포도낭미충증을 포함한 유구낭미충증 환자의 신경외과적 수술 과정에서 수거한 낭미충 낭액의 성분 단백질을 비교 검토하였다. 7.5% gel에서 Disc-PAGE와 reducing condition의 10~15% gel에 SDS-PAGE를 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 7.5% gel에서 실시한 Disc-PAGE 소견상 제주도와 Ecuador에서 수집한 돼지의 유구낭미충 낭액은 U, A, B, C, E, S의 6개 band로 구성되어 있었고 그 중 band C가 주 구성 성분이었다. 그리고 인체에서 수집한 낭액 은 band C가 주 구성 성분이었고 경우에 따라 band E가 주 구성 성분으로 관찰되고 있었다. 정상 뇌척수액은 band C, E 위치에서 ${\gamma}-globulin$과 albumin이 보이고 있었다. 2. 10~15% gel에서 실시한 SDS-PAGE상 제주도 낭액은 최소 25개 이상의 subunit로 구성되어 있었고 그 중 95, 64, 48, 39, 34, 24, 15, 10및 7 kDa band가 주 구성 성분이었다. 그리고 Ecuador감염 돼지의 유구낭미충 낭액은 전체적으로 비슷했으나 48, 39, 34, 24 kDa band가 의미한 반면 21, 17 kDa가 진하게 염색되었다. 인체 뇌낭미충증 환자에서 수집한 낭액들은 15~21개 정도의 band가 보이고 있었다. 그 중 94, 64, 15, 10 그리고 7 kDa band는 모든 낭액에 공통적으로 포함되어 있었다. 한편, 정상 뇌척수액의 SDS-PAGE에서는 77, 66 (albumin), 55 (heavy chain of ${\gamma}-globulin$), 22.5 (light chain of ${\gamma}-globulin$) 그리고 17 kDa band가 보였다. 환자의 낭액은 77, 66, 55, 22.5 kDa에서 진하게 염색되는 경우가 있었다. 이상의 결과로 인채 유구낭미충증에서 수집한 낭액에도 15, 10, 7kDa의 subunit로 구성된 150kDa의 band C protein이 주 성분으로 구성되어 있으며 수술장에서 수집하는 과정에서 뇌척수액이 섞이는 경우가 많음을 알 수 있었다.
Kim et at.(1986)은 유구낭미충 낭액을 감작시켜 만든 단세포군 항체를 CNBr활성화 Sepharose 4B에 연결시켜 친화성 크로마토그래피를 실시하고 낭액에서 A-항원을 분리한 바 있다. 이 연구는 그 항원 단백질의 생화학적 성상을 관찰한 것이다. Disc-PAGE에 의해 4.5~10% 폴리아크릴아마이드 젤에서 나타내는 Rf간을 기초로 분자량을 측정한 결과 A 항원의 분자량은 150,000 dalton이었다. A-항원은 SDS-PAGE에서 15,000, 10,000, 7,000 dalton에 해당하는 polypeptide로 분획이 구별되었다. 10% 2-mcrcaptoethanol로 처리하지 않거나 $95^{\circ}C$에서 5분간 처리하지 않은 A-항원의 SDS-PAGE에서는 7,000 dalton의 polypeptide가 분리되지 않았다. A-항원의 등전점(PI)은 pH6.8이었다. 낭액항원의 각 분획에 반응하는 항체를 갖는 환자혈청으로 A-항원을 SDS-PAGE/EITB한 바 환자혈청은 15,000, 10,000, 7,000 dalton에 해당하는 부위에서만 반응하였다. 낭액 단백질의 약70%를 차지하는 A-항원은 면역학적으로 내열성을 가졌으며 포충(hydatid cyst) 낭액 항원중 Oriol et at.(1971)의 "Antigen B"와 생화학적 성상이 비슷한 단백질이었다.
Wnt proteins are a family of secreted glycoproteins that are evolutionarily conserved and considered to be involved in extensive developmental processes in metazoan organisms. The characterization of wnt genes may improve understanding the parasite's development. In the present study, a wnt4 gene encoding 491amino acids was amplified from cDNA of metacestodes of Taenia solium using reverse transcription PCR (RT-PCR). Bioinformatics tools were used for sequence analysis. The conserved domain of the wnt gene family was predicted. The expression profile of Wnt4 was investigated using real-time PCR. Wnt4 expression was found to be dramatically increased in scolex evaginated cysticerci when compared to invaginated cysticerci. In situ hybridization showed that wnt4 gene was distributed in the posterior end of the worm along the primary body axis in evaginated cysticerci. These findings indicated that wnt4 may take part in the process of cysticerci evagination and play a role in scolex/bladder development of cysticerci of T. solium.
1994년 4월 부터 10월까지 춘천시내 한 동물농장에서 시궁쥐를 잡아 간파 장에서 윤충의 감염상 태를 조사하였다. 모두 43마리 가운데서 간모세선충 11예 축소조충 14예 고양이조충의 조충애벌레(metacestode)가 28예에서 발견되었다. 이 시궁쥐들은 조사 지역의 인수공통감염증의 원천이 될 수 있다.
뇌 유구낭미충증 진단에는 영상진단을 가장 널리 이용하고 있으나 낭미충증의 영상진단은 감염충체수, 감염경과 기간, 감염위치 및 포도낭미충 존재여부 등에 따라 소견이 매우 다양하므로 감별진단에 도움이 되는 혈청학적 진단이 요구된다. 이때에 이용하는 혈청학적 진단 방법은 특이항체를 혈청이나 뇌척수액에서 증명하는 것이나 몇 가지 경우에 위음성 반응을 나타내어 민감도가 낮은 결점이 있다. 민감도가 낮은 경우를 해결하는 방법으로시, 또 기생충에서 유래하는 특이항원을 측정함으로써 항체측정 때 나타나는 교차반응을 최소화하고, 충체검 출에 준하는 진단방법으로서 유구낭미충 특이항원을 환자 혈청 및 뇌척수액에서 측정하는 연구를 시도하고 있다. 이 연구에서는 유구낭미층중 환자에서 이중항체-효소면역 측정 법을 실시하여 유구낭미충의 낭액 항원의 구성 단백질을 측정하였다. 항원반응용 항체로는 낭액으로 감작시킨 토끼혈청과, 낭액을 구성하는 단백질중 150 kDa 에만 반응하는 단클론항체를 이용하였다. 이중항체-효소면역측정 법으로는 150 kDa단백질을 8ng/ml까지 측정할 수 있었고, 61ng/m1 이상에서는 농도에 따른 흡광도 차이가 적었다. 이 방법으로 스파르가눔, 간흡충, 폐흡충, 요꼬가와흡충, 간질, 고래회충 제 3기유충 및 선모충 등의 생리식염수 추출액을 검색한 바 모두 음성반응이어서 특이도가 높다고 판단하였다. 뇌 유구낭미충증으로 진단한 환자 255명의 혈청 351개를 측정한 바 측정 가능범위 에 미치지 못하여 모두 음성이었다. 환자 212명에서 얻은 뇌척수액 276개 중 31개 (11.2%)는 양성이었다. 이와 같이 민감도가 낮아 항인측정법은 진단용으로 이용하기 어렵다고 생각하였다. 뇌척수액에서 150kDa단백질이 증 멸된 환자는 프라지관텐 치료 후 2일이 경과한 경우, 그리고 약제치료에도 불구하고 임상결과가 불량하여 결국 외과적으로 충체를 제거한 바 낭벽이 초점 성으로 변성된 포도낭미충에 감염되었던 환자의 뇌척수액에서 불규칙하게, 양적으로는 일정하지 않게 출현하였다. 150kDa 단백질은 뇌 낭종성 병변에서 채취한 낭미충 낭액에서도 측점할 수 있었다. 그리고 150kDa단백질의 농도가 61 ng/ml이상인 뇌척수액이나 외과적으로 얻은 낭액으로 SDS-폴리아크릴아미드 전기영동을 실시하여 150kDa 단백질의 subunit인 15, 10, 7kDa를 증명할 수 있었다.
Yoon Kong;Seung-Yull Cho;Suk-Il Kim;Shin-Yong Kang
Parasites, Hosts and Diseases
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제30권3호
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pp.209-218
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1992
혈청이나 뇌척수액에서 특이항체를 증명하여 유구낭미충증을 진단함에 있어 유구낭미충의 낭액이 가장 민감하고도 특이한 항원임은 이미 알려졌다. 낭액을 항원으로 사용하여도 다른 기생충증과 빈도는 낮지만 교차반응이 발생하므로 교차반응을 일으키는 구성단백질에 대하여 더 관찰할 필요가 있다. 이 연구에서는 유구낭미충 낭액을 Sephacryl S-300 Superfine 젤로 분획하고, 낭액 및 그 분획이 낭액을 면역시켜 만든 토끼 항혈청 (RACF)과 반응하는 양상을 면역전기영동법으로 관찰하여 낭액의 구성 단백질의 성질을 분석하고자 하였다. 유구낭미충 장액을 젤여과법으로 분획하면 제 3분회과 제 4분회에 단백질이 가장 많이 포함되었다. 제 3분획은 disc-PAGE상 분자량 150 kDa인 것으로 이미 알려진 Band C가 주(주) 구성 단백질이었다. 제 4분획은 분자량이 약 65kDa일 것으로 추정되는 Band N 단백질이 주 구성단백질이었다. 낭액에 대한 토끼 항혈청을 낭액과 면역전기영동법으로 반응시키면 주 침강대 2개와 작은 침강대 7∼8개를 형성하였는데 낭액의 제 3분획은 주 침강대 중 밖에 위치한 긴 침강대를 형성한 반면, 제4분획은 주 침강대 중 안쪽으로 위치한 짧은 침강대를 형성하였다. 유구낭미충과 혈청학적 교차반응을 가장 많이 일으키는 포충(포충, hydatid cyst)의 낭액과 RACF(유구낭미충 낭액에 대한 토끼 항혈청)을 면역전기영동법으로 반응시킨 바, 제 4분획이 반응한 위치에서 침강대를 형성하여 제 4분획의 주구성 단백질이 포충증과의 혈청학적 교차반응의 원인인 것으로 추정하였다. 유구낭미충증으로 이미 진단한 환자의 혈청 중 효소면역 측정 법으로 항체가가 매우 높았던 혈청 8개를 선택하여 유구낭미충 낭액 및 유구낭미충 충체 추출액과 각각 면역전기영동법으로 반응시킨 바 각각 7명에서 침강대를 형성하였고, 제 3분회 및 제 4분회으로 면역전기영동법으로 반응시킨 환자혈청 4개 중에서는 제 3분획에서는 4개 모두가 침강대를 형성한 반면 제 4분 회에서는 침강대가 혈청 2개에서 형성되었다.
Six cystic metacestodes were found in the abdominal muscles of a wild rabbit, Lepus sinensis, in China. The coenurus contained one or more scolices armed with hooklets. Mitochondrial cox1 (1,623 bp) confirmed 98% homology with cox1 of Taenia serialis. This is the first report of T. serialis infection in an intermediate host in the Qinghai Tibetan Plateau Area, China.
Epidemiological situation of taeniasis in Mongolia was assessed based on mitochondrial DNA identification of the parasite species. Multiplex PCR was used on a total of 194 proglottid specimens of Taenia species and copro-PCR and loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assays were utilized for detection of copro-DNA of 37 fecal samples from taeniasis patients submitted to the Mongolian National Center for Communicable Diseases (NCCD) from 2002 to 2012. In addition, 4 out of 44 calcified cysts in beef kept in formalin since 2003 were evaluated for histopathological confirmation of cattle cysticercosis. All proglottid specimens and stool samples were confirmed to be Taenia saginata by multiplex PCR and by copro-PCR and LAMP, respectively. Cysts collected from cattle were morphologically confirmed to be metacestodes of Taenia species. T. saginata taeniasis was identified from almost all ages from a 2-year-old boy up to a 88-year-old woman and most prominently in 15-29 age group (37%, 74/198) followed by 30-44 age group (34.8%, 69/198 ) from 15 of Mongolia's 21 provinces, while cattle cysticerci were found from 12 provinces. The highest proportion of taeniasis patients was in Ulaanbaatar, the capital of Mongolia.
Morphological characteristics of Mesocestoides lineatus tetrathyridia collected from Chinese snakes and their adults recovered from experimental animals were studied. The tetrathyridia were detected mainly in the mesentery of 2 snake species, Agkistrodon saxatilis (25%) and Elaphe schrenckii (20%). They were 1.73 by 1.02 mm in average size and had an invaginated scolex with 4 suckers. Adult tapeworms were recovered from 2 hamsters and 1 dog, which were orally infected with 5-10 larvae each. Adults from hamsters were about 32 cm long and those from a dog were about 58 cm long. The scolex was 0.56 mm in average width with 4 suckers of 0.17 by 0.15 mm in average size. Mature proglottids measured 0.29 by 0.91 mm (av.). Ovaries and vitellaria bilobed and located in the posterior portion of proglottids. The cirrus sac was oval-shaped and located median. Testes were follicular, distributed in both lateral fields of proglottids, and 41-52 in number per proglottid. Gravid proglottids were 1.84 by 1.39 mm (av.) with a characteristic paruterine organ. Eggs were 35 by $27{\mu}m$ in average size with a hexacanth embryo. These morphological characteristics of adult worms were identical with those of M. lineatus reported previously. Therefore, it has been confirmed that the tetrathyridia detected in 2 species of Chinese snakes are the metacestodes of M. lineatus, and 2 snake species, A. saxatilis and E. schrenckii, play the role of intermediate hosts.
현재 인체에는 기새하는 Taenia 조충으로는 돼지고기 유구낭미층(Cysticercus cellulosae)을 먹어서 감염되는 Taenia solium Linnaeus 1785과 쇠고기의 무구낭미층(Cysticercus bovis)을 먹어서 감염되는 Taenia saginata Goeze 1782 두 종이 알려져 있다. 한편 인체에 기생하는 제 3의 Taenia 조충으로 최근 타이완, 한국, 인도내시아, 태국, 필리핀 등 아시아국가를 중심으로 발견되는 Asian Taenia saginata 조충은 돼지나 소의 간 또는 내장에 있는 내장형낭미충을 먹어서 감염되는 것으로 추정된다. 그러나 이러한 생활사상의 구분에도 불구하고 형태하적으로는 본충이 Taenia saginate Groeze 1782와 유사하기 때문에 아직 신종으로 인정되지 않은 상태이다. 이에 연구자들은 Asian Taenia saginata 조충의 형태학적 구분점을 새로이 발견하고 학명으로서 Taenia asiatica sp.n.(한국명:아시아조총)을 제시하고자 한다. 감별적으로는 1.선충의 두절에 있는 액취의 존재, 2. 성충의 수태편절에서 관찰되는 자궁세지의 수, 3.성충의 수태관절에서 관찰되는 미돌기의 존재 및 4.유추의 낭벽표면에서 관찰되는 사마귀양 구조가 광학 및 전자현경적으로 관찰되었다. 이중 '자궁세지'와 '미돌기'는 새로이 관찰하여 기재하는 구조물로서 처음으로 Taeniid의 종감별에 사용하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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