Kim, Jae-Deok;Kim, Young-Sook;Kwak, Hwa-Sook;Kim, Hye-Jin;Lee, Youn-Me;Ko, Young-Kwan;Park, Kee-Woong;Choi, Jung-Sup
Weed & Turfgrass Science
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v.7
no.3
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pp.219-229
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2018
We isolated Streptomyces scopuliridis KR-001 that produced herbicidal active metabolite(s) against several grass and broad leaf weeds. In this study, potential as natural herbicide of mutant N-29 broth filtrate of S. scopuliridis KR-001 was investigated to Ambrosia artemisiifilia in a greenhouse and field condition. The broth filtrate of mutant N-29 by foliar application showed a strong herbicidal activity to A. artemisiifilia with leaf stage in a greenhouse condition. Also, field trial of foliar application within treatment range had effectively controlled with early and middle stage of A. artemisiifilia at the natural habitats. Phytotoxic symptoms of mutant N-29 broth filtrate by foliar application were wilting and discoloration, and burn-down of leaves and finally plant death. These results suggest that mutant N-29 broth filtrate is considered possible as a natural herbicide for controlling environmentally friend to invasive alien plant such as A. artemisiifilia and may provide a new lead molecule for a more efficient herbicide.
The neutralization epitopes of the outer capsid protein VP4 of a porcine rotavirus, Gottfried strain, were studied using neutralizing monocolonal antibodies(N-MAbs). Eight N-MAbs which are specific for the VP4 of Gottfried strain were used for analyzing the antigenic sites of VP4. Three different approaches were used for this analysis; i)testing the serological reactivity of each N-MAb against different G and P types of human and animal rotavirusese ii) analyzing N-MAb-resistant viral escape mutants and iii) performing nucleotide sequence analysis of the VP4 gene of each N-MAb-resistant viral escape mutant. From experimental results, at least four antigenic sites(I, II, III, and IV) were identified. Antigenic site I recognized by N-MAbs 24B9, 23G10, and 26A2 was separated from antigenic site II recognized by N-MAbs 30H5, 32B3, and 29B3. However, these antigenic sites were overlapped with antigenic site III recognized by N-MAb 21A1. The other antigenic site IV recognized by N-MAb 16D2 was separated from antigenic sites I, II, and III.
To assess the potential as biofortified rice varieties, new endosperm and grain mutant lines were selected from $M_4$ generation seeds of the rice cultivar Shindongjin, which were either $\gamma$-irradiated or treated with N-methyl-N-nitrosourea(MNU) and lipid, sugar, and tocopherol content were analyzed. Amylose content in non-waxy mutants ranged from 8.8% in SM-4, a dull-type mutant, to 29.5% in SM-51, compared to 18.9% in the parental variety, Shindongjin. SM-23, a floury-type mutant, contained 0.09 ${\mu}g/g$$\alpha$-tocopherol(40.9% of total tocopherol), was three times higher than in the parental variety. SM-32, a giant embryo-type mutant, had a 2.2-fold higher total tocopherol content, 2.1-fold higher $\alpha$-tocopherol, and 5.5-fold higher $\delta$-tocopherol content(47.3% of total tocopherol) than the parental variety(0.13 ${\mu}g/g$). Total free sugar content was elevated in all selected mutants and 1.2-8.6 times higher than in the parental variety(11.38 ${\mu}g/g$). These increased sugar levels were due to increase in sucrose concentration. SM-23(floury-type mutant) and SM-51(high amylose-type mutant) had 4.6 and 7.0 times more sugar, respectively, than the parental variety(11.38 ${\mu}g/g$). With relatively high concentrations, most mutants showed elevated fatty acid content in the SM 32(giant embryo-type) and SM-51(high amylose-type) mutants, at 124.56 and 89.59 mg/g, respectively. All selected mutants displayed valuable characteristics for the development of new varieties in rice-breeding programs.
The mutant enzymes of N-carbamyl-D-amino aicd amidohydrolase (N-carbamylase) from Agrobacterium radiobacter NRRL B11291, showing a negligible activity, were selected from the library generated by random mutagenesis. From the sequence analysis, these mutants were found to contain the amino acids substitutions at Cys172, Glu47, and Glu146. Previously, Cys172 was reported to be necessary for the enzyme catalysis. The chemical modification of the N-carbamylase by carboxyl group specific chemical reagent, 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide(EDC), resulted in a loss of activity. The replacement of glutamic acids with glutamines by site-directed mutagenesis led to aggregation of the enzymes. Mutant enzymes fused with maltose binding protein (MBP) were expressed in soluble form, but were inactive. These results indicate that two glutamic acid residues play an important role in structure and function of the N-carbamylase. Multiple sequence alignment of the related enzymes revealed that Glu47 and Glu146 are rigidly conserved, which suggests that tese residues are crucial for the structure and function of the functionally related C-N hydrolases.
Mutational experiments were performed to imporve the cellulase productivity of Aspergillus phoenicis KU175, isolated from the southern part of Korea, as a high cellulase producer. By treatment ultra-violet light nad 4-NQO(4-Nitroquinoline-N-Oxide), mutation waas induced, and treatment ultra-violet light and 4-NQO (4-Nitroquinoline-N-Oxide), mutation was induced, and A.phoenicis KU175-115 was finally selected for its highest avicelase production. Avicelase production of the mutant was increased about 2 times compared with those of the wild strain. However, activities of other hydrolytic enzymes, such as amylase, protease and nuclease, of the mutant strain didn't show a marked difference compared with those of the nuclease, of the mutant strain didn't show a marked difference compared with the wild strain, except slight increase in ribonuclease activity and slight decrease in glucoamylase activity. Avicelases from the mutant strain selected were purified from wheat bran culture by successive salting out, followed by dialysis and column chromatography, and their charcteristics were compared with thosw of the wild strain. Avicelase was separated into three peaks in the mutant strain as well as in the case of wild strain. Avicelase II activity of the mutant strain was prominently higher than that of the wild strain, while avicelase I and III activities of those were equivalent. The optimal pH ranges and stability of avicelase II from the mutant strain were pH4-5 and pH3.5-6.0, respectively, as well as in the case of the wild strain. The optimal temperature and thermal stability of avicelase II from the mutant strain were $40{\sim}50^{\circ}C\;and\;20{\sim}55^{\circ}C$, respectively. These results were same as those of the wild strain. By the using of Eadie-Hofastee plot, $K_m\;and\;V_{max}$ of avicelase II from the mutant and the wild strain were calculated to be 2.29mg/ml and $4.84{\mu}g$ reducing sugar as glucose per min equally, from the line fitted to the data by the least square method. Activity of avicelase II from the mutant strain was slightly activated by $Mg^{++}\;but\;inhibited\;by\;Cu^{++}, \;Mn^{++}\;and\;Zn^{++}$, as well as in the case of the wild strain. Therefore, it was concluded that the mutant didn't induce the formation of another avicelase isozyme, or the changes in the properties of avicelase, but induce the changes in the productively of the same avicelase II by the action of regulatory gane.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.6
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pp.987-994
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2000
Aspergillus coreanus NR 15-1, Asp. oryzae NR 15-3 and Asp. oryzae NR 2-5 isolated from traditional Korean nuruk were screened as parental strains producing starch hydrolyzing enzymes. They were mutagenized by N-methyl -N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and mutants were isolated for analysis of various amylase activities and the ability of acid production. Among them, the mutants harboring high saccharogenic activity, dextrinogenic activity, and the ability of acid production were selected. Fifteen, six, and five strains of mutants were isolated from Asp. coreanus NR 15-1, Asp. oryzae NR 2-5, and Asp. oryzae NR 15-3, respectively followed by NTG mutagenesis. Among these mutants, thirteen strains were identified as auxotrophic mutants. \ulcorner (Arg. ̄) mutant from Asp. coreanus NR 15-1 showed high glucoamylase activity and total acid productivity. Z6 (Ade. ̄) mutant from Asp. oryzae NR 2-5 showed the highest $\alpha$-amylase activity, therefore \ulcorner and Z6 mutant were selected.
The mutant strain M6 derived from Acetobacter sp. A9, which produces high levels of the bacterial cellulose derived by random mutagenesis with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine or UV treatment, was selected by a Hestrin and Schramm medium (HSB) plate assay. The characterization of the cellulose production was studied in flask culture to improve the productivity of bacterial cellulose by $Acetobacter$ sp. A9 and mutant strain M6. The yield of cellulose production was superior to mutant M6 than $Acetobacter$ sp. A9. Cellulose was produced 0.12 g $L^{-1}$ by $Acetobacter$ sp. A9 at HS medium and the mutant M6 produced the cellulose 6.95 g $L^{-1}$at HS medium. Strain M6 produced less amount of gluconic acid than A9, thus showing that cellulose production is negatively relted with the gluconic acid production.
Mutant mouse which show dwarfism has been developed by N-ethyl-N-nitrosourea (ENU) mutagenesis using BALB/c mice. The mutant mouse was inherited as autosomal recessive trait and named Small Body Size (SBS) mouse. The phenotype of SBS mouse was not apparent at birth, but it was possible to distinguish mutant phenotype from normal mice 1 week after birth. In this study, we examined body weight changes and bone mineral density (BMD), and we also carried out genetic linkage analysis to map the causative gene(s) of SBS mouse. Body weight changes were observed from birth to 14 weeks of age in both affected (n = 30) and normal mice (n = 24). BMD was examined in each five SBS and normal mice between 3 and 6 weeks of age, respectively. For the linkage analysis, we produced backcross progeny [(SBS${\times}$C57BL/6J) $F_1{\times}$ SBS] $N_2$ mice (n = 142), and seventy-four microsatellite markers were used for primary linkage analysis. Body weight of affected mice was consistently lower than that of the normal mice, and was 43.7% less than that of normal mice at 3 weeks of age (P < 0.001). As compared with normal mice at 3 and 6 weeks of age, BMD of the SBS mice was significantly low. The results showed 15.5% and 14.1 % lower in total body BMD, 15.3% and 8.7% lower in forearm BMD, and 29.7% and 20.1% lower in femur BMD, respectively. The causative gene was mapped on chromosome 10. The map order and the distance between markers were D10Mit248 - 2.1 cM - D10Mit51 - 4.2 cM - sbs - 0.7 cM - D10Mit283 - 1.4cM - D10Mit106 - 11.2cM - D10Mit170.
This study was carried out to compare the pattern of mutant variation and to evaluate the characteristics of mutants obtained by gamma irradiation in rose 'Kardinal'. Forty four rooted cuttings of 'Kardinal' were irradiated at 70 Gy gamma-ray dose from a $^{60}Co$ source to induce mutants in 2002. The irradiated plants were planted in field, and observed spotting of petal color mutants from 2002 to 2004. Four different kinds of mutant twigs with each different color flower were obtained from the irradiated 'Kardinal' with red petal. After being identified to be a stable mutant from 2004 to 2008, each mutant line propagated by cutting was hydroponic-cultured to evaluate the characteristics in the greenhouse from 2008 to 2009. Four mutant lines obtained from 'Kardinal' with red petal (Red group, 44A, 45B) include KA1 with light pink petal (Red group, 55B-55D), KA2 with pink petal (Red group, 63A-63B), KA3 with deep pink (Red purple, N57A-N57C), and KA4 with orange red (Red group, 43A-43B). Diameters of each flower in four mutant lines were different from 'Kardinal'. The line KA1 was 9.5 cm wide, and it showed the smallest diameter when compared to other mutants. While the line KA2 was the largest one with 12.5 cm 'Kardinal'. Petal number per flower was also variable among the mutants. The line KA2 had 39.8 petals being the largest number among the mutants, while the line KA1 was the lowest one compared to 35.5 petals of 'Kardinal'. Petal color was measured by using colorimeter. Brightness (L) measured at each petal of four mutants increased more than 'Kardinal'. CIE Lab values, a and b decreased more than 'Kardinal' at the petal color of three mutants except the line KA4. Characteristics of shoot, leaf, etc. from four mutants were also different from the ones of 'Kardinal'. The line KA1 was shortest in shoot, node and peduncle length, and lowest in prickle number. The reverse side of leaves was reddish green color in 'Kardinal' as well as the line KA4, but green color in the line KA1, KA2, and KA3.
Background: Lung cancer is the leading cause of cancer over the world. P53 alteration is by far the most common genetic defect in lung cancer. The mutation of p53 protein involves the loss of inhibitory function of p53 related tumor suppressor gene and resultant oncogenesis. The analysis of p53 alterations consists of immunohistochemical stain, PCR based assay, or serologic ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Methods : Serum levels of p53 mutant protein were measured in 69 cases of lung cancer (adenocarcinoma n=29, epidermoid n=16, small cell n=13, large cell n=1, undifferentiated n=1, undetermined n=9) and 42 controls of respiratory disorders using ELISA. Immunohistochemical stain in tissue was performed using monoclonal antibody of p53 in lung cancer subjects. Results: Both serum p53s in nonsmall cell cancer ($0.28{\pm}0.44ng/ml$) and in small cell cancer ($0.20{\pm}0.14ng/ml$) were not different from controls ($0.34{\pm}0.20ng/ml$). Also there was no significant difference in serum p53 according to tumor stages. P53 immunohistochemical stain showed 50% positivity overall in lung cancer. There were no close correlation between serologic level and positivity of immunohistochemical stain. Conclusion: The serologic determination of p53 mutant protein is thought to have no diagnostic role in lung cancer. Immunohistochemical stain in lung cancer specimen shows 50% positivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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