are 3.73mg/ml, $8,939{\mu}mol/min{\cdot}mg,\;and\;4,026s^{-1}$, respectively. The recombinant Bg1 had resistance to pepsin and trypsin. Other features of recombinant Bg1 including temperature and pH stability, and sensitivity to some metal ions and chemical reagents were also characterized.