This study was carried out to develop bioassay for detection of pesticide residues in agricultural products by using the soil microbial isolates sensitive to pesticides. One hundred bacterial isolates and eighty five fungal isolates were obtained from soil and their sensitivity to 10 ppm of several pesticides was examined in vitro. Five bacterial isolates and three fungal isolates were found sensitive to organochloride fungicide and two fungal isolates sensitive to organocopper fungicide. Among these isolates, B46, B93 and F67 were tested to find out the difference in sensitivity according to the methods of fungicide treatment. All of the isolates were found sensitive to 10 ppm of organochloride fungicides mixed directly in PDA. But they were found insensitive to the fungicide mixed in PDA after filtering through membrane filter. In case of organocopper fungicide, the isolates were found sensitive only when it was treated in PDA. And their sensitivity showed difference among various kinds of organochloride fungicides. B46 and B93 were employed to check the possibility as the agent for detection of the pesticidal residues in twenty eight agricultural products including rice. It was found that all samples had not residues because the samples did not inhibit the growth of isolates. When organochloride fungicides were applied to the above products, it was possible to detect the residues in fruits and vegetables at the concentration of 10 ppm, but not in starch-rich grains. B46 and B93 were identified as Bacillus sp. according to their bacterial characteristics in culture.
미생물 제제의 실내 pot 실험을 통한 효능 실험에서 선발된 Monacrosporium thaumasium을 이용한 KBC3017 제제의 실외 포장 실험을 통해 최적의 구성과 효능 조건을 찾았다. 선발된 균주의 미생물제제 제조를 위해 첨가한 첨가제 중 무기증량제로 Diatomite와 유기증량제로 생옥분이 효과적이었으며, 처리량별 선충 밀도 억제효과는 처리량이 많을수록 효과가 높았으나, 적정 처리량은 2%의 diatomite와 옥가루가 포함된 KBC3017 제제를 이용하여 방제하였을 때 71%의 선충 방제 효과가 나타났다. 이 방제가는 대조구와 비교하였을 때 뿌리와 줄기에서 보다 좋은 효과가 있었다.
Traditional soybean paste from Shandong Liangshan and Tianyuan Jiangyuan commercial soybean paste were chosen for analysis and comparison of their bacterial and fungal dynamics using denaturing gel gradient electrophoresis and 16S rRNA gene clone libraries. The bacterial diversity results showed that more than 20 types of bacteria were present in traditional Shandong soybean paste during its fermentation process, whereas only six types of bacteria were present in the commercial soybean paste. The predominant bacteria in the Shandong soybean paste were most closely related to Leuconostoc spp., an uncultured bacterium, Lactococcus lactis, Bacillus licheniformis, Bacillus spp., and Citrobacter freundii. The predominant bacteria in the Tianyuan Jiangyuan soybean paste were most closely related to an uncultured bacterium, Bacillus licheniformis, and an uncultured Leuconostoc spp. The fungal diversity results showed that 10 types of fungi were present in the Shandong soybean paste during the fermentation process, with the predominant fungi being most closely related to Geotrichum spp., an uncultured fungal clone, Aspergillus oryzae, and yeast species. The predominant fungus in the commercial soybean paste was Aspergillus oryzae.
친환경농자재의 품질관리와 관련하여 친환경 실천 농가를 대상으로 친환경농자재 선택사유, 사용방법, 선택기준, 선호 제형을 조사한 결과, 선택사유는 토양개량>병해충방제>생육촉진 순으로 나타났고, 사용방법은 구입즉시 사용하는 농가는 22.7%인 반면 보관하면서 사용하는 농가가 77.3%이었다. 시판 유통 중인 친환경제제 17종을 구입하여 구입 즉시 제제 중 미생물 농도를 조사한 결과, 친환경유가농자재(미생물제제, 토양미생물제, 친환경유기농자재) 2종은 보증 미생물 밀도가 기준치 이하로 품절 관리측면에서 문제가 있는 것으로 나타난 반면, 미생물농약으로 등록되어 사용되는 제품 중 미생물 밀도는 비교적 안정적이었다. 시판 유통 중인 친환경제제 17종을 6개월간 온도별로 저장하면서 제제 중 보증 미생물 농도를 조사한 결과, $4^{\circ}C$에 저장할 때에는 미생물농약은 1종의 액상제형 미생물제만이 기준치 이하였으며, 친환경유기농자내 8종 중 4종이 기준치 이하였다. 온도의 변화가 큰 실온에 저장할 때에는 전환경농자재는 7종 중 5종이, 미생물농약은 9종 중 4종이 기준치 이하로 나타나 $4^{\circ}C$나 $25^{\circ}C$의 정온 조건에 보관할 때보다는 온도가 변화되는 조건에 저장할 때 영향을 크게 받는 것으로 나타났다. 결론적으로 미생물제제의 저장온도에 따른 미생물의 변화는 저온($5^{\circ}C$) > $25^{\circ}C$(정온) > 변온(실온) 순으로 안정적이었으며, 제형에 따른 저장성은 입제 > 액상수화제 > 액상제 순으로 우수하였다.
Chemical pesticides have been re used for a long time to protect crops from diseases, insects, and weeds ; ample and secure supply of foods in present days would not be possible without them. However, concerns on the risk of using chemical pesticides rising steadily in recent years forced discard many of them and seek an alternate, environment-friendly control strategies. Microbial pesticide is regarded as one of the most promising methods because if properly developed, it will be effective, cheap, and environment-safe. Currently, about 180 microbial pesticides are under development throughout the world and at least 20 of them including B.t. and antibiotics are registered in Korea. This paper discusses some of the successful examples, intriguing problems, and future prospects of microbial pesticides.
BACKGROUND: Towards achievement of sustainable agriculture, using microbial inoculants may present promising alternatives without adverse environmental effects; however, there are challenging issues that should be addressed in terms of effectiveness and ecology. Viability and stability of the bacterial inoculants would be one of the major issues in effectiveness of microbial pesticide uses, and the changes within the indigenous microbial communities by the inoculants would be an important factor influencing soil ecology. Here we investigated the stability of the introduced bacterial strains in the soils planted with barley and its effect on the diversity shifts of the rhizosphere soil bacteria. METHODS AND RESULTS: Two different types of bacterial strains of Bacillus thuringiensis and Shewanella oneidensis MR-1 were inoculated to the soils planted with barley. To monitor the stability of the inoculated bacterial strains, genes specific to the strains (XRE and mtrA) were quantified by qPCR. In addition, bacterial community analyses were performed using v3-v4 regions of 16S rRNA gene sequences from the barley rhizosphere soils, which were analyzed using Illumina MiSeq system and Mothur. Alpha- and beta-diversity analyses indicated that the inoculated rhizosphere soils were grouped apart from the uninoculated soil, and plant growth also may have affected the soil bacterial diversity. CONCLUSION: Regardless of the survival of the introduced non-native microbes, non-indigenous bacteria may influence the soil microbial community and diversity.
우리나라 인삼의 대표적 재배지인 금산군에서 GAP인삼 생산을 희망하는 10농가를 선발하여, GAP인삼의 안전성에 영향을 미칠 수 있는 농약 및 중금속의 잔류 그리고 미생물 등의 위해요소가 오염되었는지 여부를 검토하였다. 검토 대상은 경작되고 있는 인삼을 비롯하여 인삼밭의 토양, 수질 등 3종류로 하였다. 토양에서의 농약잔류를 검사한 결과, 인삼농가 및 일반농가 토양에서 자주 사용되는 Carbendazim등 81개의 농약을 선발하여 분석하였으나, 인삼에 등록된 농약별 최대잔류허용수준을 초과하지 않고 모두 적합판정의 결과로 나타났다. 또한 인삼재배 토양에 중금속의 오염우려가 되는 비소 등8종류의 조사 하였으나 기준치 보다 적게나와 전부 적합 판정을 받았다. 한편 관개수 및 농약희석 살포 등으로 사용되는 수질을 조사한 결과도 조사된 10농가가 모두 안전하였다. 참여농가 밭에서 직접 채취한 인삼에서 24종의 농약을 분석한 결과도 적합 판정으로 나타났다. 조사농가 수삼에 존재하는 위해성 미생물 검사에서 Pantoea spp등 2종의 Gram 음성균과 1종의 그람양성균(Staphylococcus sciuri)이 동정되었으며, 일반세균 수는 $1.5{\times}10^3$ cfu/ml 로 다른 농산물보다 적은 수로 발견되었다. 따라서 이번 조사한 금산 지역에서는 GAP 인산재배 생산에 적합한 토양, 수질을 보였으며, 기존 생산한 인삼에서도 GAP 농산물 생산 기준에 적합하였다.
The relationship between microbial activity and physico-chemical characteristics of golf course soils were investigated in Kyonggi Province with different open years. The increasing tendency of soil PH with depth seemed to the result of mineral leaching. Exchangeable $Ca^2$+ , $Mg^2$+ and K+ showed relatively higher concentration in lower horizon indicating the leaching of minerals. The minerals were heavily leached in older golf course. There was a significant positive correlation between pH and $Ca^2$+.The contents of organic matters, total nitrogen and phosphorus were high in higher horizon.Dehydrogenase activity(DHA) and the content of ATP were determined as an index of soil microbial activity. DHA value was significantly different with golf club as well as golf courses ac-cording todifferent open year. This indicates that DHA was affected by several fertilizertreatments rather than herbicide pesticide treatments. DHA was positively correlated with water holding capacity and total nitrogen. The content of ATP was high in fairway and in golf course with older open year, showing the similar tendency with the results of DHA.
소나무재선충에 대한 살선충 활성을 나타내는 Micromonospora sp. AW050027 균주를 최적의 배지에서 배양한 미생물배양액을 제제하여 포트 및 포장에서 살선충 효과를 확인하였다. 최적화된 배지조성은 리터당 glycerol 10 g, soybean meal 10 g, NaCl 1 g, $CaCO_3$ 2 g, $K_2HPO_4$ 0.125 g 이었으며, 활성균주를 배양하여 농축한 후 액상 및 분말 미생물제제를 제조하였다. 제제에는 소나무재선충 공생미생물에 대하여 가장 효과적으로 항균활성을 나타내는 kanamycin을 첨가하여 사용하였다. 포트시험, 예비포장 시험 및 본포장 시험을 통하여 소나무재선충 방제효과를 확인한 결과, 액상제제를 수간수사하여 처리한 경우 1회처리시 고사율 53%, 5회 분할처리시 28%로 분할처리가 1회처리보다 2배 가량 효과적이었고, 배양농축액을 분할처리한 경우에서는 대조구의 고사율 100%에 대하여 고사율 10% 이내로 가장 낮게 나타났다.
작물 근권 토양으로부터 분리한 5,000여 길항 균주로부터 Erwinia 및 Pseudomonas등의 세균과 Trichoderma, Colletotrichum 등 곰팡이의 성장을 동시에 억제하는 Bacillus sp. N 32 균주를 선발 동정 하였다. 특히 Bacillus sp. N32 균주는 고추 탄저병균인 Colletotrichum gloeosporioides에 대하여 열에 저항성이 있는 단백질과 열에 민감한 단백질의 2종류의 항균 단백질을 동시에 생산함을 단백질 침전과 활성 검정을 통하여 확인하였다. 이 항균 단백질들을 FPLC를 이용한 gel filtration chromatography방법으로 분리한 후 SDS-PAGE와 bioautography로 항균력을 확인하였다. 또한 이 항균 단백질의 유전자들을 선발하기 위하여 기존의 알려진 그람양성 세균의 대표적인 열 저항성 항균 펩타이드 생합성 유전자 서열을 primer로 이용한 PCR 방법으로 fengycin의 생합성 유전자 단편을 분리하고 이 PCR 산물을 이용하여 Bacillus sp. N32 균주의 cosmid library로부터 fengycin의 생합성 유전자 cluster중 일부를 분리하여 염기서열을 분석하였다. 또한 열에 민감한 항균 단백질 생산 유전자는 이 항균 단백질을 SDS-PAGE 및 electroblotting으로 분리한 뒤 N-terminal 부위의 15개의 아미노산 서열을 분석하고 이를 DNA 염기배열로 치환한 다음 probe로 이용하여 ${\lambda}-ZAP$ library로부터 항균 단백질 생산 유전자가 포함된 다수의 clone을 선발하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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