• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제14권2호
• /
• pp.90-95
• /
• 2006

CKD-602 exerts its antitumor effect via inhibition of topoisomerase I in cancer cells. Multicellular spheroid (MCS) and Multicellular layers (MCLs) are known as in vitro 3-dimensional models which closely represent tumor conditions in vivo. In order to investigate the potential of CKD-602 against human colorectal tumors, we evaluated the anti-proliferative activity and penetration ability of CKD-602 in MCS and MCL cultures of DLD-l human colorectal cancer cells, respectively. The maximum effects($E_{max}$) induced by CKD-602 were significantly lower in MCS compared to monolayers (48% vs 92%). With prolonged drug exposure, the $IC_{50's}$ of CKD-602 decreased to $23.5{\pm}1.0nM$ in monolayers after 24 h exposure and $42.3{\pm}1.7nM$ in MCS after 6 days, respectively. However, no further increase in effect was observed for exposure time longer than growth doubling time (Td) in both cultures. Activity of CKD-602 was significantly reduced after penetration through MCL and also with cell-free insert membrane. In conclusion, CKD-602 showed significantly decreased anti-proliferative activity in 3D cultures (MCS) of human colorectal cancer cells. Tumor penetration of CKD-602 could not be determined due to loss of activity after penetration through cell free insert membrane, which warrants further evaluation using a modified model.

• 한국어류학회지
• /
• 제19권3호
• /
• pp.201-209
• /
• 2007

광학현미경상에서 복섬, Takifugu niphobles의 피부 표면은 불규칙한 주름을 가지는데, 이들 주름은 등 쪽보다 배 쪽에서 훨씬 뚜렷했다. 피부계는 외부로부터 상피층과 진피층으로 구분되며, 상피층은 다층상피층으로 상피세포, 점액세포, 곤봉상세포, 과립세포 그리고 multivacuolar gland들로 구성되어 있었다. 상피세포는 표면세포, 중간세포, 기저세포로 구분되며, 표면상피의 자유면은 미세융기로 덮여 있었다. 상피층의 선세포는 단세포선과 다세포선으로 구분되었다. 점액분비선은 다세포선의 형태로 점액세포들은 중성 당단백질의 점액물질을 함유하고 있었다. Multivacuolar gland들은 장경 약 $20{\mu}m$의 vacuole cell들로 구성되어 있었다. Vacuole cell들은 커다란 중심공포를 가지며, 잘 발달된 desmosome으로 연결되어 있었다. 점액분비선과 multivacuolar gland는 등 쪽에 비해 배 쪽에서 훨씬 발달되어 있었다. 진피층의 두께는 배 쪽 피부계의 경우에는 상피세포층의 3~5배였다. 진피층은 치밀결합조직으로 교원섬유, 섬유세포, 가시의 기저부, 색소세포 및 다수의 신경세포 분포가 확인되었다.

• Animal cells and systems
• /
• 제12권2호
• /
• pp.85-91
• /
• 2008

Structure and mucosubstance histochemistry in the epidermis of five teleostean species, i. e., spotty belly, Agrammus agrammus, devil stinger, Inimicus japonicus, stone fish, Erosa erosa, cubed snailfish, Liparis tessellatus, and Japanese bluefish, Scombrops boops were investigated. The epidermis of five species studied is composed of three layers: superficial, middle, and basal layer. The superficial layer is comprised of rather flattened cells. Mucous cells, the type commonly found in fishes are completely lacking in the epidermis of devil stinger, stone fish, and cubed snailfish. The epidermis of devil stinger and stone fish have multicellular glands which do not have mucosubstances. The skin surface of them is covered with mucous layer. The superficial cells in the epidermis of devil stinger, stone fish, and cubed snailfish are mucus-secreting cells. The composition and the amount of the mucosubstances vary in species and body regions. The mucous layer on the skin surface and superficial epidermal cells of devil stinger contain a mixture of neutral and acidic(sulfated and nonsulfated) mucosubstances. In stone fish, the mucous layer has acidic(sulfated and non-sulfated) mucin and the superficial epidermal cells contain neutral mucin. In cubed snailfish, the type of epidermal mucosubstances is identified as a mixture of neutral and acidic(non-sulfated) mucin. The mucous cells of the epidermis in spotty belly and Japanese bluefish contain neutral mucin.

• 생명과학회지
• /
• 제10권1호
• /
• pp.37-44
• /
• 2000

The mammary gland contains a subpopulation of epithelial cells with large proliferative potentials which are the likely targets for carcinogens. These clonogenic cells can proliferate and differentiate into functional glandular structures. Rat mammary epithelial cells (RMEC) were isolated and characterized in vitro. By flow cytometry of RMEC stained with fluorescein isothiocyanate-peanut agglutinin(PNA) and phycoerythrin anti-Thy-1.1 monoclonal antibody, it was possible to four cell subpopulations from 7-8 week old F344 female rat mammary glands: cells negative to both reagents (B-), PNA-positive cells (PNA+), Thy-1.1-positive cells (Thy-1.1+), and cells positive to both reagents (B+). When single PNA+ cells were isolated and cultured in Matrigel with irradiated (∼50 Gray) 3T3 fibroblast feeder layer, they gave rise to multicellular clonal structures of three types: alveolar, foamy alveolar, and squamous colonies. The developed structures were similar to the mammary glands in vivo. These results suggest that some of PNA+ cells possesses many of the characteristics of multipotent clonogenic stem-like cells.

• Applied Microscopy
• /
• 제52권
• /
• pp.4.1-4.11
• /
• 2022

Field emission scanning electron microscopy (FESEM) is an essential tool for observing surface details of specimens in a high vacuum. A series of specimen procedures precludes the observations of living organisms, resulting in artifacts. To overcome these problems, Takahiko Hariyama and his colleagues proposed the concept of the "nanosuit" later referred to as "NanoSuit", describing a thin polymer layer placed on organisms to protect them in a high vacuum in 2013. The NanoSuit is formed rapidly by (i) electron beam irradiation, (ii) plasma irradiation, (iii) Tween 20 solution immersion, and (iv) surface shield enhancer (SSE) solution immersion. Without chemical fixation and metal coating, the NanoSuit-formed specimens allowed structural preservation and accurate element detection of insulating, wet specimens at high spatial resolution. NanoSuit-formed larvae were able to resume normal growth following FESEM observation. The method has been employed to observe unfixed and uncoated bacteria, multicellular organisms, and paraffin sections. These results suggest that the NanoSuit can be applied to prolong life in vacuo and overcome the limit of dead imaging of electron microscopy.

• Applied Microscopy
• /
• 제51권
• /
• pp.16.1-16.7
• /
• 2021

Electron microscopy (EM) is an essential imaging method in biological sciences. Since biological specimens are exposed to radiation and vacuum conditions during EM observations, they die due to chemical bond breakage and desiccation. However, some organisms belonging to the taxa of bacteria, fungi, plants, and animals (including beetles, ticks, and tardigrades) have been reported to survive hostile scanning EM (SEM) conditions since the onset of EM. The surviving organisms were observed (i) without chemical fixation, (ii) after mounting to a precooled cold stage, (iii) using cryo-SEM, or (iv) after coating with a thin polymer layer, respectively. Combined use of these techniques may provide a better condition for preservation and live imaging of multicellular organisms for a long time beyond live-cell EM.

• Applied Microscopy
• /
• 제30권3호
• /
• pp.311-319
• /
• 2000

대하 아가미의 형태와 미세구조를 광학현미경과 전자현미경으로 조사하였다. 대하는 수지형 아가미를 가진 다. 아가미는 출새관과 입새관을 구분하는 세로 격벽을 가진다. 각각의 새판은 전자밀도가 다른 다층구조의 큐터클로 싸여 있다. 새판 기저세포들은 편평형이며, 전자밀도가 높은 세포질을 가진다. 상피세포층은 단층으로 큰 핵을 가진 편평상피로 구성된다. 새판의 기둥구조는 세로방향의 미세소관들과 측면 membrane interdigitation을 가진다. AB-PAS음성 분비세포들은 다세포선의 형태이다. 활성화된 선에서 각 세포의 경계부는 뚜렷하지 않으며, 세포질에는 활면소포체, 미토콘드리아, 전자밀도가 낮으며 막을 가진 분비소포들과 granular rosettes를 가진다. 비 활성화된 선에서는 세포 경계가 뚜렷하며, 세포질에서는 전자밀도가 높은 다수의 작은 과립들이 산재한다. 그리고 alcian blue에 양성인 단세포 분비세포들은 세포질에 발달된 다수의 골지체와 조면소포체들을 함유한다.

• 한국전산유체공학회지
• /
• 제21권4호
• /
• pp.11-18
• /
• 2016

A numerical study is conducted on the optical fiber coating flow in a primary coating nozzle consisting of three major parts: a resin chamber, a contraction and a coating die of small diameter. The flow is driven by the optical fiber penetrating the center of the nozzle at a high speed. The axisymmetric two-dimensional flow and heat transfer induced by viscous heating are examined based on the laminar flow assumption. Numerical experiments are performed with varying the convergent angle of nozzle contraction and the optical fiber drawing speed. The numerical results show that for high drawing speed greater than 30 m/s, there is a transition in the essential flow features depending on the convergent angle. For a large convergent angle greater than $30^{\circ}$, unfavorable multicellular flow structures are monitored, which could be associated with wall boundary-layer separation. In the regime of small convergent angle, as the angle increases, the highest resin temperature at the exit of die and the coating thickness decrease but the sensitivity of coating thickness on drawing speed and the maximum shear strain of resin on the optical fiber increase. The effects of the convergent angle are discussed in view of compromise searching for an appropriate angle for high-speed optical fiber coating.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제24권3호
• /
• pp.470-486
• /
• 1995

유선에 존재하는 유선 상피 모세포(mammary epithelial stem cells)의 존재 증거, 정상 조직에서 이들의역할, flow cytometry 및 면역 염색법에 의한 세포 분리, 세포 기질 단백질을 이용한 삼차원적 세포 배양에서의 증식 등을 요약한다. 유선의 실질 조직에 상피 모세포가 존재한다는 것은 여러 형태의 이식 실험에서 설명되었고 또 모세포의 표현형적 특징들은 여러 가지의 monoclonal antibodies에 의해 논증되었다. 이들 연구의 결과들은 유선의 모세포군이 end bud와 유선의 기저층(basal layer)에 존재한다고 제시하고 있다. 이들을 분리, 동정하기 위해 FITC-PNA와 PE-Thy-1.1 항체와 같은 세포 표지자를 이용하여 유선 상피 세포를 4군으로 나눌 수 있었다. FITC-PNA에만 양성 반응을 보인 PNA+ 세포군, PE-Thy-1.1에만 양성 반응을 보인 Thy-1.1+ 세포군, 이들 두 표지자에 양성 반응을 보인 B+ 세포군, 그리고 양쪽에 음성 반응을 보인 B- 세포군이었는데 이들을 flow cytometry로 분리하고 생체에 이식 실험을 하였을 때 PNA+ 세포군이 유선 모세포들을 가장 많이 가진 것으로 확인되었다. 그리고 유선 상피세포로 이루어진 유선 조직 절편(organoids) 이들 상피세포군을 세포외기질 단백질체인 Matrigel 내에서 배양한 결과 a) stellate, b) duct, c) web, d)squamous, e) lobuloduct 등 5종류의 다세포 구조물이 생성됨을 확인하였다. 이들 중 편평상피화생의 구조물은 정상적인 유선 조직에서는 나타나지 않는 구조물인데 all-trans retinoic acid를 처리하였을 때 배지의 조정에 따라 다소 차이는 있으나 대부분 이들 편평상피화생의 생성이 억제됨을 확인하였다. 이상의 결과로 보아 본 연구에 이용된 생체 이식법 및 삼차원적 세포외기질 세포 배양법이 상피세포의 성장, 분화 및 모세포 연구에 유용하게 이용될 수 있으리라 사료된다.

• Applied Microscopy
• /
• 제38권1호
• /
• pp.21-28
• /
• 2008

식충식물의 잎은 결핍된 양분을 보충하기 위해 곤충을 유인하여 포획할 수 있는 포충엽으로 변형된다. 식충식물 표피조직에 발달하는 분비모는 특수한 모용으로 곤충포칙에 필요한 성분을 분비하여 먹이를 소화하고 흡수할 수 있도록 발달한다. 본 연구에서는 긴잎끈끈이주걱 (Drosera anglica Huds.) 엽신에 발달하는 여러 유형의 분비모 발달양상을 주사 및 투과전자현미경적인 방법으로 연구하였다. 포충엽 발달초기 엽원기 단계에서는 엽신이 접혀진 상태로 분화하여 상피조직은 노출되지 않으며, 하피조직에는 비분비모 및 모용원기들이 발달한다. 또한, 엽연이 접힌 상태로 어린 잎의 단계를 거치나 엽연에 발달하는 분비모는 기저부위만 노출되고 이들의 두정부위 및 다른 유형의 분비모들은 접힌 내부에 발달하여 보호된다. 병세포가 매우 길게 신장하는 엽연의 분비모에는 곤충 포획 시 가장 신속하게 식충의 기작을 수행하기 위한 세포수준에서의 구조분화도 수반된다. 엽연에는 긴 병세포를 지닌 약 $2.2{\sim}5.1\;mm$의 globose 분비모 (Type I)가 발달한 반면, 엽신의 내부로 갈수록 병세포는 점진적으로 짧아져 중앙 부위에서는 약 $200{\sim}300\;{\mu}m$의 짧은 병세포를 형성한다. 두정부위(head)는 2층의 분비세포, 중간의 장방형의 유세포층, 중앙의 가도관으로 구성된다. 엽연 분비모에 곤충이 접촉되면 이들 분비모는 매우 빠르게 움직이며 엽정 부위를 향축면으로 움직여 엽신이 곤충을 포위하게 하여 두정부위에서 분비된 점액성 물질로 곤충을 소화 흡수시키는 능동적인 식충의 기작을 수행한다. 또한, 엽신의 내부에는 분비물질을 분비하는 압핀형 두정부위와 짤은 병세포(ca. $15{\sim}30\;{\mu}m$)로 이루어진 분비모(Type II가 발달한다. 또 다른 유형은 병세포가 형성되지 않는 약 $25{\sim}40\;{\mu}m$의 6세포성분비모(Type III)로 상피 및 하피, 엽병, Type I 및 Type II 병세포 표면에 이르기까지 분포하며 위 두 유형의 분비모와 함께 활발한 분비활동을 수행한다. Type III 분비모의 경우, 분비물질은 정단의 두 세포에서만 방출되었다. Type I, II, III 두정부위 분비세포 세포벽에는 큐티클 층이 얇게 발달하며, 세포질 내에는 골지체, 소포체, 분비소낭 등의 막성계 세포내소기관 및 전자밀도가 높은 입자 등이 잘 발달하였다.