We determined the prevalence of feline hemotropic mycoplasma species including 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', Mycoplasma haemofelis, and 'Candidatus Mycoplasma turicensis' in naturally infected feral cats in Jeonju, Korea. Forty six feral cats were evaluated by PCR assay targeting the 16S rRNA gene sequence. Nine cats (19.6%) were positive for 'Candidatus Mycoplasma haemominutum', 2 cats (4.3%) were positive for 'Mycoplasm a haemofelis', and 1 cat (2.2%) was infected with both 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' and Mycoplasma haemofelis. 'Candidatus Mycoplasma turicensis' was undetected. Partial 16S rRNA gene sequences of Mycoplasma haemofelis were closely (> 96%) related to those from other countries. The amplification of hemoplasma DNA in these samples confirmed the presence of 'Candidatus M. haemominutum' and M. haemofelis in Korea.
Mycoplasma is well recognized as one of the most prevalent and serious microbial contaminants of biologic manufacturing processes. Conventional methods for mycoplasma testing, direct culture method and indirect indicator cell culture method, are lengthy, costly and less sensitive to noncultivable species. In this report, we describe a new TaqMan probe-based real-time PCR method for rapid and quantitative detection of mycoplasma contamination during manufacture of biologics. Universal mycoplasma primers were used for mycoplasma PCR and mycoplasma DNA was quantified by use of a specific TaqMan probe. Specificity, sensitivity, and robustness of the real-time PCR method was validated according to the European Pharmacopoeia. The validation results met required criteria to justify its use as a replacement for the culture method. The established real-time PCR assay was successfully applied to the detection of mycoplasma from human keratinocyte and mesenchymal stem cell as well as Vero cell lines artificially infected with mycoplasma. The overall results indicated that this rapid, specific, sensitive, and robust assay can be reliably used for quantitative detection of mycoplasma contamination during manufacture of biologics.
Nah, Kyu Min;Kang, Eun Kyeong;Kang, Hee;Park, Yang;Koh, Young Yull
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.45
no.10
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pp.1227-1233
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2002
Purpose : Several studies have shown that increases of eosinophil markers are common findings of asthma and Mycoplasma pneumoniae infection, and eosinophil markers reflect the clinical stage of asthma. The purpose of this study was to investigate the change of eosinophil markers according to the clinical stage of Mycoplasma pneumonia. Methods : The patient group consisted of 33 outpatient children with Mycoplasma pneumonia. Peripheral blood total eosinophil count(TEC) and serum eosinophilic cationic protein(ECP) level were measured at both acute and recovery stages and were compared between both stages. The patient group was subdivided into the wheezing(n=16) and the nonwheezing group(n=17), and the TECs and the ECPs of one group were compared with those of the other group. The correlation between Mycoplasma antibody titer and the eosinophil markers of acute stage were analyzed. Results : In the whole patient group, the TECs and the ECPs of the acute stage were significantly higher than those of the recovery stage(P=0.018, P=0.005), but there were no differences in the TEC and the ECP between the wheezing and the nonwheezing group. In the wheezing group, there were no significant differences in the TEC and the ECP between acute and recovery stages. There were no correlations between acute stage Mycoplasma antibody titer and the eosinophil markers. Conclusion : Eosinophil markers reflect the clinical stage of Mycoplasma pneumonia and eosinophilic inflammations may continue even after the acute stage in wheezing patients with Mycoplasma pneumonia.
동물 실험과 환자에서 M. fermentans 감염은 염증반응을 동반하거나 하지 않으며, 병변이 나타나지 않은 것에서부터 전격성 감염에 이르기까지 다양하다. 이와 같은 현상이 나타나는 것은 두 가지 기전 중에 어느 하나 일 것으로 Lo등과 Montagnier 등은 추정하고 있다. Mycoplasma 감염이 숙주의 면역기구의 주된 성분에 손상을 주거나, 이 병원체가 감염된 숙주의 면역감시기구를 피할 수 있는 특수한 생물학적 특성을 가지는 것이다. AIDS관련 mycoplasma 감염의 가능한 역할은 첫째 mycoplasma는 AIDS환자나 면역 기능부전인 사람에서 단순한 기회적감염이거나, 둘째 M. fermentans나 M. penetrans와 같은 mycoplasma의 감염은 HIV-1과 같은 virus의 병원성을 증강시켜주거나, 셋째 mycoplasma가 숙주의 면역성을 저하시키는 병원성일 가능성을 가지고 있다.
Cheon, Kyoung Whoon;Kang, Won Sik;Son, Byeong Hee;Kim, Sung Won
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.45
no.5
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pp.673-678
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2002
Mycoplasma pneumoniae is the most common pathogen of the respiratory tract among schoolaged children and young adults. The incidence of CNS complication is reported as 0.1-7% of Mycoplasma pneumoniae infections. We experienced a case of cerebral infarction complicated by Mycoplasma pneumoniae, and reviewed the literature about the CNS complication of Mycoplasma pneumoniae infection.
We evaluated the PCR assay and two commercialized PCR kits for the detection of mycoplasma in veterinary via live vaccines. The PCR assay could specifically detect all the tested Mycoplasma spp. and Acholeplasma spp., whereas two commercialized PCR kits did not. Also, the specificity of the PCR assay showed that 4 reference strains and 7 field isolates belonging to avian mycoplasma species could be all detected. The sensitivity of the PCR assay was determined using pure cultured Mycoplasma spp. and Acholeplasma spp. with a range of 1 to 100 colony forming units/ml in 9 CFR Mycoplasma broth. To test the availability of the PCR assay for veterinary live viral vaccines, A. laidlawii was artificially inoculated into the swine transmissible gastroenteritis-rota virus combined vaccine and canine parvovirus vaccine, respectively and the sensitivity of the PCR assay was similar with the result of cultured samples. In this study, the PCR assays could be used as rapid and sensitive methods for the detection of mycoplasma in veterinary live viral vaccines.
Two cats were obtained from a cat kennel. Over the previous 7 days, the cats had shown cough, anorexia, depression and nasal discharge. In this study, the consensus PCR was able to detect successfully Mycoplasma species in nasal swab samples of the cats. To identify feline mycoplasma species from the lung tissue of the cats with pneumonia, Mycoplasma species-specific PCR reactions were conducted. As the results, we could identify M. felis by the positive amplified DNAs. On the other hand, we could not detect any positive reactions with the PCR reaction for M. arginini, M. canis, M. edwardii, M. cynos, M. gateae, M. maculosum, M. molared, M. opalescens, M. spumans and Mycoplasma HRC-689. In conclusion, we detected M. felis from the kenneled cats with pneumonia. We suggested that this consensus PCR would be useful and effective for monitoring Mycoplasma species in various kinds of animals including cats. The application of preceding consensus PCR before the species-specific PCRs may be the most recommended strategy for the identification of Mycoplasma spp.
The economic impact of swine mycoplasma infection is high. An accurate diagnosis is often difficult and time consuming. We report the development and validation of an effective multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay that detects Mycoplasma (M.) hyopneumoniae and M. hyorhinis. The multi detection of M. hyopneumoniae and M. hyorhinis primer set were employed to detect mycoplasma species and typing of the species was performed on the basis of sequence analysis of the PCR product. The target nucleic acid fragments were specifically amplified by M. hyopneumoniae and M. hyorhinis PCR with 16S ribosomal DNA primers. Single and mixed Mycoplasma species DNA templates were used to evaluate the specificity of the multiplex assay. The corresponding specific DNA products were amplified for each pathogen. The multiplex PCR assay provides a novel tool for simultaneous detection and differentiation of M. hyopneumoniae and M. hyorhinis.
Mycoplasmas are highly fastidious bacteria, difficult to culture and slow growing. Infections with Mycoplasma species can cause a variety of problems in living organisms and in vitro cell cultures. In this study, we investigated the usefulness of a genus-specific consensus PCR analysis method to detect Mycoplasma species. The developed consensus primer pairs MycoF and MycoR were designed specifically to amplify the 16S ribosomal RNA gene (rRNA) of Mycoplasma species by the optimized PCR system. The developed consensus PCR system effectively amplified 215 bp of Mycoplasma genus-specific region of 16S rRNA. In conclusion, we recommend this consensus PCR for monitoring Mycoplasma species in animals, human and cell culture system.
Approximately, 15-20% of all cancers worldwide are caused by infectious agents. Understanding the role of infectious agents on cancer development might be useful for developing new approaches to its prevention. Mycoplasma genitalium is a clinically important sexually transmitted pathogen that has been associated with several human diseases. There have been a few studies suggestive of probable roles of Mycoplasma genitalium in cancer development, including prostate and ovarian cancers and lymphomas, but the role of this microorganism like other Mycoplasma species in neoplasia is still conjectural. Considering the prevalence of Mycoplasma genitalium infections and also the emergence of resistant strains, Mycoplasma genitalium needs more attention in the infectious agent cancer-causing research area.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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