Magnetic beads (Dynabeads$^{(R)}$) embedded in ~1 micron size polystyrene beads bearing surface carboxylic acid groups were modified with aminobenzyl ethylenediaminetetraacetic acid (ABEDTA) to concentrate or separate metal ions using pH gradients on micro and nano scales. The immobilization of ABEDTA was achieved by amide formation. The presence of the metal chelating functional group in the fully deprotonated form was confirmed by FT-IR. The chelation efficiency of beads was tested by determining metal ions in supernatant using GFAAS when pH gradients from 3 to 7. Mixtures of Cu and Mg and of Cd and Mn (at 10 ng/mL of metal) were separated as the difference in formation constant with the functional group of ABEDTA. The separation was repeated twice with relative standard deviation of <18%. A polydimethylsiloxane (PDMS) microchip column packed with EDTA-coated magnetic beads was optimized to concentrate metal ion for practical applications by eluting a Cu solution of micro scale at pH 3.
Benthic diatoms are known as a good food for shellfish in nature and in commercial hatchery of Jeju Island, Korea. Grammatophora marina is commonly found as dominant benthic micro-algae in Jeju coastal waters throughout the year. To know the best growth conditions of this species, culture was done in terms of three parameters; water temperature, salinity and nutrients. Each parameter was controlled by temperature of 15, 20 and 25°C; salinity of 25, 30 and 35 psu; and nutrient concentrations of 50, 100 and 200%. F/2 media was used with artificial seawater for the culture, which was continued for two weeks with L:D cycle 12:12 by using fluorescent light. Maximum specific growth rate was recorded 1.68 d–1 at temperature of 25°C with salinity of 35 psu and nutrient concentration of 200% on 6th day during the culture period. Maximum biomass was also observed 4.9 × 105 cells mL–1 in the same condition. This species may belong to the euryhaline and eutrophic habitat with warm condition. For nutritional aspects of this species, protein, lipid and carbohydrate were measured. The value of protein, lipid and carbohydrate was 4.96%, 15.82% and 5.65%, respectively. The antioxidant activities of 80% methanolic extract were 46.7%, 23.7% and 23.8% on DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylydrazy) radical, superoxide anion radical and hydrogen peroxide scavenging, respectively. Percentage metal chelating activity was 81.2%. Enzymatic extracts of Alcalase and Ultraflow showed remarkable scavenging activities on DPPH radical (86.5% and 57.2%, respectively), and superoxide anion scavenging activities were 45.3% and 41.4% from Kojizyme and Viscozyme extracts, respectively. Extract of Protomex revealed 24.8% activity on hydrogen peroxide and Neutase showed 30.8% on hydroxyl radical scavenging effects. Celluclast and Viscozyme extracts showed 33.2% and 32.1% activities on nitric oxide scavenging, respectively, while Alcalase showed 61.5% on metal chelating. This species contains higher lipids among the biochemical compounds and higher metal chelating activities from both 80% methanolic and enzymatic extracts.
Enzymatic extracts were prepared from the blueberry (Vaccinium corymbosum L.) collected in Jeju, Korea. Five carbohydrases namely AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo and Viscozyme, and five proteases namely Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase and Protamex were used to prepare the enzymatic extracts. Antioxidant properties of each extracts were studied using stable 1,1-diphenyl 2-picrylhydrazyl (DPPH), reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO) scavenging, metal chelating assays and lipid peroxidation inhibitory activity in hemoglobin-induced linoleic acid system. The phenolic content of all enzymatic extracts was in the range of 517.85-597.96 mg/100 g dried sample. DPPH and NO${\cdot}$scavenging, and metal chelating assays exhibited prominent activities. Viscozyme showed the highest DPPH activity $(0.046{\pm}0.002\;mg/mL)$ while AMG Showed the highest activity in NO${\cdot}$scavenging $(0.339{\pm}0.011\;mg/mL)$. All the extracts exhibited strong metal chelating activities. Blueberry enzymatic extracts also showed relatively good activity in hydrogen peroxide scavenging. AMG showed the highest lipid peroxidation inhibitory activity $(0.28{\pm}0.01\;mg/mL)$ in hemoglobin-induced linoleic acid system. In this results, the blueberry, which has potential antioxidant components, may be a good candidate as a natural antioxidant source.
Chitin was isolated from crab shell. Chitosan, which was prepared by the deacetylation of chitin, was acylated to obtain N-acetyl(regenerated chitin), N-propionyl, N-butyryl, N-hexanoyl, N-decanoyl and N-maleated chitosans and their metal ion adsorption characteristics of N-acylchitosans were investigated. In order to enhance the adsorptivity, their porous beads were prepared and their adsorptivity with respect to the porosity and the adsorptivities for metal ions($Cu^{2+}$, $Ni^{2+}$, $CO^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Ag^{+}$)were investigated. Their metal ion adsorptivities were remarkably imporved compared to those of chitin. As the larger acyl groups were introduced, adsorptivity increased, but that of N-decanoyl chitosan showed some decrease because of steric hindrance of the bulky N-decanoyl group. N-Maleated chitosan containing carboxyl group showed highly improved adsorptivity, and N-acylchitosans showed the good selective adsorption in the mixed metal ions($Cu^{2+}$, $Ni^{2+}$, $CO^{2+}$, $Mn^{2+}$ and $Ag^{+}$). They also showed excellent adsorption characteristics as chelating polymers.
Gwan, Won Jong;Yu, Chang Eun;Jang, Won Seok;No, Yeong Seok;Seo, Jeong Hun
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.21
no.4
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pp.393-400
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2000
2,2¢-Dihydroxyazobenzene (DHAB) was attached to poly(ethylenimine) (PEI) to obtain DHAB-PEI. Spectral titration revealed that uranyl, Fe(III), Cu(II), and Zn(II) ion form 1 : 1-type complexes with DHAB attached to PEI. Formation constants for the metal complexes formed by the DHAB moieties of DHAB-PEI were mea-sured by using various competing ligands. The results indicated thatthe concentrations of uranyl, Fe(III), and Cu(II) ions can be reduced to 10 -16 -10 -23 M at p 8 with DHAB-PEI when the concentration of the DHAB moiety is 1 residue M. By using cyanuric chloride as the coupling reagent, DHAB-PEI was immobilized on Sephadex G-25 resin to obtain DHAB-PEI-Seph. Binding of uranyl,Fe(III), Cu(II), and Zn(II) ion by DHAB-PEI-Seph was characterized by using competing ligands. A new method has been developed for characteriza-tion of metal sequestering ability of a chelating resin. Formation constants and metal-binding capacity of two sets of binding sites on the resin were estimated for each metal ion. DHAB-PI-Seph was applied to recovery of metals such as uranium,Fe, Cu, Zn, Pb, V, Mn, and W from seawater. The uranium recovery from seawaterby DHAB-PEI-Seph does not meet the criterion for economical feasibility partlydue to interference by Fe and Zn ions. The seawater used in the experiment was contaminated by Fe and Zn and, therefore, the efficiency of uranium extractionfrom seawater with DHAB-PEI-Seph could be improved if the experiment is carried out in a cleaner sea.
To adapt to environmental changes and to maintain cellular homeostasis, microorganisms adjust the intracellular concentrations of biochemical compounds, including metal ions; these are essential for the catalytic function of many enzymes in cells, but excessive amounts of essential metals and heavy metals cause cellular damage. Metal-responsive transcriptional regulators play pivotal roles in metal uptake, pumping out, sequestration, and oxidation or reduction to a less toxic status via regulating the expression of the detoxification-related genes. The sensory and regulatory functions of the metalloregulators have made them as attractive biological parts for synthetic biology, and the exceptional sensitivity and selectivity of metalloregulators toward metal ions have been used in heavy metal biosensors to cope with prevalent heavy metal contamination. Due to their importance, substantial efforts have been made to characterize heavy metal-responsive transcriptional regulators and to develop heavy metal-sensing biosensors. In this review, we summarize the biochemical data for the two major metalloregulator families, SmtB/ArsR and MerR, to describe their metal-binding sites, specific chelating chemistry, and conformational changes. Based on our understanding of the regulatory mechanisms, previously developed metal biosensors are examined to point out their limitations, such as high background noise and a lack of well-characterized biological parts. We discuss several strategies to improve the functionality of the metal biosensors, such as reducing the background noise and amplifying the output signal. From the perspective of making heavy metal biosensors, we suggest that the characterization of novel metalloregulators and the fabrication of exquisitely designed genetic circuits will be required.
New chelating ligands, thiocatechol and p-chlorothiocatechol, have been synthesized and the acid dissociation constants were determined by potentiometric method in 50% dioxane-water; $pK_1 \;and\; pK_2$ were 7.28, 10.97 for thiocatechol and 6.37, 10.22 for p-chlorothiocatechol, respectively. Color reactions with various metal ions were studied. It was found that the above ligands are specific for Bi(III), Mo(VI) and W(VI) as an analytical reagent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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