As in the O. mykiss electrophoretic profiles of RNA, the signals of each RNA sample from 9 individual tissues such as liver, muscle, brain, heart, pituitary gland, kidney, intestine, spleen and gill similar to positive control were obtained. The tissue distributions of the complimentary DNA (cDNA) of O. mykiss four genes were analyzed using quantitative real-time PCR with primer sets for tissue expression analysis. In this rainbow trout species, author obtained bands of various sizes, ranged from 700 bp to 1,400 bp. A dissociation curve was made at the end of each run to make sure that there was no non-specific amplification. Supplementarily, the Ct of each DNA was compared. The Ct values of vinculin with rainbow trout tissues were determined in a manner similar to those for agouti-related protein (AgRP) and melanocortin receptors (MC4R I and MC4R II). Further, obtained Cts for standard curve of each DNA were affected by specific product (vinculin, AgRP and MC4R II genes). After several experiments with four individual genes of rainbow trout, author estimated a variation ratio of the mean Ct value of the DNA extracted using the comparative CTt method was 37.27, and the standard deviation was 5.33. The correlation coefficient between the Ct values and the concentration of cDNA was -0.98, -0.99, -0.91 and -0.86, respectively (vinculin, AgRP, MC4R I and MC4R II genes). Since this correlation showed high linearity, the straight line obtained was used as a standard for the O. mykiss tissues reared in aquarium. A PCR efficiency of 100% is ideally achieved when the slopes are close to the theoretical value of -3.31. According to quantification method, the results of quantification are strongly affected by the DNA fragmentation. The size of most DNA fragments obtained from various tissues of rainbow trout used in the experiment was approximately 100 bp. According to the four slopes, an efficiency of nearly 100% was estimated for four genes detection methods. Additionally, further analysis with more individuals and primers will be required to fully establish optimization in rainbow trout.
Rama Rao, S.V.;Raju, M.V.L.N.;Reddy, M.R.;Panda, A.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권6호
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pp.836-842
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2004
An experiment was conducted to study the performance of broilers chicks (2 to 42 d of age) fed diets containing pearl millet (PM, Pennisetum typhoides), foxtail millet (FOM, Setaria italica) or finger millet (FIM, Elusine coracana) totally replacing (w/w) yellow maize (YM) with and with out supplementing non-starch polysaccharide (NSP) hydrolysing enzymes at the rate of 0.5 g/kg diet. Enzyme preparation contained amylase 2,400 units, hemi-cellulase 5,400 units, cellulase 12,000 units, protease 2,400 units and beta-glucanase 106 units/g. Each diet was fed to eight replicates (five female Vencob broilers/replicate) housed in stainless steel battery brooders. The estimated metabolizable energy (ME) contents of YM, PM, FOM and FIM were FM (PM) were about 3,389, 2,736, 3,303 and 2,846 kcal/kg, respectively. Total replacement of YM with FOM did not influence the body weight gain, ready to cook yield, relative weights of giblet, liver, intestine, lymphoid organs (bursa and spleen) and length of intestine, antibody titers and livability at 42 d of age. But the food efficiency decreased significantly in FOM fed broilers compared those fed YM. Further, the fat content in thigh muscle reduced with FOM fed groups compared to those fed YM. The performance of broilers decreased significantly in PM and FIM fed broilers compared to those fed YM. The relative weights of giblet, gizzard and liver increased in FIM fed groups compared to those fed YM as the principal source of energy in broilers. Incorporation of NSP hydrolysing enzymes in commercial broiler diets improved the efficiency of feed utilization during starter phase but not at 42 d of age. The results thus indicate that yellow maize can be replaced in toto on weight basis in commercial broiler diets without affecting the performance. Supplementation of NSP hydrolysing enzymes was beneficial in enhancing feed utilization during the starter phase.
This preliminary feeding trial was conducted to study the effects of different dietary selenium (Se) levels on growth performance and toxicity in juvenile black seabream, Acanthopagrus schlegeli (Bleeker). Fish averaging $7.0{\pm}0.1g$ ($mean{\pm}SD$) were fed one of the five semi-purified diets containing 0.21, 0.30, 0.52, 1.29 and 12.3 mg sodium selenite ($Na_2SeO_3$)/kg diet (Se 0.21, Se 0.30, Se 0.52, Se 1.29 or Se 12.3) for 15 weeks. After the feeding trial, weight gain (WG), feed efficiency (FE), specific growth rate (SGR) and protein efficiency ratio (PER) of fish fed Se 0.21, Se 0.30, Se 0.52 and Se 1.29 diets were not significantly different, however fish fed Se 12.3 diet showed significantly lower WG, FE, SGR and PER than those of fish fed the other diets (p<0.05). Fish fed Se 0.21, Se 0.30, Se 0.52, Se 1.29 and Se 12.3 diets showed no significant differences in hematocrit (PCV), hemoglobin (Hb) and red blood cells (RBC), however fish fed Se 12.3 diet showed lower values of PCV, Hb and RBC than those of fish fed the other diets. Histopathological lesions such as tubular necrosis and polycystic dilation of tubules in the kidney tissues were observed in fish fed Se 12.3 diet. Se was accumulated in a dose-dependent manner in the liver, kidney, muscle and gill tissues. Based on the results of this preliminary feeding trial, a dietary Se level of 0.21 mg $Na_2SeO_3/kg$ diet could be optimal for proper growth performances, and a dietary Se level of 12.3 mg $Na_2SeO_3/kg$ diet may ultimately be toxic to juvenile black seabream, Acanthopagrus schlegeli.
This study compared the effects of diets consisting of experimental extruded pellets (EP), commercial soft extruded pellets (SEP), and raw-fish-based moist pellets (MP) on the growth, flesh quality, and histology of the Korean rockfish Sebastes schlegeli. Three replicated groups of 60 fish each (initial mean weight 152 g) were fed one of two experimental EPs (EP1 and EP2), two commercial SEPs (SEP1 and SEP2), or MP for 11 weeks. The survival, weight gain, and final mean weight of the fish did not differ significantly among the groups. The highest feed efficiency was in fish fed MP (P<0.05), and the protein efficiency ratio of fish fed MP was significantly higher than that of fish fed EP1, EP2, or SEP1, but not significantly different from that of fish fed EP2. The daily feed intake of the fish fed the EPs and SEPs was significantly higher than that of the fish fed MP (P<0.05). The condition factor, Hepatosomatic Index, and Viscerasomatic Index of the fish did not differ significantly among the groups. No notable differences in the textural properties of the dorsal muscle, plasma biochemical parameters, or histological features of the fish were observed in fish fed any diet. This suggests that extruded pellets can be used to feed growing Korean rockfish without compromising growth, flesh quality, or histopathological change in comparison to raw fish-based moist pellets.
Sung, In Kyung;Park, Seo Jung;Kang, Kyutae;Kim, Min Young;Cho, Seongbeom
한국축산식품학회지
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제35권1호
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pp.121-129
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2015
${\beta}$-agonists are anabolic compounds that promote fat loss and muscle gain, and their administration to livestock may provide economic benefits by increasing growth rate and feed efficiency. For these reasons, ${\beta}$-agonists are also commonly added to livestock feed as growth promoters. This can introduce a significant risk of secondary human poisoning through intake of contaminated meat. A new method for the simultaneous determination of three ${\beta}$-agonists (clenbuterol, ractopamine, and zilpaterol) was developed in this study and applied to various meat samples. The limits of quantification, derived through a validation test following Codex guidelines, were $0.2{\mu}g/kg$ for clenbuterol and zilpaterol, and $0.4{\mu}g/kg$ for ractopamine. The average recoveries for clenbuterol, ractopamine, and zilpaterol ranged from 109.1% to 118.3%, 95.3% to 109.0%, and 94.1% to 120.0%, respectively. The recovery and coefficient of variation (CV) values fell within the acceptable range according to the Codex guidelines. This method reduced the analysis time without decreasing detection efficiency by modifying the pretreatment steps. This method could be utilized to manage the safety of imported meat products from countries where zilpaterol use is still permitted, thereby improving public health and preventing ${\beta}$-agonist poisoning due to secondary contamination.
A DNA vaccine methodology using eukaryote expression vectors to produce immunizing proteins in the vaccinated hosts is a novel approach to the development of vaccine and immuno-therapeutics, and it has achieved considerable success over several infectious diseases and various cancers. To further enhance its efficiency, attempts were made to develop novel plasmid vectors containing multiple immunostimulatory CpG motifs, for rapid and strong immune response. First, a 2.9 kb compact plasmid vector (pVAC), containing CMV promoter, polycloning site, BGH poly(A) terminator, ampicillin resistance gene and pBR322 origin was constructed. A pVAC-hEPO was also constructed, which contained a human erythropoietin gene, for evaluating the transfection efficiency of naked plasmid DNA both in vitro and in vivo. To examine the adjuvant effect of multi-CpG motifs on naked plasmid DNA, 22 and 44 enriched and unmethylated CpG motifs were introduced into pVAC to generate pVAC-ISS1 and pVAC-ISS2, respectively. $100{\mu}g$ of pSecTagB, pVAC, pVAC-ISS1 or pVAC-ISS2 were each injected intramuscularly into the tibilias anterior muscle of Balb/c mice. The level of interleukin-6 induced in the mice injected with pVAC-ISS1 and pVAC-ISS2 were significantly elevated after 12 hours, which were almost 2 and 2.5 times higher than that in the mice injected with pSecTagB, respectively. These results suggest that DNA vaccine plasmids with enriched CpG motifs can induce rapid secretion of interleukin-6 by lymphocytes. In conclusion, these vectors can contribute to the development of adjuvant-free DNA vaccinations against infectious diseases and various cancers.
Park, Gunhyun;Yun, Hyeonho;Lee, Seunghan;Taddese, Fasil;Bai, Sungchul C.
Fisheries and Aquatic Sciences
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제18권2호
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pp.143-149
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2015
This experiment was conducted to evaluate the synergistic effects of vitamin C and E on methylmercury (MeHg) toxicity in juvenile olive flounder Paralichthys olivaceus. In a $3{\times}3$ factorial design, 9 experimental diets containing three different vitamin C (0, 200 or 400 mg/kg diet in the form of l-ascorbyl-2-monophosphate) and vitamin E (0, 100 or 200 mg/kg diet in the form of dl-${\alpha}$-tocopheryl acetate) levels with the Hg toxicity level (20 mg/kg diet in the form of MeHg) were formulated. Triplicate groups of fish averaging $2.3{\pm}0.05g(mean{\pm}SD)$ were fed one of the 9 diets in a flow through system for 8 weeks. Fish fed 400 mg vitamin C/kg diet with 100 or 200 mg vitamin E/kg diet showed significantly (P < 0.05) higher weight gain (WG) than did fish fed the other diets. Fish fed 400 mg vitamin C/kg diet at all vitamin E levels and those which fed vitamin C and E equally at a rate of 200 mg/kg diet showed significantly (P < 0.05) higher feed efficiency (FE), specific growth rate (SGR) and protein efficiency ratio (PER) than did fish fed the other diets. Fish fed 200 and 400 mg vitamin C/kg diet exhibited significantly (P < 0.05) lower Hg concentration in their muscle as well as kidney than did fish fed the other diets. Therefore, these results clearly indicated that the synergistic effects of these two vitamins on MeHg toxicity by supplementing dietary vitamin C (200 and 400 mg/kg diet) with vitamin E (100 and 200 mg/kg diet) in juvenile olive flounder.
We evaluated the effects of rice distillers dried grain (DDG) as a partial replacement for fish meal in the practical diet on growth performance, feed utilization, and body composition of juvenile olive flounder Paralichthys olivaceus. Six isonitrogenous and isocaloric diets were formulated to contain 0%, 7%, 14%, 21%, 28%, and 35% DDG (designated DDG0, DDG7, DDG14, DDG21, DDG28, and DDG35, respectively). Three replicate groups of juvenile olive flounder averaging $9.6{\pm}0.2g$ were fed one of the experimental diets to visual satiety twice daily for 8 weeks. Neither survival nor daily feed intake was affected by the dietary DDG levels. Weight gain of the flounder fed the DDG28 and DDG35 diets was lower than that of flounder fed the DDG7 diet. The feed efficiency of flounder fed the DDG28 diet was lower than that of flounder fed the DDG0, DDG7, and DDG14 diets. The protein efficiency ratio of flounder fed the DDG28 diet was lower than that of flounder fed the DDG7 diet. The proximate composition of muscle was not affected by the dietary DDG levels. The plasma contents of total protein, glucose, cholesterol, glutamate oxaloacetate transaminase, phospholipid, and triglyceride were not affected by the dietary DDG levels. The results of this experiment suggest that DDG has the potential to replace fish meal and could be used up to 21% DDG without any negative effects on the growth and feed utilization of juvenile flounder.
This feeding experiment was conducted to investigate the effects of dietary inclusion of some additives on growth performance, hematological parameter and fatty acid composition of growing flounder. Triplicate groups of fish (average weight 120 g) were fed one of five diets containing 5% kelp meal (Ke), 10% krill meal (Kr), 1% garlic powder (Ga), 1% citrus meal (Ci) or control diet (Con) without supplementation for 15 weeks. After the feeding experiment, survival was not significantly different among the groups fed the different diets. Weight gain of fish fed the Ci diet was significantly higher than that of fish fed the Kr diet, but not significantly different from Con, Ke and Ga treatments. Feed efficiency and protein efficiency ratio of fish fed the Ga diet were significantly higher than those of fish fed the other diets. Total protein, glucose, GOT, GPT and total cholesterol contents in the plasma were not affected by the dietary additives. Composition of C20:4n-6 in the dorsal muscle of fish fed the Con diet was significantly higher than that of fish fed the other diets. The results of this study suggest that the dietary inclusion of garlic meal at 1% may improve feed utilization of growing flounder.
This study was conducted to evaluate the laboratory formulated extruded pellet (EP) for olive flounder Paralichthys olivaceus in the East Sea. Three replicate groups of 3,200 fish per each tank (initial weight of $28.1{\pm}0.2g$) were fed one of the two EPs (EP and CEP) and Moist pellet (MP) for 16 months in a commercial farm (Pohang, Korea). Survival was not significantly affected by experimental diets (P>0.05). Weight gain and specific growth rate of fish fed the EP were not significantly different from those of fish fed the MP, but that of fish fed CEP was significantly lower than that of fish fed EP and MP (P<0.05). Feed efficiency and protein efficiency ratio of fish fed the EP was significantly higher than those of fish fed MP (P<0.05), but not significantly different from those of fish fed CEP (P>0.05). The Contents of moisture, crude protein and crude lipid in the dorsal muscle were not significantly different among all groups (P>0.05). These results clearly indicated that the laboratory formulated extruded pellet used in this study can be developed to replace the moist pellet without affecting any growth performance of olive flounder in the commercial farm feeding trail.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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