Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1994.06a
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pp.27-49
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1994
Root colonization of biocontrol agents via seed treatment was investigated and a compatible combination, Gliocladium virens G872B and Pseudomonas putida Pf3, in colonizing cucumber rhizosphere was confirmed through the study. Much higher number of fungal and bacterial propagules were detected when two isolates were inoculated together. The presence of Pf3 in root system was greatly helpful to G872B to colonize at root tip. The mechanism of this phenomenon is partially elucidated through the results of in vitro experiments and the observations of scanning electron and fluorescence microscope. Addition of Pf3 cells resulted earlier germination of G872B conidia and increased mycelial growth. And the more number of germinated conidia on seed coat, the more vigorous hypal streching and sporulation on the root surface were observed in coinoculated treatment. The propagules of G872B on the cucumber root when they were challenged against the pathogenic Fusarium oxysporum, were even higher than that of G872B treated alone, and the magnitude of such a difference was getting grater toward the root ip and the population of F. oxysporum on the root was reduced by seed inoculation of G872B. The rhizosphere competence was obviously reflected to disease suppression and plant growth promotion that induced by the given isolate. Green house experiments revealed that the combined treatment provided long-term disease suppression with greater rate and the larger amount of fruit yield than single treatments. Through this study the low temperature growing Pseudomonas fluorescens M45 and MC07 were evaluated to apply them to the winter crops in field or plastic film house. In vitro tests reveal that M45 and MC07 inhibited the mycelial growth of Pythium ultimum, Rhizoctona solani and Phytophthora capsici and enhanced growth of cucumber cotyledon in MS agar. This effect was more pronounced when the bacteria were incubated at 14$^{\circ}C$ than at 27$^{\circ}C$. And disease suppression and plant growth promotion in green house were also superior at low temperature condition. Seed treatment of M45 or soil treatment of MC07 brought successful control of damping-off and enhanced seedling growth of cucumber. The combined treatment of two isolates was more effective than any single treatment.
A destructive stem rot of wild aster(Aster koraiensis) occurred sporadically some farmers' fields in Guman-myon, Kosonggun, Kyongsangnam-do in 2000. One of the most severely infected field in Kosong showed 28.6 percent of infection rate. The fungus also caused stem or crown rot and systemic wilt or blight of the plants. White mycelium spread over stems and petioles of infected plants and sclerotia formed on the old lesions and near the soil surface. The fungus showed maximum mycelial growth around $30^{\circ}C$ and did not grow under $5^{\circ}C$ and over $45^{\circ}C$ and mycelial width were $4.3{\sim}10.2{\mu}m$. Colony was white, usually many narrow mycelial stand in the aerial mycelium and formed clamp connection. Numerous sclerotia were formed on PDA at $30^{\circ}C$. The shape sclerotia were globoid and $0.8{\sim}3.0{\times}0.9{\sim}3.4$ mm in size. The fungus was isolated repeatedly from the infected tissues and confirmed its pathogenecity to wild aster and identified as Sclerotium rolfsii. This is the first report on the stem rot of wild aster caused by S. rolfsii in Korea.
In disease surveys from 1986 ti 1998, disease incidence of tobacco black shank was gradually increased in burley tobacco from 1996. To study the causes of the disease occurrence, one hundred and fourteen isolates of Phytophthora parasitica var. nicotianae (Ppn) were collected from burley tobacco-growing areas in the southern part of Korea during 1996-1997, and tested in vitro for meatlaxyl sensitivity which was determined by measuring the mycelial growth on corn meal agar (CMA) amended with metalaxyl. Of the tested isolates, 78.1% showed sensitive to metalaxyl, having $\textrm{ED}_{50}$ values less than 1.0 $\mu\textrm{g}/$\textrm{ml}, while 1.7% was resistant weth $\textrm{ED}_{50}$ greater than 100 $\mu\textrm{g}/$\textrm{ml}. Ppn isolates from three provinces, Chungnam, Chonbuk and Chonnam showed similar distributions of metalaxyl sensitivity. Metalaxyl-resistant isolates were not significantly different from metalaxyl-sensitive ones in mycelial growth rate, chlamydospore formation capacity and size of the spore, and pathogenicity on tobacco plant (cv. Burley 21). These results suggest that the metalaxyl-resistant Ppn in burley tobacco may be one of the major factors to cause the higher occurrence of the tobacco black shank in the burley tobacco-growing area.
The infection rate of soybean black root rot disease caused by Calonectria crotalariae was about $14\%$. The isolated fungi from the infected soybean roots and stems were Calonectria crotalariae, Fusarium solani, F. roseum, Phomopsis sojae, Pythium aphanidermatum, Rhizoctonia solani and Macrophomina sp. Among them, C. crotalariae was the most virulent pathogen under the laboratory conditions. Mycelial growth and microsclerotial formation were good on PSA containing 1000cc of water, 100g of potato and 20g of sugar. Mycelial growth, sporulation and microsclerotial formation were good on sterilized root. Perithecial formation was better in the dark condition than in the light. Survival of macroconidia was not available between $0\~25\%$ soil water content. Microsclerotia and mycelium in infected plant debris were survived for 4 months at to $8\%\;50\%$ soil water content. The plant height, when inoculated with $1.2\%$ inoculum density, reached approximately half of uninoculated plants. Disease severity was much higher at nonsterilized soil than completely sterilized soil. It was determined that the host range of this pathogen includes soybean, peanut, green bean and red bean.
Fruit bodies similar to the Phellinus sp. residing on the mulberry were collected at Yang-yang in Kang-won-do province and one strain of Phellinus sp. was isolated from the fruit bodies. For mass production of the isolated mycelia in a submerged culture, the culture conditions, medium composition, and the effect of various culture systems on the mycelial growth, were investigated. The morphological characteristics of the fruit body were as follows: covered with blackish to black and rough, lower surface with yellowish-brown to dull-brown and smooth, 5-7 cm thick and hard woody. Also, the pure cultured mycelia showed yellowish-brown color, capability of purplish-brown pigment production on the PDA plate media, no-formation of clamp-connection, much binding branch, and enzyme activities such as laccase, tyrosinase and peroxidase. Therefore, pure cultured strain was identified to be Phellinus sp. In the flask culture, the optimum culture conditions for the mycelial production were obtained after cultivation of 8 days at inoculum level of 5%(v/v), media volume of 70 mL, 150 rpm, initial pH 6, and temperature of $30^{\circ}C$. Optimum medium composition from the response surface analysis were determined to be glucose 12.12 g/L, sucrose 12.12 g/L, yeast extract 11.15 g/L, malt extract 11.15 g/L, $KH_2PO_4$ 0.855 g/L and $CaCl_2$ 0.855 g/L. The production of the mycelia after 4 and 8 days of cultivation was 1.95 and 9.89 g/L, respectively. The maximum specific growth rate and productivity were $0.020\;hr^{-1}$ and 1.25 g/L/day, respectively. Among the three different culture systems for the growth of mycelia, the maximum mycelial dry weight of 7.5 g/L was obtained after cultivation of 4 days in the air-lift fermentor under aeration rate of 2.5 vvm. The maximum specific growth rate and productivity were $0.033\;hr^{-1}$ and 1.9 g/L/day, respectively, which were about 1.7 and 4.2 times higher than those of flask culture.
Kim, Yong-Ki;Kwon, Mi-Kyung;Cho, Weon-Dae;Kim, Tack-Soo;Shim, Hong-Sik;Lee, Yong-Hwon;Lee, Chan-Jung;Lee, Seong-Chan
Research in Plant Disease
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v.10
no.2
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pp.105-111
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2004
Mycelial growth and days required for sclerotial formation(DRSF) in vitro, and disease incidence of infected plants in the field were investigated to evaluate disease resistance of nine garlic cultivars against two species of Sclerotium causing garlic white rot. There were differences among mycelial growth and sclerotial formation of two white rot pathogens on different garlic cultivars in vitro. Mycelial growth showed the highest level on the clove of 'Daeseo'. Sclerotia of two white rot pathogen were formed the earliest on the clove of 'Kodang' and the latest on the clove of 'Namdo'. In field trial all of nine garlic cultivars were highly susceptible to Sclerotium cepivorum and cold-type garlics were less susceptible than warm-type garlics. Meanwhile garlic cultivars used showed differences among resistant responses to Sclerotium sp., forming large sclerotia. All of warm-type garlics showed highly susceptible response, but three cold-type garlics, 'Seosan', 'Danyang' and 'Yechon' showed moderate resistant response and 'Euisung' showed resistant response. To evaluate cultivar resistance of garlics quantitatively disease progress curve was transformed as linear regression equation. Among the intercept (early disease incidence) and the slope (disease infection rate) obtained from the transformed equation, final disease incidence, and area under disease progress curve(AUDPC), AUDPC was the most effective to evaluate disease resistance of garlics to both of white rot pathogens. There was little correlation between mycelial growth and sclerotial formation on garlic cloves in vitro, and epidemiological parameters (early disease incidence, final disease incidence, disease infection rate, AUDPC) obtained from the field trial. Mycelial growth of S. cepivorum was positively correlated with final disease incidence and disease infection rate obtained from the field trial, meanwhile DRSF was negatively correlated with the epidemiological parameters.
In vitro experiments, several fungicides including prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 85% inhibition of mycelial growth of Pestalotiopsis theae (SP-3). Dichlofluanid and chlorothalonil inhibited mycelial growth at the rate of 10 and 33%, however benomyl did not inhibit mycelial growth of the fungus. Minimum inhibitory concentration(MICs) of iminictadine-triacetate on the mycelial growth of SP-3 isolate was $10{\mu}g/m{\ell}$, but that of P. theae $\underline{MAFF}$ 752002 and P. longiseta $\underline{MAFF}$ 752001 was $1{\mu}g/m{\ell}$. MIC of benomyl, chlorothalonil, dichlorofluanid was $1,000{\mu}g/m{\ell}$, and that of fludioxonil, fluazinam, tebuconazole was $10{\mu}g/m{\ell}$. Conidial germination was inhibited more than 80% in tile medium which contained $1{\mu}g/m{\ell}$ of prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and minoctadine-triacetate. Control values of benomyl, chlorothalonil and dichlofluanid were 40, 60 and 30%, respectively. The controlling effect of iminoctadine-triacetate ($10{\mu}g/m{\ell}$) aganist P. theae (SP-3) in leaf disc test was more than 93%, but benomyl and dichlofluanid could not control leaf blight disease caused by P. theae (SP-3). Tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 94% of protective and curative effect of leaf blight of sweet persimmon, while, benomyl and dichlofluanid did not show any control effect of the disease.
This study was carried out to investigate the mycelial growth and density of Laos oyster mushroom treated straw, rice hull, mixture rate of straw and rice hull and beer wastes respectively. In case of straw 70%, rice hull 40%, 50%, straw and rice hull 4 : 6, soil type and yeast type of Laos beer wastes mixture, the mycelial growth and density are the best respectively.
This study was conducted to develop an integrated disease management system against large patch disease. Attempts were made to estimate the effect of calcium hydroxide, silicate fertilizer and urea on the mycelial growth of Rhizoctonia sotani AG2-2 and the development of large patch in vitro and in vivo and to establish the most promising combination of fertilizer, fungicide and antagonistic microbes. 1.The mycelial growth of Rhizoctonia sotani AG2-2 were completely inhibited at 2,000, 1,000 and 3,000ppm concentration by calcium hydroxide, silicate fertilizer and urea, respectively. Inhibition effect of silicate fertilizer was the highest, but that of urea was the lowest compared with other treatments. 2.Treatment of calcium hydroxide at rate of l00g /$m^2$ was the most effective, and control effect appeared from 30 days after treatment in spring, which was better in autumn than in spring. Silicate fertilizer treated at rate of l00g /$m^2$, 200g /m$^2$, in spring and 50g /$m^2$ in autumn were very effective. Urea at rate of 30g /$m^2$ was more effective than 60g /m$^2$ and 120g /m$^2$. 3.The efficacies of mepronil and toclofos-methyl, applied twice in spring and once in autumn, were 83.8% in spring, which persisted to 70% in autumn compared with untreated plot. 4.The efficacies of Trichoderma harzianum were the highest by 55% in spring, but those of Bacillus amyloliquefaciens BL-3 and Peudomonas putida were the highest by 80% in autumn among other antagonists tested, when two organisms were applied twice in spring and once in autumn.
This study was carried out to obtain data concerning the genetic variability of Pleurotus ostreatus. Monospores of P. ostreatus were isolated and cultured to estimate differences in the rate of mycelial growth and genetic similarity among the isolates. Although the overall growth rates were slow compared to their parental dikaryon except 2-MI 4, significant differences in the rate of mycelial growth were observed among isolates. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis using twenty six random primers showed 345 polymorphic DNA bands from 35 monospore isolates and their parental dikaryon. DNA bands ranged from 0.1 to 4.0 Kb in size. Most various polymorphic DNA bands within monospore isolates were obtained when we used J (OPA-01) or W (OPB-04). The 36-MI 103 showed totally different band patterns from those of the others. RAPD analysis revealed that there is approximatly 75% genetic similarity between monospore isolates and their parental dikaryon except 36-MI 103, which showed only 49% genetic similarity. In addition, genetic similarity degrees were classified into four groups: I (parental dikaryon), II (fast growing type), III (moderate growing type), and IV (slow growing type). However, there is no correlation between mating type and mycelial growth rates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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