Reactive humsn mesothelial cells were examined by immunocytochemical stain with intermediate filaments (cytokeratin [CK1, CK7, CK8, CK18, CD19), vimentin, desmin, actin), epithelial membrane antigen, carcinoembryonic antigen (CEA), MHC class II antigen (HLA-DR), LeuM-1 (CD15), $\alpha1-antitrypsin$(ACT), $\alpha1-antichymotrypsin$ (ACHT), CD68(KP-1) and FcyRIII(CD16). The mesothelial cells were isolated from patients with liver cirrhosis and pleural effusion, and short-term cultured in RPMI 1640 media containing 10% heat inactivated fetal calf serum and 1% identical supernatant fluid of the patients' transudates. The results obtained are as follows 1. The cultured-reactive mesothelial cells were positive for the protein of cytoskeleton such as cytokeratin and vimentin, but negative for desmin and actin. The resting mesothelial cells showed positive reactions for cylokeratin, but negative for vimentin, desmin and actin. 2. The primary antibodies to the cytokeratin were strongly reactive for CK1, CK8 and CK18 but negative for CK7 and CK19 in both reactive and resting mesothelial cells. 3. Resting mesothelial cells showed negative reactions for CEA, but strong positive reactions in cultured-reactive mesothelial cells. 4. The markers for the monocytes/histiocytes(CD11b, CD14, CD16, CD68, Iysozyme and $\alpha1-antitrypsin$ and $\alpha1-antichymotrypsin$) were nonreactive in resting mesothelial cells, but lysozyme and $\alpha1-antitrypsin$ were weakly reactive in reactive and proliferative mesothelial cells. 5. MHC Class II molecule(HLA-DR antigen) was negative in both resting and reactive mesothelial cells. These results suggest that the short-term cultured, reactive mesothelial cells show a newly aberrant expression of the vimentin and calcine-embryonic antigen. The reason of the aberrant expression of the intermediate filament and oncofetal antigen in reactive and proliferative mesothelial cells should be further evaluated.
The cytological distinction of carcinoma cells from reactive mesothelial cells in serous effusions nay be difficult or imposslble based on morphology alone, especially In specimens containing reactive mesothelial cells which form glandular or ball- or papillary-shaped conglomerates or which mimic malignant nuclear features. Calretinin is a newly reported immunocytochemical marker for mesothelial cells, which can potentially be utilized for facilitating this distinction. This study evaluated the usefulness of calretinin for the discrimination between reactive mesothelial and metastatic carcinoma cells in serous effusion. Immunocytochemical staining was undertaken on 33 benign reactive and 87 malignant serous effusion specimens with histologically confirmed diagnoses. The specimens including smears and cell blocks were stained with polyclonal antibody to calretinin by labelled streptavidin-biotin method. The positive expression of calretinin was noted In 32(97.0%) of 33 benign reactive effusions and 9(10.3%) of 87 malignant effusions. The sensitivity and specificity of the calretinin immunostaining for reactive mesothelial cells was 97.0% and 89.7%, respectively. In conclusion, calretinin is a useful marker for distinguishing between reactive mesothelial cells and carcinoma cells in serous effusions.
Evaluation of serous effusions can include immunocytochemical stains that differentiate reactive mesothelial cell from adenocarcinoma cell. Among several positive mesothelial cell markers, we used desmin, CK5/6, WT1 and calretinin all known to have high sensitivity and specificity as selective mesothelial cell markers. We studied smears obtained with cytospin from 15 malignant and eight benign effusions. The mesothelial cells were positively stained by desmin, CK5/6, WT1 and calretinin in 60.9%, 29.1%, 26.7% and 56.5%, respectively among 8 benign and 15 malignant effusions; the adenocarcinoma cells were positively stained 6.7%, 13.3%, 1.0% and 0.0%, respectively among 15 malignant effusions. The percentage of positively stained mesothelial cells were somewhat lower for all antibodies compared to the results of previous studies. This was likely due to the differences in preparation methods and fixatives among studies. In conclusion, the use of desmin and calretinin were more valuable than CK5/6 and WT1 for distinguishing between reactive mesothelial cell and adenocarcinoma cells in serous effusion; however, choice of the proper preparation methods and fixatives are also important
Cytologic examination of the body cavity fluid is very important because the specimens represent a significant percentage of nongynecologic samples and this cytologic examination may be the first, best or only chance for making the diagnosis of an underlying malignancy. The purposes of body cavity fluid examination are to correctly identify cancer cells and if possible, to identify the tumor types and primary sites when presented with unknown primary tumor sites. The most important basic differential diagnosis is that of benign and reactive disease vs malignant disease. Reactive mesothelial cells are a consistent population in body cavity fluid, and these are the most versatile cells in the body. Due to the specific environment of the body cavity, the exfoliated reactive mesothelial cells may show significant morphologic overlap with the morphology of cancer cells. With a focus on the differential points between reactive mesothelial cells and metastatic adenocarcinoma cells, the practical diagnostic approaches, the diagnostic clues and the pitfalls to achieve a correct diagnosis are presented in this review.
The cytologic distinction of carcinoma cells from reactive mesothelial cells can be difficult, especially in specimens containing abundant reactive mesotheilal cells and inflammatory cells with scant carcinoma cells. This study evaluates the usefulness of mucin and immunocytochemistry for discrimination between reactive mesotheilal cells and carcinoma cells, and sensitivity and specificity of these stains for the detection of metastatic carcinoma in serous effusions. Immunocytochemical panel including mucin cytochemistry with the periodic acid-Schiff(PAS) reaction after or without diastase digestion was undertaken on 127 serous effusion specimens with histologically confirmed diagnoses. The specimens including cell smears and cell blocks were stained with PAS and antibodies to carcinoembryonic antigen(CEA), epithelial membrane antigen(EMA), cytokeratln(CK), and vimentin. The sensitivities of these stains for metastatic carcinoma(127 cases) were 49%(46/94) in PAS, 48%(60/124) in CEA, 89%(97/109) in EMA, 88%(93/106) in CK, and 25%(20/81) in vimentin. The sensitivities of stains for reactive mesothelial cells(36 cases) were 19%(7/36) in EMA, 78%(28/36) in CK, and 75%(27/36) in vimentin. The PAS and CEA stains were not reacted with all cases of benign reactive serous effusions containing abundant reactive mesothelial cells. The specificities of stains for metastatic carcinoma(127 cases) were 100% in PAS, 100% in CEA, 81% in EMA, 22% in CK, and 25% in vimentin. The optimal combination of stains for use in a panel was PAS and CEA. Combined results from these two stains yielded an advanced sensitivity of 8% in PAS and 4% in CEA for metastatic carcinoma. EMA was also cosiderably useful for identification of carcinoma cells. CK and vimentin were not suitable for distinguishing between reactive mesothelial cells and carcinoma cells.
A case of malignant epithelial mesothelioma of the peritoneum diagnosed by fine needle aspiration cytology is described. The smear showed many Individually scattered or clustered large round malignant epithelial cells intermingled with relatively small nonneoplastic mesothelial and mesenchymal cells. Papillary configurations with thick fibrous core were also seen. The malignant cells were virtually reminiscent of reactive mesothelial cells but they were larger in size and had more prominent nucleoli and more frequent binucleated or multinucleated cell formations than reactive mesothelial cells. The characteristic features of malignant cell of mesothelioma compared with the metastatic adenocarcinoma were relatively uniform cellular size, prominent round nucleoli, large round vesicular nuclei with finely granular chromatin pattern, smooth nuclear membrane, abundant glassy cytoplasm rather than bubbly mucin-containing cytoplasm and fuzzy cell border.
Cytologic diagnosis of reactive or malignant effusion is sometimes difficult. Especially, differentiation of benign reactive mesothelial cells from malignant cells in body effusion is more difficult. Recently, immunohistochemistry has been used to diagnose difficult cases. Phospholipase $C(PLC)-{\gamma}1$ is one of the isoenzyme of the PLC which plays central role in signal transduction involving cellular growth, differentiation and transformation by phosphorylating many protein component. Increased expression of $PLC-{\gamma}1$ in human breast carcinoma, colorectal carcinoma and stomach cancers are reported. To evaluate the efficacy of positive $PLC-{\gamma}1$ immunostaining in the diagnosis of malignancy in effusions, paraffin-embedded cell blocks of pleural fluid and ascites from 10 patients(5 metastatic adenocarcinomas, and 5 reactive mesothelial cells) were immunostained with a monoclonal antibody to $PLC-{\gamma}1$. $PLC-{\gamma}1$ immuostained all the adenocarcinomas in cell block(5/5) with intense membrane pattern, however, none of the reactive mesothelial proliferations stained with the diagnostic membrane pattern. Thus, our study strongly supports the conclusion that $PLC-{\gamma}1$ immunopositivity is likely to become a useful adjunct for the diagnosis of malignancy in effusions.
Malignant pleural mesothelioma (MPM), an aggressive malignant tumor of mesothelial origin associated with asbestos exposure, shows a limited response to conventional chemotherapy and radiotherapy. Therefore, the overall survival of MPM patients remains very poor. Progress in the development of therapeutic strategies for MPM has been limited. We recently reported that the calpain inhibitor, calpeptin exerted inhibitory effects on pulmonary fibrosis by inhibiting the proliferation of lung fibroblasts. In the present study, we examined the preventive effects of calpeptin on the cell growth of MPM, the origin of which is mesenchymal cells, similar to lung fibroblasts. Calpeptin inhibited the proliferation of MPM cells, but not mesothelial cells. It also prevented 1) the expression of angiopoietin (Ang)-1 and Tie-2 mRNA in MPM cells, but not mesothelial cells and 2) the Ang-1-induced proliferation of MPM cells through an NF-kB dependent pathway, which may be the mechanism underlying the preventive effects of calpeptin on the growth of MPM cells. These results suggest potential clinical use of calpeptin for the treatment of MPM.
Ambroise, Marie Moses;Jothilingam, Prabhavati;Ramdas, Anita
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.15
no.16
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pp.6919-6922
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2014
Background: The cytological analysis of serous effusions is a common investigation and yields important diagnostic information. However, the distinction of reactive mesothelial cells from malignant cells can sometimes be difficult for the cytopathologist. Hence cost-effective ancillary methods are essential to enhance the accuracy of cytological diagnosis. The aim of this study was to examine the utility of nuclear morphometry in differentiating reactive mesothelial cells from malignant cells in effusion smears. Materials and Methods: Sixty effusion smears consisting of 30 effusions cytologically classified as malignant (adenocarcinomas) and 30 benign effusions showing reactive mesothelial cells were included in the study. ImageJ was used to measure the nuclear area, perimeter, maximal feret diameter, minimal feret diameter and the circularity. A total of ten representative cells were studied in each case. Results: Significant differences were found between benign and malignant effusions for the nuclear area, perimeter, maximal feret diameter and minimal feret diameter. No significant difference was found for circularity, a shape descriptor. Receiver operating characteristic (ROC) curve analysis revealed that nuclear area, perimeter, maximal feret diameter, and minimal feret diameter are helpful in discriminating benign and malignant effusions. Conclusions: Computerised nuclear morphometry is a helpful ancillary technique to distinguish benign and malignant effusions. ImageJ is an excellent cost effective tool with potential diagnostic utility in effusion cytology.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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