Park Jun-Hyung;Park Hee-Kyung;Kang Byeong-Chul;Song Eun-Sil;Jang Hyun-Jung;Kim Cheol-Min
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권5호
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pp.740-747
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2006
Amplification by universal consensus sequences in pathogenic bacterial DNA would allow rapid identification of pathogenic bacteria, and amplification of genus-specific and species-specific sequences of pathogenic bacterial DNA might be used for genotyping at the genus and species levels. For design of probes for molecular diagnostics, several tools are available as stand-alone programs or as Web application. However, since most programs can design only a few probe sets at one time, they are not suitable for large-scale and automatic probes design. Therefore, for high-throughput design of specific probes in diagnostic array development, an automated design tool is necessary. Thus, we developed a Web-based automatic system for design of genus-specific and species-specific probes for pathogen detection. The system is available at http://www.miprobe.com.
The strains of Salmonella othmarschen and Norovirus isolated from outbreak A, the funeral ceremonies incidents in Ouri-shi of Oyeonggido in, 2007, were subjected to genotyping by using PFGE and extraction of RNA by using RT-PCR. 24 Salmonella othmarschen were isolated from 37 cases (patients 12 cases, cookers 4 cases, foods 7cases, knife, kitchen board, dish towel 4 cases, etc) and PFGE patterns showed that 22 strains isolated from the same incident were almost of the same pattern and 2 strains exhibited 50% of the pattern. Antimicrobial susceptibility patterns were such that there were 22 case susceptibility patterns and 2 case resistance patterns (strain 4: AM, CF, CIP, NA, TE TIC and strain 13: CF, CZ). Norovirus G1 (1case), Norovirus G2 (7cases), Norovirus G1,G2 (1case) were detected by using RT-PCR. The fine typing ability and reliability of PFGE and BioNumerics are helpful for establishing out the foodborne pathogens of outbreaks.
The analysis of DNA microarray data is a rapidly evolving area of bioinformatics, and various types of microarray are emerging as some of the most exciting technologies for use in biological and clinical research. In recent years, microarray technology has been utilized in various applications such as the profiling of mRNAs, assessment of DNA copy number, genotyping, and detection of methylated sequences. However, the analysis of these heterogeneous microarray platform experiments does not need to be performed separately. Rather, these platforms can be co-analyzed in combination, for cross-validation. There are a number of separate laboratory information management systems (LIMS) that individually address some of the needs for each platform. However, to our knowledge there are no unified LIMS systems capable of organizing all of the information regarding multi-platform microarray experiments, while additionally integrating this information with tools to perform the analysis. In order to address these requirements, we developed a web-based LIMS system that provides an integrated framework for storing and analyzing microarray information generated by the various platforms. This system enables an easy integration of modules that transform, analyze and/or visualize multi-platform microarray data.
A total of 30L monocytogenes strains from different sources including 13 strains isolated from the foreign imported meat were genotyped in order to establish their genetic relatedness and to compare them with the foreign isolates. PFGE analysis of genomic DNA showed the $11\~16$ fragments ranging in size from 38 to 504 kb. Eleven different PFGE types $(1\~11)$ were identified in the dendrogram at $75\%$ similarity, and the two major PFGE types, type 1 and 2, contained $94\%$ of domestic isolates (16/17). All isolates from domestic beef and pork carcass were grouped in each different type, however, isolates from chicken were clustered together with those from pork and beef. We also found all foreign strains were unrelated with each other, regardless of geographic criteria and that they could be differentiated from those from the domestic isolates by PFGE pattern. The PFGE pattern of one isolate from chicken wing, which the chicken meat was found to be imported from foreign country, was closely related to that of isolate from the Thailand.
Marbling (intramuscular fat) is the most economically important meat quality trait in Hanwoo (Korean cattle). The endothelial differentiation G-protein coupled receptor 1 (EDG1) gene, involved in blood vessel formation, is located within the genomic region of a quantitative trait locus (QTL) for marbling on bovine chromosome 3. Thus, the EDG1 gene can be considered as a positional and functional candidate gene for meat quality in beef cattle. This study aimed to identify single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the EDG1 gene and to evaluate their associations with carcass traits in Hanwoo population. We have sequenced a fragment of 5'-UTR of the EDG1 gene and identified one SNP. Genotyping of the g.166A>G SNP marker was carried out using PCR-RFLP analysis in 309 Hanwoo steers in order to evaluate their association with carcass traits. The g.166A>G SNP marker showed a significant effect on the marbling score. Animals with the GG genotype had higher marbling score compared with AA and AG genotypes (p<0.05). This SNP marker also showed a significant additive effects for the marbling score (p<0.05). These results suggest that the EDG1 gene can be used as a molecular marker for DNA marker-assisted selection in order to increase the levels of the marbling score in Hanwoo.
Ozgumus, Osman Birol;Celik-Sevim, Elif;Alpay-Karaoglu, Sengul;Sandalli, Cemal;Sevim, Ali
Journal of Microbiology
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제45권5호
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pp.379-387
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2007
A hundred and seventeen antibiotic-resistant Escherichia coli strains were isolated from public tap and spring waters which were polluted by fecal coliforms. There were no significant differences between two water sources as to the coliform pollution level (p> 0.05). All E. coli isolates were detected to be resistant to one or more antibiotics tested. Nearly 42% of the isolates showed multiresistant phenotype. Three (2.5%) of these isolates contained class 1 integron. Sequencing analysis of variable regions of the class 1 integrons showed two gene cassette arrays, dfr1-aadA1 and dhfrA17-aadA5. Resistance to ampicillin, tetracycline or trimethoprim-sulfamethoxazole was transferable according to the results of conjugation experiments. The rate of tetracycline resistance was 15%. tet(A)-mediated tetracycline resistance was widespread among tetracycline-resistant E. coli isolates. Genotyping by BOX-polymerase chain reaction (BOX-PCR) showed that some of the strains were epidemiologically related. This is the first report on the prevalence and characterization of class 1 integron-containing E. coli isolates of environmental origin in Turkey.
Recently it was reported that Insertion/Deletion polymorphism in the gene coding for Angiotensin-Converting Enzyme (ACE) is associated with human capacity for physical performance. This study was performed to genotyping of the ACE gene to determine the correlation between elite endurance performance and ACE I/D gene polymorphism. DNA sample was obtained from peripheral blood, hair roots and mouth epithelial cell in 739 general population and 200 elite athletic performance students. The ACE gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR) using allele specific oligonucleotide primers. 155, 525 bp and 237 bp PCR products indicating the presence of insertion(I) and deletion(D) alleles, respectively, were clearly resolved after electrophoresis on a 2% agarose gel with ethidium bromide. Of the 200 elite athletic performance population subjects, 68(34%) showed ACE genotype 11,100(50%) genotype ID and 32(16%) genotype DD. Of the 739 general population subjects, 259(35.1%) showed ACE genotype 11,363(49.1%) genotype ID and 117(15.8%) genotype DD. Therefore ACE I/D gene polymorphism was not associated with human capacity for physical performance.(p>0.05)
Goro Kokubugata;Satoshi Kakishima;Chan-ho Park;Takuro Ito;Atsushi Abe;Chikako Ishii;Gwan-Pil Song
Journal of Species Research
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제12권3호
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pp.258-265
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2023
We conducted phylogenetic analyses using multiplexed inter-simple sequence repeat genotyping by sequencing and compared chloroplast DNA sequences among Ardisia japonica, A. pusilla, and morphologically intermediate plants found on Jeju Island, Korea. Our network analysis demonstrated that the intermediate plants were genetically positioned between A. japonica and A. pusilla. Our comparison of the intergenic spacer between the psbA and trnH genes in chloroplast DNA indicated that four nucleotide substitutions separate A. japonica and A. pusilla, whereas the intermediate plants exhibited the A. japonica haplotype. Our results suggest that the intermediate plants on Jeju Island represent a natural hybrid of A. japonica, as the maternal species, and A. pusilla, and that they are attributable to Ardisia×walkeri. This record constitutes the first documented occurrence of the hybrid taxon in Korea.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제30권1호
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pp.6-16
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2015
This study established the genetic characterisation of 10 microsporidian isolates infecting non-mulberry silkworms (Antheraea assamensis and Samia cynthia ricini) collected from biogeographical forest locations in the State of Assam, India, using PCR-based markers assays: inter simple sequence repeat (ISSR) and random amplified polymorphic DNA (RAPD). A Nosema type species (NIK-1s_mys) was used as control for comparison. The shape of mature microsporidian spores were observed oval to elongated, measuring 3.80 to $4.90{\mu}m$ in length and 2.60 to $3.05{\mu}m$ in width. Fourteen ISSR primers generated reproducible profiles and yielded 178 fragments, of which 175 were polymorphic (98%), while 16 RAPD primers generated reproducible profiles with 198 amplified fragments displaying 95% of polymorphism. Estimation of genetic distance coefficients based on dice coefficients method and clustering with un-weighted pair group method using arithmetic average (UPGMA) analysis was done to unravel the genetic diversity of microsporidians infecting Indian muga and eri silkworm. The similarity coefficients varied from 0.385 to 0.941 in ISSR and 0.083 to 0.938 in RAPD data. UPGMA analysis generated dendrograms with two microsporidian groups, which appear to be different from each other. Based on Euclidean distance matrix method, 2-dimensional distribution also revealed considerable variability among different identified microsporidians. Clustering of these microsporidian isolates was in accordance with their host and biogeographic origin. Both techniques represent a useful and efficient tool for taxonomical grouping as well as for phylogenetic classification of different microsporidians in general and genotyping of these pathogens in particular.
Jeong, Su Yeon;Kim, Min Jee;Kim, Sung Soo;Kim, Iksoo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제37권1호
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pp.1-8
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2018
The nerippe fritillary butterfly, Argynnis nerippe, is listed as an endangered species in Korea. Establishment of effective conservation strategies can be aided by the development and application of molecular markers that can be used to investigate the population genetics of the butterfly. Therefore, in this study, we identified ten microsatellite markers specific to A. nerippe using the Next-Seq 500 platform, and applied these markers to investigate the characteristics of five South Korean butterfly populations. Genotyping of 48 A. nerippe individuals from five localities showed that at each locus the number of alleles ranged from 4 to 14, and that the observed and expected heterozygosities were 0.324-0.863 and 0.138-0.985, respectively. Significant deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium was not observed at any locus. Population structure analysis indicated that there are two genetic groups in Korea, but no population-based gene pool assignments were found. Analysis of $F_{ST}$, $R_{ST}$, and a principal coordinates analysis suggested that the Gureopdo and Yaecheon populations were isolated from other populations. Genetic isolation of the Gureopdo population may be a consequence of unequal population change between Gureopdo and inland populations and to the offshore habitat of Gureopdo. Genetic isolation of the Yaecheon population may be a consequence either of the southernmost location of the population or of the limited sample size available. Further studies with increased sample sizes will be necessary to draw robust conclusions on population isolation and to devise conservation strategies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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