Ho, Diem Tho;Kim, Nameun;Yun, Dongbin;Kim, Ki-Hong;Kim, Jae-Ok;Jang, Gwang Il;Kim, Do-Hyung
Fisheries and Aquatic Sciences
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제25권6호
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pp.320-326
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2022
Most of the emerging diseases that threaten humans are caused by RNA viruses which are extremely mutable during evolution. The fish RNA virus, viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) can infect a broad range of aquatic animal hosts, but the transmissibility of VHSV to mammals has not been thoroughly investigated. Therefore, our study aimed to investigate the potential adverse effects of VHSV in mammals. Briefly, the survival of VHSV was determined using only minimum essential media (MEM-2) and mammalian SNU-1411 and hepa-1c1c7s cells at 15℃ and 37℃. Mice (Mus musculus, 27.3 ± 1.9 g) were intravenously injected with VHSV (2.37E+05 TCID50·mice-1) in triplicate. Clinical signs and survival rates were examined at 14 days post-challenge, and infection was confirmed in the surviving mice. The 50% tissue culture infective dose (TCID50) and polymerase chain reaction analysis were used to determine viral titers and the infection rate, respectively. The titer of VHSV suspended in MEM-2 at 15℃ was reduced by only one log after 8 days, whereas the virus maintained at 37℃ was inactivated 8 days post-inoculation (dpi). There were no recognizable cytopathic effects in either SNU-1411 or hepa-1c1c7s cells inoculated with VHSV at 15℃ and 37℃. VHSV in those cell lines at 37℃ was rapidly decreased and eventually inactivated at 12 dpi, whereas virus at 15℃ remained at low concentrations without replication. In vivo experiment showed that there were no signs of disease, mortality, or infection in VHSV-infected mice. The results of this study indicate that it is highly unlikely that VHSV can infect mammals including humans.
본 연구는 한국야생 유래 행동이상 마우스(M. m. molossinus-tt@Kist)의 혈액학 및 혈액생화학치와, 체외수정란과 정자동결보존법, 체외수정과 수정란 이식기법을 이용한 번식장애 개선과 병원성 미생물이 제거된 무병마우스 생산을 위하여 실시하였다. 1. 5주령의 혈액학치에서 RBC, platelet치는 근교계에 비해 높게 나타났다. 혈액생화학치에서는 total cholesterol치가 근교계에 비해 높게 나타났으나 triglyceride, total protein, albumin치는 유사하였다. 2. 과배란 유기시의 평균 채란 수는 PMSG/hCG를 2.5/2.5 lU 투여군에서 11.6개, 5.0/5.0 IU 투여군에서 12.7개로 통계학적 유의 차는 인정되지 않았다. 3. 2.5/2.5 lU 투여군과 5.0/5.0 lU 투여군의 수정율은 각각 87.9%와 52%로 2.5/2.5 lU 부여군이 유의성있게 높은 성적을 나타내었고(p<0.05), 2세포기로의 발달율도 각각 유의성이 인정되는 99.0%와 90.6%였다 (p<0.05). 4. 동결정자를 이용한 체외수정에서의 수정율은 24.8%로 신선정자를 사용했을 때의 87.9% 보다 낮은 성적이었다. 5. 체외 수정란의 이식후의 산자율은 동결 2세포기 체외수정란의 경우 5마리(6.6%), 동결 정사를 이용한 체외 수정란의 경우 6마리(19.4%)와 대조군의 체외수정란의 경우 10마리(21.7%)의 새끼를 얻었다. 6. 이식후 출산한 산자의 미생물학적 검사에서 MHV(Mouse hepatitis virus)와 Staphylo-coccus aureus 등의 병원성 미생물이 무병대리모를 이용한 수정란이식에 의해 제거되었음을 확인하였다.
A total of 1,498 small mammals (rodents and insectivores), including Apodemus agrarius (n= 1,366), Crocidura lasiura (54), Mus musculus (32), Micronytus fortis (28), Eothenomys regulus (9), Micronys minutes (6), and Cricetulus triton (3), were live-trapped in Gyeonggi-do (Province) (Paju-si, Pocheon-gun, and Yeoncheon-gun) near the demilitarized zone (DMZ) from December 2004 to September 2005. A. agrarius was found to be infected with 3 species of echinostomes (Echinostoma hortense, Echinostoma cinetorchis, and Euparyphium murinum), while C. lasiura was infected with 1 species (Echinochasmus japonicas) of echinostome. Other mammals were free from echinostome infections. Total 16 E. hortense were detected in 7 (0.5%) mice, 9 E. cinetorchis from 5 (0.4%), and 3 E. murinum from 2 (0.1%) out of 1.366 A. agrarius examined. E. japonicus was found only in 1 (1.9%; total 3 specimens) C. lasiura. These results demonstrate that A. agrarius and C. lasiura, inhabiting near the DMZ of Gyeonggi-do serve as the natural definitive hosts for several species of echinostomes, although their infection rates are low. This is the first record of natural infections of A. agrarius with E. cinetorchis and C. lasiura with E. japonicus in the Republic of Korea.
Scientific trust and quantification of traditional species investigation and results that have been used in ecology for decades has always been a problem and concern for ecologists. Global ecologists have proposed DNA-based species investigation studies to find answers to problems. In this study, we reviewed the global trend of research on environmental DNA(eDNA), which is a method for monitoring species by detecting DNA of organisms naturally mixed in environmental samples such as water, soil, and feces. The first eDNA research confirmed the possibility of species investigation at the molecular level, and commercialization of NGS(Next Generation Sequencing) and DNA metabarcoding elicits efficient and quantitative species investigation results, and eDNA research is increasing in the filed of ecology. In this study, mammals and birds were detected using MiMammal universal primers from 23 samples(3 natural reserves; 20 water bowls) out of 4 patches to verify eDNA for urban ecosystems in Suwon, and eDNA was verified by performing camera trapping and field survey. Most terrestrial species were detected through eDNA, and particularly, mice(Mus musculus), and Vinous-throated Parrotbill (Sinosuthora webbiana) were identified only with eDNA, It has been confirmed to be highly effective by investigating techniques for small and internal species. However, due to the lack of resolution of the primer, weasels(Mustela sibirica) and squirrels(Melanochromis auratus) were not detected, and it was confirmed that the traditional investigation method was effective only for a few species, such as Mogera robusta(Mogera robusta). Therefore, it is judged that the effects of species investigation can be maximized only when eDNA is combined with traditional field survey and Camera trapping to complement each other.
Shen, Wen;Chen, Kaili;Sun, Yanming;Guo, Haiying;Chen, Dongmei;Cao, Yang
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제30권5호
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pp.736-742
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2017
Objective: Experiments were conducted to clone the sequence of Wild Argali short palate, lung and nasal epithelium clone 1 (SPLUNC1) cDNA, and to lay the foundation for further study the biological function of Wild Argali SPLUNC1. Methods: The complete sequence of Wild Argali SPLUNC1 cDNA was generated by rapid amplification of cDNA ends. The entire coding sequence was inserted into the pPIC9K vector and expressed in Pichia pastoris (P. pastoris) GS115. The recombinant SPLUNC1 protein was detected by Western blot and purified by $Ni^{2+}$ chelate affinity chromatography. The test of effect of the protein on Mycoplasma ovipneumoniae (MO) was performed with real-time polymerase chain reaction. Results: The Wild Argali SPLUNC1 cDNA was 1,076 bp with an open reading frame of 768 bp, which encoded a 26.49 kDa protein composed of 255 amino acids. Its amino acid sequence shared 98.4%, 96.9%, 94.5%, 90.2%, 80.8%, 78.4%, 78.3%, 72.5%, 72.3%, 68.8% identity with those of SPLUNC1 cDNA from Ovis aries (accession no. NP_001288334.1), Capra hircus (accession no. XP_005688516.1), Pantholops hodgsonii (accession no. XP_005979709.1), Bos taurus (accession no. NP_776851.1), Felis catus (accession no. XP_006929910.1), Homo sapiens (accession no. NP_001230122.1), Sus scrofa (accession no. NP_001005727.1), Chinchilla lanigera (accession no. NP_001269294.1), Mus musculus (accession no. NP_035256.2), and Rattus norvegicus (accession no. NP_742028.1), respectively. The recombinant protein corresponded to the expected molecular mass of 25.47 kDa as judged by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and it was detected in the supernatant of P. pastoris, and it could be purified. The results from the test of inhibition effect of argali recombinant SPLUNC1 protein on MO showed that the product could inhibit MO very well (p<0.01). Conclusion: The amino acid sequence of Wild Argali SPLUNC1 was different from other organisms. The recombinant SPLUNC1 protein has good biological activity.
A total of 1,496 rodents and insectivores were live-trapped at Yeoncheon-gun (n = 351), Paju-shi (804), and Pocheon-gun (343), Gyeonggi-do (Province), and examined for intestinal helminths, including Neodiplostomum seoulense, seasonally from December 2004 to September 2005. Six species of rodents, including Apodemus agrarius (1,366), Mus musculus (32), Micronytus fortis (28), Eothenomys regulus (9), Micronys minutus (6), and Cricetulus triton (3), and 1 species of insectivores Crocidura lasiura (54) were collected. A total of 321 adult N. seoulense were collected from 19 (1.4%) A. agrarius. The worm burden ranged from 1 to 101 per A. agrarius (mean; 16.9). No N. seoulense was observed in other rodent or insectivore species examined. The infection rate during autumn (4.5%) was higher than those during spring (0.8%), summer (0.8%), and winter (0.5%). The average number of N. seoulense in infected A. agrarius was the highest in spring (66.0 specimens), followed by autumn (15.2), winter (4.5), and summer (3.3). This study first confirms that A. agrarius is a natural definitive host for N. seoulense, and demonstrates that the infection rates and intensities vary seasonally and geographically.
The small intestines of 6 species of rodents and 1 species of insectivore were examined seasonally for Plagiorchis muris infection in 3 different localities in northern Gyeonggi-do (Province), near the demilitarized zone (DMZ). A total of 1,496 animals, including 1,366 Apodemus agrarius, 54 Crocidura iasiura (insectivore), 32 Mus musculus, 28 Micronytus fortis, 9 Eothenomys regulus, 6 Micronys minutus, and 3 Cricetulus triton, were live-trapped at Yeoncheon-gun (n = 351), Paju-shi (804) and Pocheon-gun (343) at 3-mo intervals from December 2004 to September 2005. A total of 1,647 P. muris were collected from 72 (5.3%) A. agrarius. The infection rate was the high-est in Pocheon-gun (8.2%), followed by Yeoncheon-gun (5.0%) and Paju-shi (4.2%). A higher infection rate was observed in A. agrarius captured during September (19.4%) than those captured during December (3.0%), June (2.6%), or April (0%). However, the worm burden was the highest in June (av. 32.1/animal), followed by September (24.7), December (4.0), and April (0). None of the other animal species were found infected with P. muris. The results reveal that A. agrarius is a natural definitive host for P. muris, and infection rates and worm burdens vary seasonally and geographically.
Background: Diabetic nephropathy (DN) is one of the major complications of chronic hyperglycaemia affecting normal kidney functioning. The ayurvedic medicine curcumin (CUR) is pharmaceutically accepted for its vast biological effects. Objectives: The Curcuma-derived diferuloylmethane compound CUR, loaded on Poly (lactide-co-glycolic) acid (PLGA) nanoparticles was utilized to combat DN-induced renal apoptosis by selectively targeting and modulating Bcl2. Methods: Upon in silico molecular docking and screening study CUR was selected as the core phytocompound for nanoparticle formulation. PLGA-nano-encapsulated-curcumin (NCUR) were synthesized following standard solvent displacement method. The NCUR were characterized for shape, size and other physico-chemical properties by Atomic Force Microscopy (AFM), Dynamic Light Scattering (DLS) and Fourier-Transform Infrared (FTIR) Spectroscopy studies. For in vivo validation of nephro-protective effects, Mus musculus were pre-treated with CUR at a dose of 50 mg/kg b.w. and NCUR at a dose of 25 mg/kg b.w. (dose 1), 12.5 mg/kg b.w (dose 2) followed by alloxan administration (100 mg/kg b.w) and serum glucose levels, histopathology and immunofluorescence study were conducted. Results: The in silico study revealed a strong affinity of CUR towards Bcl2 (dock score -10.94 Kcal/mol). The synthesized NCUR were of even shape, devoid of cracks and holes with mean size of ~80 nm having -7.53 mV zeta potential. Dose 1 efficiently improved serum glucose levels, tissue-specific expression of Bcl2 and reduced glomerular space and glomerular sclerosis in comparison to hyperglycaemic group. Conclusion: This study essentially validates the potential of NCUR to inhibit DN by reducing blood glucose level and mitigating glomerular apoptosis by selectively promoting Bcl2 protein expression in kidney tissue.
본 연구는 2006년부터 2012년까지 수행된 제3차 전국자연환경조사 포유류 데이터(70,562개)를 활용하여 국내에서 서식하는 포유류의 서식지 유형을 클러스터링하고 서식지 유형에 나타나는 종의 특징을 파악하고자 하였다. 제3차 전국자연환경조사의 야장에 기록된 서식지 유형 중에서 15개의 키워드를 뽑아 재분류하여 포유류 서식지유형을 통계 분석하였다. 서식지 유형 군집분석에서는 30회 이상 기록된 14개의 서식지 유형을 대상으로 비계층적 클러스터 분석(k 평균 클러스터 분석), 계층적 클러스터 분석, 비계량형 다차원척도법을 시행하였다. 2006년에서 2012년까지 전국에서 수집된 제3차 전국자연환경조사를 통해 확인된 포유류는 총 7목 16과 39종이었다. 서식지 유형에 대한 분류는 11개로 클러스터를 분류했을 때 단순구조지수가 가장 높았다(ssi = 0.07). 계층적 클러스터 분석으로 서식지 유형들 간의 유사성과 위계를 확인해 본 결과, 포유류에게는 주거지가 가장 차별된 서식지 유형이었고, 그 다음은 하천과 해안이 병합된 클러스터였다. 비계량형 다차원척도 분석 결과, 포유류에게 가장 차별된 서식지유형인 주거지의 경우 생쥐와 집쥐 두 종이 제한적으로 나타났으며, 해안과 하천의 경우 수달이 제한적으로 나타났다. 연구결과를 종합해보면, 포유류의 서식지 유형은 크게 산림을 주요 서식지와 이동경로로 이용하는 산림형과, 물을 주요 서식지로 이용하는 하천형, 주거지 인근에서 서식하는 주거형, 곡류나 씨앗을 주 먹이원으로 하는 저지대형 등 4가지로 구분할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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