The twenty-one individuals of Meretrix lusoria were secured from Gunsan, Shinan and Yeonggwang on the coast of the Yellow Sea and the southern sea in the Korean Peninsula, respectively. Amplification of a single COI fragment (720 bp) was imagined, and no apparent size differences were observed in amplified fragments between Meretrix lusoria and M. petechialis individuals. The size of the DNA fragments also varied excitedly, from 200 to 1,600 bp. The oligonucleotides primer BION-08 produced the least loci (a total of 17), with an average of 2.43 in the Gunsan population, in comparison to the other primers used. Remarkably, the primer BION-13 detected 42 shared loci by the three populations, major and/or minor fragments of sizes 200 bp and 400 bp, respectively, which were identical in all samples. The dendrogram gained by the seven oligonucleotides primers highlight three genetic clusters: cluster 1 (GUNSAN 01 ~ GUNSAN 07), cluster 2 (SHINAN 08 ~ SHINAN 14) and cluster 3 (YEONGGWANG 15 ~ YEONGGWANG 21). The longest genetic distance among the twenty-one Meretrix lusoria individuals that displayed significant molecular differences was between individuals GUNSAN no. 01 and SHINAN no. 14 (genetic distance = 0.574). Comparatively, individuals of SHINAN population were fairly closely related to that of YEONGGWANG population. In this study, PCR analysis has discovered significant genetic distances between two white clam population pairs (P<0.05).
As a previous step for the development of immunostimulating substance from marine natural products the two new lectins, MLA-II and MLA-III, have been isolated and purified from the hemolymph of Meretrix lusoria in addition to the previously reported MLA-I. The new lectins molecules were characterized as pure by electrophoretic studies.
The importance of biological resources has been gradually increasing, and mollusks have been utilized as main fishery resources in terrestrial ecosystems. But little is known about genomic and transcriptional analysis in mollusks. This is the first report on the transcriptomic profile of Meretrix lusoria. In this study, we constructed cDNA library and determined 542 of distinct EST sequences composed of 284 singletons and 95 contigs. At first, we identified 180 of EST sequences that have significant hits on protein sequences of the exclusive Mollusks database through BLASTX program and 343 of EST sequences that have significant hits on NCBI NR database. We also found that 211 of putative sequences through local BLAST (blastx, E < e-10) search against KOG database were classified into 16 functional categories. Some kinds of immune response related genes encoding allograft inflammatory factor 1 (AIF-1), B-cell translocation gene 1 (BTG1), C-type lectin A, thioester-containing protein and 26S proteasome regulatory complex were identified. To determine phylogenetic relationship, we identified partial sequences of four genes (COX1, COX2, 12S rRNA and NADH dehydrogenase) that significantly matched with the mitochondrial genomes of 3 species-Ml (Meretrix lusoria), Mp (Meretrix petechialis) and Mm (Meretrix meretrix). As a result, we found that there was a little bit of a difference between sequences of Korean isolates and other known isolates. This study will be useful to develop breeding technology and might also be helpful to establish a classification system.
Single cell PCR analysis and light and scanning electron microscopic techniques were utilized to identify free living bivalve larvae in the coastal waters of Tae-an, on the west coast of Korea. Through DNA sequencing, venerid clam larvae were isolated and identified as Ruditapes philippinarum (99% similarity) and Meretrix lusoria (99%). Under microscopic observation, the D-veliger stage of R. philippinarum exhibited symmetrical shoulder angles and an elliptical ventral form. In contrast, M. lusoria displayed asymmetrical shoulder angles and a round ventral form in the umbonal stage. Size of the R. philippinarum larvae was $156{\pm}22{\mu}m$ in length, $126{\pm}12{\mu}m$ in height, $92{\pm}14{\mu}m$ in width with a length: height ratio of 1.23. Meretrix lusoria was $202{\pm}44{\mu}m$ in length, $161{\pm}35{\mu}m$ in height, $96{\pm}38{\mu}m$ in width with a length: height ratio of 1.25. Experimental results indicate that morphological and molecular characteristics provide evidence for the larval identification of these two venerid clam larvae species in nature.
Meretrix lusoria is one of the most favorite edible bivalves inhabiting wide inter-tidal flats along the western coast of Korea. Over the period of July to September 1973, some specimens from a tidal flat near AnMyun Island were submerged in sea water with various concentrations of ammo-mum hydroxide added and careful observations were made on their fertilization, early development, and metamorphosis of the larvae. The highest rate of fertilization was demonstrated by individuals treated with 1/1000 normal solution of ammonium hydroxide, and their fertilized eggs followed normal development, i. e., two cell stage in 1.2 hours after fertilization, gastrula stage after 4.7 hours, and trochophore stage after 5.6 hours. Within 24 hours after fertilization M. lusoria larvae have acquired the form of early straight-hinge veliger with the mean prodissoconch I length of $112\mu$. It takes seven days to get the umbo stage with the mean shell length of $172\mu$ and twenty days to get the metamorphosing stage with the mean shell length of $232\mu$. The larvae were cultured to the metamorphosing stage with the shell length of $272\mu$ in the laboratory condition. The relationship between the shell length (L) and the shell height (H) in veliger stage is shown as H=1.02325L-24.46425 with a significant difference.
Genomic DNAs (gDNAs) were isolated from the hard clam ($Meretrix$$lusoria$, Roding, 1798) populations of Gunsan located in the Yellow Sea of the Korean peninsula. Genetic distances among different individuals of the LSCP (light shell color population) population of the hard clam (lane 1-11), GSCP (grey shell color population) population of the hard clam (lane 12-22) and DSCP (dark shell color population) population of the hard clam (lane 23-33), respectively, were generated using Systat version 10 according to the bandsharing values and similarity matrix. The dendrogram, generated by seven reliable oligonucleotides primers, indicates 3 genetic clusters. LSCP population could be evidently discriminated with the other two populations among three populations. The longest genetic distance (0.801) was found to exist between individuals in the two populations, between individuals' no. 33 of the DSCP population and no. 06 of the LSCP population. The higher fragment sizes (>2,000 bp) are much more observed in the GSCP population. Three hard clam populations can be clearly distinguished, especially, by their morphological characters and PCR-based approach.
Five commercially valuable Korean Veneroid, Protothaca jedoensis, Ruditapes philippinarum, Saxidomus purpuratus, Cyclina sinensis and Meretrix lusoria were recognized by comparing internal and external morphological characters. As length of the primary tooth was directly grown proportional to shell size but all other characters were not measured according to size of shell. Hence, the morphological characters of these Veneroids may be estimated from the size of the unique primary tooth and it might be enough to be a good criterion for identification of species among Veneriods. Numerical index of hinge plate length of these species was assessed systematically, irrespective of measuring the length, height and width of the shell. The highest internal and external morphological similarity was observed between P. jedoensis and R. philippinarum and the lowest similarity was observed between P. jedoensis and M. lusoria. These similarities may be affected by multiple environmental factors as well as genetic characters. For artificial seed production of P. jedoensis, R. philppinarum, a closest relative among the five species, must be focussed.
Reproductive cycle with the gonadal phases, first sexual maturity, artificial spawning amount by the size and spawning interval of the hard clam, Meretrix lusoria were investigated by histological observations and morphometric data by artificial spawning induction. Meretrix lusoria is dioecious and oviparous. The reproductive cycle of this species can be classified into five successive stages: early active stage (January to March), late active stage (February to May), ripe stage (April to August), partially spawned stage (June to September), and spent/inactive stage (September to February). The spawning period was from June to September, and the main spawning occurred between July and August when the seawater temperature exceeds over $20^{\circ}C$. Percentage of first sexual maturity of female and male clams ranging from 40.0 to 45.0 mm in shell length was over 50%, and all clams over 50.0 mm in shell length sexually matured. Female and male clams ranging from 40.0 to 45.0 mm in shell length are considered to be two years old. Therefore, we assume that the hard clams of both sexes begin reproduction from two years of age. The mean number of the spawned eggs increased with the increase of size (shell length) classes. In case of artificial spawning induction, the number of spawned eggs from the clams of a sized class was gradually decreased with the increase of the number of the spawning frequencies (the first, second, and third spawnings). In the experiments of artificial spawning induction during the spawning season, the interval of each spawning was estimated to be 15-18 days (average 17 days).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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