Map-based cloning to find genes of interest, marker-assisted selection (MAS), and marker-assisted breeding (MAB) all require good genetic maps with high reproducible markers. For map construction as well as chromosome assignment, development of single copy PCR-based markers and map integration process are necessary. In this study, the 132 markers (57 STS from BAC-end sequences, 13 STS from RFLP, and 62 SSR) were newly developed as single copy type PCR-based markers. They were used together with 1830 markers previously developed in our lab to construct an integrated map with the Joinmap 3.0 program. This integrated map contained 169 SSR, 354 RFLP, 23 STS from BAC-end sequences, 6 STS from RFLP, 152 AFLP, 51 WRKY, and 99 rRAMP markers on 12 chromosomes. The integrated map contained four genetic maps of two interspecific (Capsicum annuum 'TF68' and C. chinense 'Habanero') and two intraspecific (C. annuum 'CM334' and C. annuum 'Chilsungcho') populations of peppers. This constructed integrated map consisted of 805 markers (map distance of 1858 cM) in interspecific populations and 745 markers (map distance of 1892 cM) in intraspecific populations. The used pepper STS were first developed from end sequences of BAC clones from Capsicum annuum 'CM334'. This integrated map will provide useful information for construction of future pepper genetic maps and for assignment of linkage groups to pepper chromosomes.
Kudzu vine(Pueraria montana var. lobata) is an invasive climbing woody vine that envelops trees and shrubs, pressing physically and shutting out sunlight, which needs to be controlled. Kudzu vine pathogens were surveyed as a way to seek its biocontrol agents in 2002. Occurrence of a bacterial halo blight disease of kudzu vine was observed at several localities in Korea including Euiwang and Suwon in Gyeonggi Province, Daejon, and Gochang and Buan in Jeonbuk Province. Symptoms of brown to black spots with a surrounding yellowish halo appeared from June and lasted till the rainy season without much expansion, but accompanying often leaf blight and defoliation. Isolated bacteria were identified as Pseudomonas syringae pv. phaseolicola based on physiological and cultural characteristics, Biolog, fatty acid and 16S rDNA sequencing analyses. In artificial inoculation test, these bacteria produced the same halo spot symptoms on kudzu vine and bean plants. They also induced hypersensitive responses (HR) on tobacco, tomato, and chili pepper leaves. This is the first report of a bacterial disease of kudzu vine in Korea, and the bacterial pathogen can be used as a biocontrol agent against the pest plant.
Kim, Myoung-Duck;Ahn, Young-Ock;Kim, Yun-Hee;Kim, Cha-Young;Lee, Jeung-Joo;Jeong, Jae-Cheol;Lee, Haeng-Soon;Mok, Il-Gin;Kwak, Sang-Soo
Journal of Plant Biotechnology
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제36권3호
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pp.197-201
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2009
The food self-support rate on the basis of cereals in Korea is approximately 27%, which will threaten the national food security. The dramatic increase in population accompanied by rapid industrialization in developing countries has caused imbalances in the supply of food and energy. To cope with these global crises over food and energy supplies as well as environmental problems, it is urgently required to develop new environmentally friendly industrial crop varieties to be grown on marginal lands including desertification areas for sustainable development. Sweetpotato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) ranks seventh in annual production among food crops in the world. Its wide adaptability on marginal lands and rich nutritional content provide a high potential for preventing malnutrition and enhancing food security in the developing countries. In addition, sweetpotato can be developed as a bioreactor to produce valuable industrial materials including bio-ethanol, functional feed and antioxidants by molecular breeding. In this respect, we focus on the molecular breeding of sweetpotato with multi-function on marginal lands. The strategies for development of environmentally friendly industrial sweetpotato will be introduced and discussed.
Potato virus Y (PVY) is one of the most important viruses in many field crops in Korea. In this study, 31 PVY isolates were isolated from infected potato (Solanum tuberosum), tobacco (Nicotiana tabacum), pea (Pisum sativum), and weeds (Veronica persica, Lamium amplexicause and Capsella bursa-pastoris) showing different mosaic symptoms in Jeonbuk, Chungnam, Gangwon, and Gyeongbuk areas in Korea. The 640 nucleotide region containing the C-terminal portion of coat protein (CP) gene and 3'non-translated region (NTR) was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using PVY-specific oligonucleotide primers. Sequence analyses of the amplified DNA fragments showed that the C-terminal portion of CP gene was not significantly different from that of previously reported PVY strains from potato (PVY-OK and -T) and tobacco (PVY-VN) in Korea. Homologies of the deduced CP amino acid sequences were 93.3-99.0% to corresponding regions of the other PVY strains including PV $Y^{N}$, PV $Y^{o}$ , PV $Y^{OK}$ , PV $Y^{T}$ , and PV $Y^{VN}$ . In contrast the sequences located at the 3'-NTR showed more diverse sequence homologies (76.4-99.7%). These results indicate that the C-terminal portion of the CP gene was relatively conserved while sequences at the 3'NTR were more diverse and variable over the host species and the regions where they were isolated.e isolated.
Xanthomonas axonopodis pv. glycines, the causal agent of bacterial pustule of soybean, induces hypersensitive response (HR) in a non-host plant, hot pepper (Capsicum annuum). A wild-type strain (8ra) and its non-patho-genic mutant (8-13) of X. axonopodis pv. glycines were inoculated into the pepper leaf tissues and their subcellular responses to the bacterial infections were examined by electron microscopy. Intrastructural changes related to HR were found in the leaf tissues infected with 8ra from 8 h after inoculation, characterized by separation of plasmalemma from the cell wall, formation of small vacuoles and vesicles, formation of cell wall apposition, and cellular necrosis. No such responses were observed in the tissues infected with the mutant. In 8ra, the bacterial cells were attached to the cell walls, with the cell wall material dissolved into and appearing to encapsulate the bacterial cells. The bacterial cells later became entirely embedded in the cell wall material. On the other hand, in 8-13, the bacterial cells were usually not attached tightly to the plant cell wall, and no or poor encapsulation of the bacteria by the wall material occurred, although these were encircled by rather loose wall materials at the later stages.
The full-length cDNA of the porcine peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase (PECI) gene encodes a monofunctional peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase. Cloning and sequencing of the porcine PECI cDNA revealed the presence of an 1185-base pair open reading frame predicted to encode a 394-amino acid protein by the 5'rapid amplification of cDNA ends (5'RACE) and EST sequences. The porcine PECI gene was expressed in seven tissues (heart, liver, spleen, lung, kidney, skeletal muscle, fat) which was revealed by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). The porcine PECI was mapped to SSC71/2 p11-13 using the somatic cell hybrid panel (SCHP) and the radiation hybrid panel (RH) (LOD score 12.84). The data showed that PECI was closely linked to marker S0383. A C/T single nucleotide polymorphism in PECI exon 10 (3'UTR) was detected as a PvuII PCR-RFLP. Association analysis in our experimental pig population showed that different genotypes of PECI gene were significantly associated with the Average Backfat thickness (ABF) (p<0.05) and Buttock backfat thickness (p<0.01).
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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한국식물학회 1995년도 제9회 식물생명공학 심포지움 식물육종과 분자생물학의 만남 The 9th Plant Biotechnology Symposium -Breeding and Molecular Biology-
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pp.133-170
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1995
The major objectives of fruit breeding lie in improvement of cultivar, easy to be cultivated and of high quality, in order to produce unexpensive, delicious fruit both for fresh fruit market and processing. Recently, fruit breeding in Korea has contributed to breeding of several superior cultivars in major fruit crops, resulting in appreciable improvement in qualities such as skin color, taste and fruit-bearing habit concerned with productivity. In spite of accomplishments mentioned above, the need for both highly disease-resistant cultivars and long-keeping, physiological disorder-resistant cultivars to meet long distance transsportation in the temperate fruit crops of apples, oriental pears, stone fruits such as peaches, and grapes grown in Korea is rapidly pressing more than ever, as cultivars of today susceptible to pests and diseases and vulnerable to physiological disorders are very expensive and time-consuming in post-harvest handling and management. Thus, imporvements made in the above problems through breeding level will lead to the really enhanced productivity in fruit industry. The major impediments of tree size, the long length of juvenile period and the highly heterogeneous genetic composition to the improvement of fruit crops are responsible for the lower amount and rate of improvements of fruit crops as compared to annuals. Considering the expected limitations of the above problems to be solved through conventional breeding methods and strategy, a turning point of breeding a near perfect cultivar would be laid down if innovative breakthroughs in biological technology will be realized in applying some of the techniques of genetic manipulation at the molecular level to the cultivar improvement of fruit crops, such as the selective insertion of DNA carrying genes that govern desirable characteristics. More than anything else, those traits such as fruiting habit deciding productivity, elements of fruit qualities conditioned by monogene, and disease-and pest-resistance of vital importance for successful fruit growing are urgently desired to be improved by advancement of biotechnology for they are more than difficult and need long period to be attained through conventional breeding method.
The medicinal properties of Ganoderma lucidum have been recognized in China for many centuries. Active pharmaceutical components include triterpenes. To elucidate the molecular regulation of triterpene biosynthesis in this mushroom, a 57-base pair DNA fragment encoding the fourth conserved domain SQ-4 (SMGLFLQKTNIIRDYNEDL) of squalene synthase was synthesized and cloned into the expression vector pET-32a(+). The recombinant fusion protein induced by IPTG (isopropyl-$\beta$-D-thiogalactopyranoside) was overexpressed in the Escherichia coli. Using the purified recombinant fusion protein of 20.9 kDa, a specific polyclonal antibody was obtained from immunized rabbit. Expression of squalene synthase at different development stages of Ganoderma lucidum was analyzed.
Lectins play significant roles in the innate immune responses through binding to pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) on the surfaces of microorganisms. In the present study, tissue distribution and expression analysis of olive flounder lectins were performed after viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) challenge. Fish egg lectin and serum lectin were found to be predominantly expressed in the gills and liver, these results indicate that the transcript expression of olive flounder lectins is concentrated in immune-related tissues. Following a VHSV challenge, an overall increase in the transcript levels of the genes was observed and the expression patterns were distinctly divided into early and later responses during VHSV infection. In conclusion, olive flounder lectins are specifically expressed in immune-related organs and induced in both the immediate and long-lasting immune responses to VHSV in the olive flounder. These results indicate that lectins may be play important roles in the host defense mechanism and involved in the innate and adaptive immune response to viruses in fish.
Molecular markers are useful tools for evaluating genetic diversity and determining cultivar identity. Present study was conducted to evaluate the genetic diversity within a diverse collection of rice accessions used for Korean breeding programs. Two hundred eighty-seven rice cultivars, composed of temperate japonica, tropical japonica, indica, and Tongil-type of Korean crossing parents were evaluated by means of 15 simple sequence repeat (SSR) markers. A total of 99 alleles were detected, and the number of alleles per marker ranged from 4 to 11, with an average of 6.6 per locus. Polymorphism information content (PIC) for each of the SSR markers ranged from 0.2924 to 0.8102 with an average of 0.5785. These results, with the result that use of only 15 SSR markers made all rice cultivars examined could be uniquely distinguished, imply the efficiency of SSR markers for analysis of genetic diversity in rice. Cluster analysis was performed on similar coefficient matrics calculated from SSR markers to generate a dendogram in which two major groups corresponding to japonica (Group I) and indica and Tongil type rice (group II) with additional subclasses within both major groups. The narrowness of the Korean breeding germplasm was revealed by the fact that most of the Korean-bred and Japan-bred temperate japonica cultivars were concentrated into only 2 of the sub-group I-1 (143 cultivars) and I-2 (58 cultivars) among six sub-groups in major group of japonica. This is because of the japonica accessions used in this study was a very closely related ones because of frequent sharing of the crossing parents with similar genetic background with synergy effect of the inherited genetic difference between indica and japonica. A rice breeding strategy with the use of molecular markers was discussed for overcoming of genetic vulnerability owing to this genetic narrowness.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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