본 연구는 알킬화제를 처리한 CHO-K1 세포에서 DNA 복제억제와 그 회복과정의 분자론적 기작을 규명할 목적으로 방사선 이중 표지에 의한 DNA 합성율의 측정, 알칼리 자당 농도구배 초원심분리법에 의한 DNA 분자량과 후복제 회복율을 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) 1mM methyl methanesulfonate (MMS)와 1nM N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) 이하의 낮은 농도의 처리군에서는 DNA 합성율이 급격히 감소하였으나, 2 mM MMS, 2mM MNNG이상의 농도에서는 그 감소양상이 둔화되었다, (2) DNA 합성율은 알킬화제의 처리 직후 감소하였다가 시간경과에 따라 회복되어 처리후 4시간 째에는 대조군 수준 또는 그 이상으로 회복되었다.
HeLa $S_3$ 細胞를 재료로 DNA 回復合成에 미치는 Methyl methanesulfonate(MMS)와 thymidine 相似體(BUdR, IUdR)의 이중효과를 농도와 시간변화에 따라 $^3 H$-thymidine 처리에 의한 自記放射法으로 조사한 결과는 다음과 같다. 1. MMS를 단독 처리한 경우 標識細胞의 빈도는 MMS의 농도 증가에 따라 증가한다. 이는 DNA 回復合成을 한 細胞의 빈도가 증가한 결과로 細胞當 Grain 數의 증가현상과 일치한다. 시간변화에 따른 DNA 回復合成은 MMS와 $^3 H$-thymidine 처리후 2$\\sim$3시간에 최대증가율을 보인다. 2. BUdR 또는 IUdR의 단독처리후 DNA 回復合成을 일으키지 않는다. 그러나 MMS와 이중 처리할 경우 標識細胞, DNA 回復合成細胞, 그리고 細胞當 Grain 數는 MMS 단독 처리한 경우보다 훨씬 증가한다. 따라서 이 두 물질은 MMS에 의한 DNA 回復合成을 효과적으로 증가시키는 感受性物質로 작용함이 판명되었다.
Methyl methanesulfonate (MMS) was fed to Drosophila melnogaster in order to investigate its toxic capability at developmental and adult stages, and the hereditary effect of toxicity and the potency for induction of sex-linked lethal mutation during the slyer-matogenesis by the means of an attached-X method. In the control group, the egg to adult viability of D. melnogaster was 95.2%, while 3. 5mM and 5.0mM treated groups were 90.0% and 84.1%, respectively. In the case of their progenies (Fl), the viability was 96.9% in the control group, while 3.5mM and 5.0mM treated groups were 54.5% and 1.6%, respectively. Therefore, these differences between two generations show significant physiological toxic effects in the next generation. In the parental generation, the developmental time was calculated 11.05 days in the control group, 12.43 days In 3.5%mM treated group, and 13.23 days in 5.0mM. In the case of Fl it was estimated 10.35 days in the control group, and 11.43 days In 3.5mM treated group. Compared with the control groups In two generations, the developmental time generally delayed as the dose of MMS increased. As to the sex-ratio, there was no differences between the control and MMS treated groups. The toxic values of adult stage showed which increased the frequency of mortality with MMS concentrations. The mortality at 120hr In the control group was 1.67% and it in 0.5mM MMS treated group 3.33%. In 2.5mM MMS treated group, it was 33.3% at 72hr, and it 95% at 120hr The increase of the morality was shown from 72hr in 4.0mM treated group which was 100% at 96hr. There was the concentration-dependent induction of sex-linked lethal mutation during the spermatogenesis by means of an attached-X method, MMS had more pronounced effect in sperm and spermaid stages in D. melnogaster.
Argonaute 2 (AtAGO2) is a well characterized effector protein in Arabidopsis for its functionalities associated with DNA double-strand break (DSB)-induced small RNAs (diRNAs) and for its inducible expression upon ${\gamma}$-irradiation. However, its transcriptional regulation depending on the recovery time after the irradiation and on the specific response to DSBs has been poorly understood. We analyzed the 1,313 bp promoter sequence of the AtAGO2 gene ($1.3kb_{pro}$) to characterize the transcriptional regulation of AtAGO2 at various recovery times after ${\gamma}$-irradiation. A stable transformant harboring $1.3kb_{pro}$ fused with GUS gene showed that the AtAGO2 is highly expressed in response to ${\gamma}$-irradiation, after which the expression of the gene is gradually decreased until 5 days of DNA damage recovery. We also confirm that the AtAGO2 expression patterns are similar to that of ${\gamma}$-irradiation after the treatments of radiomimetic genotoxins (bleomycin and zeocin). However, methyl methanesulfonate and mitomycin C, which are associated with the inhibition of DNA replication, do not induce the expression of the AtAGO2, suggesting that the expression of the AtAGO2 is closely related with DNA DSBs rather than DNA replication.
This study was performed to examine the availability of using medaka (Oryzias latipes) in teratological test. Medaka embryos were collected within 2 hours post-fertilization and cultured in petri dishes containing buffered saline until hatching. The embryos were treated with 0.56 mg/l chlorpyrifos-methyl and 10 mM methyl methanesulfonate at 20 stages (about 35 hours post-fertilization). Eleven developmental features were selected and observed from 33 stages (about 9 days post-fertilization). Scoring system was developed and applicated for the measurement of potential teratological effects by the test compound. Chlorpyrifos-methyl did not induce teratological effect in medaka embryos. However, we found teratological test using medaka embryo reduced the cost, labors, period and space of experiment significantly compared with teratological study using rodents. Above findings strongly suggest that medaka embryo can be used as a lab animal model for teratogenicity test instead of rodents.
染色體의 構造的인 異常에 미치는 Methyl methanesulfonata (MMS)와 thymidine 相似體 (BUdR, IUdR)의 영향을 究明하기 위해 사람의 白血球 培養細胞에 2.0mM의 BUdR 또는 IUdR을 24時間 前 처리하고 이어 농도를 달리한 MMS $(0.0\\sim 2.0 mM)$를 1時間 처리한 뒤 24時間째 染色體標本을 작성하여 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. MMS를 단독 처리한 對照區에서는 관찰된 染色體 異常型의 대부분이 예상외로 染色分體 異常型을 나타냈다. 2. BUdR 또는 IUdR의 단독처리도 染色體異常을 유발한다. 또한 MMS와 이중 처리한 경우에는 단독 처리보다 染色體異常型이 훨씬 증가한다. 따라서 thymidine 相似體는 MMS에 의한 染色體 異常型을 變化시켜주는 感受性物質로 作用함이 판명되었다.
Recently, single cell gel electrophoresis, also known as comet assay, is widely used for the detection and measurement of DNA strand breaks in vitro and in vivo in many toxicological fields such as radiation exposure, human monitoring and toxicity evaluation. As well defined, comet assay is a sensitive, rapid and visual method for the detection of DNA strand breaks in individual cells. Briefly, a small number of damaged cells suspended in a thin agarose gel on a microscope slide were lysed, unwinded, electrophoresed, and stained with a fluorescent DNA binding dye. The electric current pulled the charged DNA from the nucleus such that relaxed and broken DNA fragments migrated further. The resulting images which were subsequently named for their appearance as comets, were measured to determine the extent of DNA damages. However, some variations could be occurred in procedures, laboratories's conditions and kind of cells used. Hence, to overcome and to harmonize these matters in comet assay, International Workshop on Genotoxicity Test Procedure (IWGTP) was held with several topics including comet assay at Washington D.C. on March, 1999. In spite of some consensus in procedures and conditions in IWGTP, there are some problems still remained to be solved. In this respect, we attempted to set the practical optimal conditions in the experimental procedures such as lysis, unwinding, electrophoresis and neutralization conditions and so on. First of all, we determined optimal lysis and unwinding time by using 150 $\mu$M methyl methanesulfonate (MMS) which is usually used concentration. And then, we determined optimal positive control concentrations of benzo(a)pyrene (BaP) and MMS in the presence and absence of S9 metabolic activation system, respectively.
여러가지 환경 stress에서 유도되는 폐렴구균 열충격단백질 GroEL의 특성에 대하여 검토하였다. 비병원성인 폐렴구균(Streptococcusa pneumoniae)을 사용하여 stress 조건을 설정하고 이 설정된 조건에서 stress에 의해 유도되는 단백질을 $^{35}S$]-methionine으로 표지하여 autoradiography를 실시하였다. 열충격을 가했을 때 유도되는 단백질(65, 73, 84-kDa 등) 중 65 kDa의 단백질(hsp65)을 DEAE-Sepharose ion exchange 및 ATP-agarose affinity chromatography를 이용하여 분리 정제하였으며 hsp65에 대해 생성된 항체를 이용하여 immunoblot을 실시하였을 때 약 60 kDa의 대장균 단백질과 반응하였으며 정제된 폐렴구균 hsp65가 대장균의 anti-GroEL monoclonal 항체와 반응함으로써 폐렴구균 hsp65가 대장균GroEL과 유사한 단백질임을 확인하였다.
Kim, Seung-Hee;Han, Hyung-Mee;Kang, Seog-Youn;Jung, Ki-Kyung;Kim, Tae-Gyun;Oh, Hye-Young;Lee, Young-Kyung;Rheu, Hang-Mook
Archives of Pharmacal Research
/
제22권5호
/
pp.474-478
/
1999
Modulation of unscheduled DNA synthesis by dehydroepiandrosterone (DHEA) after exposure to various chemical carcinogens was investigated in the primary rat hepatocytes. Unscheduled DNA synthesis was induced by treatment of such direct acting carcinogens as methly methanesulfonate (MMS) and ethyl methanesulfonate (EMS) or procarcinogens including benzo(a)pyrene (BaP) and 7, 12-dimethylbenz(a)anthracene (DMBA). Unscheduled DNA synthesis was determined by measuring [methyl-3H]thymidine radioactivity incorporated into nuclear DNA of hepatocytes treated with carcinogens in the presence or absence of DHEA. Hydroxyurea $(5{\times}10^{-3} M)$was added to growth medium to selectively suppress normal replication. DHEA at concentrations ranging from $(1{\times}10^{-6} M)$ to$(5{\times}10^{-4} M)$ did not significantly inhibit unscheduled DNA synthesis induced by either MMS $(1{\times}10^{-4} M)$ or EMS $(1{\times}10^{-2} M)$. In contrast, DHEA-significantly inhibited unscheduled DNA synthesis induced by BaP $(6.5{\times}10^{-5} M)$ and DMBA.$(2{\times}10^{-5} M)$. DHEA-induced hepatotoxicity in rats was examined using lactate dehydrogenase (LDH) release as an indicator of cytotoxicity. DHEA exhibit no significant increase in LDH release compared with the control at 18 h. These data suggest that nontoxic concentration of DHEA does not affect the DNA excision repair process, but it probably influence the enzymatic system responsible for the metabolic activation of procarcinogens and thereby decreases the amount of the effective DNA adducts formed by the ultimate reactive carcinogenic species.
A chemical mutagenesis technique was employed for development of mutant strains of Sparassis crispa targeting the shortened cultivation time and the high ${\beta}$-glucan content. The homogenized mycelial fragments of S. crispa IUM4010 strain were treated with 0.2 vol% methyl methanesulfonate, an alkylating agent, yielding 199 mutant strains. Subsequent screening in terms of growth and ${\beta}$-glucan content yielded two mutant strains, B4 and S7. Both mutants exhibited a significant increase in ${\beta}$-glucan productivity by producing 0.254 and 0.236 mg soluble ${\beta}$-glucan/mg dry cell weight for the B4 and S7 strains, respectively, whereas the wild type strain produced 0.102 mg soluble ${\beta}$-glucan/mg dry cell weight. The results demonstrate the usefulness of chemical mutagenesis for generation of mutant mushroom strains.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.