• 한국식품영양과학회지
• /
• 제10권1호
• /
• pp.85-91
• /
• 1981

S. aureus를 TCA로 처리(處理)하여 저분자물질(低分子物質)을 추출(抽出)한 후(後) STS법(法)에 준(準)하여 지질핵산(脂質核酸), 단백질(蛋白質) 및 잔사(殘渣)로 분획(分劃)하였다. 이와 아울러 초음파처리(超音波處理)로 균체(菌體)를 파쇄(破碎)한 후(後) 원심(遠心)침전을 SDS 및 Formamide를 사용(使用)하여 축차적(縮次的)으로 가용성(可溶性) 획분(劃分)을 추출(抽出)하고 얻어진 각(各) 획분(劃分)의 성질(性質)을 조사(調査)하였다. 그 결과(結果), 초음파(超音波)로 파쇄(破碎)한 균(菌)의 원심상징액(遠心上澄液)에서 균체(菌體) DNA의 91.3%가 검출(檢出)되었고 원심침전(遠心沈澱)으로부터는 SDS 처리(處理)에 의(依)하여 높은 비활성(比活性)(13.67unit/mg Protein)의 Malate dehydrogenase가 유지되었다. 한편, SDS 처리균(處理菌)의 원심침전물(遠心沈澱物)을 다시 열(熱) Formamide $150^{\circ}C$로 추출(抽出)하고 가용성획분(可溶性劃分) 및 잔사(殘渣)를 각각(各各) 산(酸) 가수분해(加水分解)한 후(後) Paper chromatsgraph하여 잔사(殘渣)로부터 Glucosamine을 확인(確認)하였다. 그러나 가용성획분(可溶性劃分)은 Ninhydrin반응(反應)에는 음성(陰性)이었고 환원당반응(還元糖反應)은 음성(陰性)이었다. 이상(以上)의 결과(結果)로 부터 초음파(超音波)로 파쇄(破碎)한 균체(菌體)의 원심상징액(遠心上澄液)은 주(主)로 원형질획분(原形質劃分)이며 SDS 및 Formamide에 의(依)하여 용출(溶出)되어 나온것은 각각(各各) 원형질막(原形質膜) 및 세포벽(細胞壁)의 Polysaccharide 획분(劃分)으로, Formamide 불용성분(不溶性分)은 Peptidsglycan 획분(劃分)으로 판정(判定)되었다.

• Archives of Plastic Surgery
• /
• 제34권6호
• /
• pp.679-684
• /
• 2007

Purpose: DMH(1,2-dimethylhydrazine) has been known to induce vascular neoplasm such as malignant endothelioma in animal experiment, through induction of abnormal proliferation of HUVECs. In our previous studies, 11 types of PKC isoenzymes were determined by RT-PCR and the expression of $PKC{\alpha}$, and ${\mu}$ was more prominent than other PKC isoenzymes in the DMH-treated group. However, this result was not based on objective assessment. In this study, we further evaluated the role of $PKC{\alpha}$ on the DMH-induced abnormal proliferation of HUVECs by two different methods to identify its presence with high relevance in objective view. $PKC{\mu}$ will be investigated in further study. Methods: The study was conducted with the cultured HUVECs group(control) and the $0.75{\times}10^{-9}M$ DMH-treated group. After processing protein extraction in 0 and 24 hour, extracted protein was treated of quantitative test through BCA protein assay. In the western blot analysis, electrophoresis was performed in the order of gel preparation, sample preparation, and gel running. Electrotransfer to nitrocellulose membrane and reaction with antibody were done. Detection of $PKC{\alpha}$ was achieved through "Gel Image Analysis System". In the fluorescence immunocytochemical analysis, the grading of radiance of the intracellular $PKC{\alpha}$ particles was detected with confocal microscope after treating with primary and fluorescent secondary antibody in 0 and 24 hours. Results: The Western blot analysis showed increased $PKC{\alpha}$ expression from the specimen obtained in 24 hour of the DMH treatment group when compared to those in control group. Under confocal fluorescence microscope, the emitting radiance in the DMH treated group was brighter at 24 hours as well. Conclusion: We believe that $PKC{\alpha}$ plays a role in DMH-induced abnormal proliferation of the vascular endothelium, which may provide insights in understanding the vascular neoplasm.

• 생명과학회지
• /
• 제21권5호
• /
• pp.746-752
• /
• 2011

측백나무 잎 및 열매 물, 에탄올 및 메탄올 추출물의 생리활성 물질(총 폴리페놀 화합물, 플라보노이드, 미네랄, 지방산 조성) 분석과 항산화 활성(DPPH free radical scavenging 활성, Cu/Fe-환원력, 간 조직 microsome 생체막 및 linoleic acid 과산화지질)을 측정하였다. 측백나무 잎의 메탄올 추출물에서 추출 수율(12.90%), 폴리페놀 화합물(16.02%) 및 플라보노이드(0.25%) 함량이 가장 높았다. 측백나무 잎 및 열매의 주요 미네랄은 Ca, K, 및 Mg이었다. 측백나무 잎의 주요 지방산은 palmitic acid 및 lauric acid였으며, 열매는 palmitic acid 및 decanoic acid가 높은 함량을 보였다. DPPH free radical scavenging 활성, Cu/Fe-환원력, 간 조직 microsome 생체막 및 linoleic acid의 과산화 지질 측정에 의한 항산화 활성은 측백나무 열매보다는 잎 추출물에서 높았으며, 시료 처리 농도 의존적으로 활성이 증가되는 것으로 나타났다. 이상의 실험 결과에서 측백나무 잎의 메탄올 추출물에서 높은 항산화 활성이 있었으며, 이는 폴리페놀 화합물과 플라보노이드와 같은 항산화 활성을 나타내는 생리활성 성분을 많이 함유하고 있는 것으로 나타나 향후 건강기능식품이나 화장품의 천연 항산화제 소재개발에 유용하게 사용될 것으로 사료된다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
• /
• 제7권2호
• /
• pp.79-84
• /
• 2003

We have previously reported that expression of the somatostatin receptor subtypes, sst1-5, is differentially regulated by growth hormone (GH)-releasing hormone (GHRH) and forskolin (FSK), in vitro. GHRH binds to membrane receptors selectively located on pituitary somatotropes, activates adenylyl cyclase (AC) and increases sst1 and sst2 and decreases sst5 mRNA levels, without significantly altering the expression of sst3 and sst4. In contrast FSK directly activates AC in all pituitary cell types and increases sst1 and sst2 mRNA levels and decreases sst3, sst4 and sst5 expression. Two explanations could account for these differential effects: 1) GHRH inhibits sst3 and sst4 expression in somatotropes, but this inhibitory effect is masked by expression of these receptors in unresponsive pituitary cell types, and 2) FSK inhibits sst3 and sst4 expression levels in pituitary cell types other than somatotropes. To differentiate between these two possibilities, somatotropes were sequentially labeled with monkey anti-rat GH antiserum, biotinylated goat anti-human IgG, and streptavidin-PE and subsequently purified by fluorescent-activated cell sorting (FACS). The resultant cell population consisted of 95% somatotropes, as determined by GH immunohistochemistry using a primary GH antiserum different from that used for FACS sorting. Purified somatotropes were cultured for 3 days and treated for 4 h with vehicle, GHRH (10 nM) or FSK ($10{\mu}M$). Total RNA was isolated by column extraction and specific receptor mRNA levels were determined by semi-quantitative multiplex RT-PCR. Under basal conditions, the relative expression levels of the various somatostatin receptor subtypes were sst2＞sst5＞sst3=sst1＞ sst4. GHRH treatment increased sst1 and sst2 mRNA levels and decreased sst3, sst4 and sst5 mRNA levels in purified somatotropes, comparable to the effects of FSK on purified somatotropes and mixed pituitary cell cultures. Taken together, these results demonstrate that GHRH acutely modulates the expression of all somatostatin receptor subtypes within GH-producing cells and its actions are likely mediated by activation of AC.

• 한국수산과학회지
• /
• 제29권2호
• /
• pp.246-255
• /
• 1996

연속식 3단계 막반응기로부터 각 단계별로 분리한 가자미피 젤라틴 가수분해물의 항산화성을 측정한 결과, 2단계 가수분해물의 항산화력이 가장 뛰어날 뿐만 아니라, 천연항산화제인 $\alpha-tocopherol$보다 $10\%$ 정도의 높은 항산화력을 나타낸 반면, 1단계 및 3단계 가수분해물은 $\alpha-tocopherol$보다 오히려 $10\~15\%$ 정도 낮은 항산화력을 보였다. 가수분해물의 첨가한 농도에 따른 항산화성은 유지중량에 대해 $1.0\%(w/w)$로 첨가한 농도에서 최대 항산화력을 나타내었다. 한편, 천연항산화제인 $\alpha-tocopherol$과 합성항산화제인 BHT와의 상승효과를 검토한 결과, 각 단계별 가수분해물은 $\alpha-tocopherol$과 우수한 상승효과를 관찰할 수 있었으며, 그 중 2단계 가수분해물의 상승효과가 가장 강하였다. 또한 항산화성이 가장 뛰어난 2단계 가수분해물로부터 gel column, ion exchange column 및 ODS column을 사용하여 항산화력이 특히 우수한 부분만을 분리한 단일 펩티드를 간세포에 첨가하여 세포생존율에 미치는 효과를 관찰한 결과, TBHP의 독성에 대해 펩티드 첨가구가 무첨가구에 비해 세포생존을 연장시켰으며, lipid peroxidation측정에서도 세포의 산화를 억제함으로써 세포의 생존율을 높였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제39권sup2호
• /
• pp.287-291
• /
• 2009

Purpose: The objective of this clinical presentation was to present a clinical case series report of socket preservation, sinus augmentation, and bone grafting using a horse-derived biomaterial. Methods: A horse-derived biomaterial was used in 8 patients for different indications including socket preservation following tooth extraction, osseous bone grafting, and sinus augementation procedures. Surgeries were performed by a well trained specialist and clinical radiographs were obtained at designated intervals. Biopsy cores of 2 ${\times}$ 8 mm prior to implant placement was obtained following a healing interval of 4 - 6 months. A clinical and histologic evaluation was performed to evaluate the clinical effectiveness and biocompatibility of the biomaterial. Results: All surgeries in 8 patients were successful with uneventful healing except for one case with membrane exposure that eventually resulted with a positive outcome. Radiographic display of the healing phase during different intervals showed increased radiopacity of granular nature as the healing time increased. No signs of adverse effect or infection was observed clinically and the tissues surrounding the biomaterial seemed well-tolerated with good intentional healing. The augmented sinuses healed uneventfully suggesting in part, good biocompatibility of the biomaterial. Dental implants placed following socket preservation were inserted with high initial torque suggesting good initial stability and bone quality. Conclusions: Our results show that at least on a tentative level, a horse-derived biomaterial may be used clinically in socket preservation, sinus augmentation, bone grafting techniques with good intentional healing and positive results.

• 대한환경공학회지
• /
• 제37권12호
• /
• pp.657-667
• /
• 2015

녹조현상을 형성하는 유독남조류는 세계 각지의 부영양화 호수에서 장기간 관찰되고 있다. 남조에 의해 생산되는 독소는 크게 신경독(anatoxin-a, anatoxin-a(s), saxitoxin)과 간독(microcystin, nodularin, cylindrospermopsin)으로 나뉜다. Microcystin은 남조세포내에 존재하며, 세포막이 손상되면 외부로 방출된다고 사료되며, 용출된 microcystin은 생물에 악영향을 끼치며, 호수, 하천 및 해양의 수생생물에 microcystin이 축적된다고 알려져 있다. 자연계에서는 포식자에 의한 남조세포의 섭식 또는 남조세포로부터 용출된 microcystin의 미생물에 의한 분해에 의해 microcystin의 제거가 가능하지만, 정수처리 과정에서는 microcystin을 분해하는 미생물이 존재하지 않으므로, 세포제거를 위해 황산구리를 사용할 경우 대량의 microcystin이 용출되므로 주의가 필요하다. 지금까지의 보고에 의하면 세포 밖으로 용출된 micorcystin을 제거하는 기술은 물리, 화학 및 생물학적 방법이 있다. 녹조현상의 방지는 그 발생의 원인인 호수 외로부터 유입되는 영양염류인 질소와 인의 감소가 기본이지만, 부영양호의 경우 이미 유입된 영양염류를 축적하고 있으므로 투자에 비해 효과는 높지 않다. 호수가 본래의 상태일 때 부영양화 된다면, 호수의 연안부에 수생식물의 침입이 일어나고, 식물플랑크톤에 의한 조류 번무 현상은 보이지 않는 것이 보통이다. 이러한 관점으로 녹조현상 발생방지를 위해서는 일단 호수 연안을 정상적인 상태로 복원할 필요가 있다.

• 생명과학회지
• /
• 제21권7호
• /
• pp.1052-1059
• /
• 2011

가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매의 수용성, 에탄올 및 메탄올 추출물의 생리활성 물질 분석과 항산화 활성(DPPH free radical scavenging 활성, Cu/Fe-환원력, 간 조직 microsome 생체막 및 linoleic acid 과산화지질, Tyrosinase 저해활성)을 측정 하였다. 가시오가피 잎의 열수 추출물에서 추출 수율 16.04%, 폴리페놀 화합물 함량2.67% 및 플라보노이드 함량 1.43%로 가장 높았다. 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매의 주요 미네랄은 K, Ca 및 Mg 이었다. DPPH free radical scavenging 활성, Cu/Fe-환원력, 간 조직 microsome 생체막 및 linoleic acid의 과산화 지질 측정에 의한 항산화 활성은 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매 모두에서 나타났으며, 시료 처리 농도 의존적으로 활성이 증가되는 것으로 나타났다. 이상의 실험 결과에서 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매 모두에서 높은 항산화 활성이 있었으며, 이는 폴리페놀 화합물과 플라보노이드와 같은 생리활성 성분을 많이 함유하고 있는 것과 깊은 관련성이 있는 것으로 향후 건강기능식품이나 기능성화장품의 천연 항산화제 소재 개발 관련 연구의 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 사료되어 진다.

• 한국식품과학회지
• /
• 제29권3호
• /
• pp.417-426
• /
• 1997

미강을 혈중 콜레스테롤 저하 효과가 있는 기능성 식품소재의 원료로 활용하는 데 필요한 기초 자료를 얻기 위하여 미강 단백질의 가수 분해물을 제조하여 담즙산 결합 획분을 분리하고 일부 물리화학적 특성을 조사하였다. 미강 단백질을 탈지 미강으로부터 알칼리 추출과 등전점 침전 방법을 이용하여 제조하였다. 미강 단백질을 기질로 하여 pH-drop method로 측정한 효소의 상대적 활성과 가수분해시 가수분해율의 변화를 비교 평가하여 기질의 가수분해에 적합한 효소를 선택하였다. Esperase에 의한 가수분해물을 한외여과(MWCO : 10 kDa)하여 두 부분으로 나누었다. 각 분획물을 cholic acid를 공유결합 시킨 ${\omega}-aminohexyl$ Sepharose 4B column에 걸어, 소수성 상호작용에 의해 cholic acid와 결합하는 폴리펩티드 및 펩티드를 deoxycholate 완충용액으로 용출시켜 분리하였다. 겔투과 크로마토그래피(Sephadex G-50)를 이용하여 한외여과 여과백의 담즙산 결합물에 대해 분자량 분포를 측정한 결과, 대부분 $2\;kDa{\sim}10\;kDa$에 걸쳐 넓게 분포하였고 일부는 $0.2\;kDa{\sim}0.6\;kDa$사이에 존재하였다. 한외여과 잔류액의 담즙산 결합물에 대해서는 preparative reverse phase HPLC를 실시하여 미강 단백질 가수분해물에서 3개(R-1, 2, 3)의 Peak를 분리하였다. 각 peak의 총 아미노산과 유리 아미노산 조성을 분석하여 단백질, 폴리펩티드 및 펩티드 부분의 아미노산 조성을 조사하였다. 그 결과 미강 단백질 가수분해물에서 얻은 peak의 경우 proline 함량이 미강 단백질의 4배에 달했고, 평균 소수도가 높은 peak일수록 유리 아미노산이 함량이 높았으며 평균 소수도는 미강 단백질보다 다소 높은 것으로 나타났다.

• 한국동물위생학회지
• /
• 제33권2호
• /
• pp.135-141
• /
• 2010

Bovine brucellosis, an important zoonosis, is diagnosed with serological tests such as the RBT, TAT using inactivated whole bacterial cells or bacterial lipopolysaccharide (LPS) antigen in Korea. However, a strong cross-reaction between Brucella spp. and Yersinia enterocolitica O9 in these tests has seriously complicated the diagnosis of animal brucellosis because Brucella spp. shares common antigenic determinants with Y. enterocolitica O9 in the smooth LPS region. In this study, Brucella-field strains were isolated from Brucellapositive Hanwoo in Kimhae, Korea and outer membrane protein (omp) which has low cross-reaction with Y. enterocolitica O9 and high immunogenicity was extracted from the field strains Then we compared ELISA using the extract with RBT-TAT. Fifteen field strains were isolated from 47 supra-mammary-lymph nodes, which were collected from 18 farms. Isolation rate was 32%. Brucella-specific antigen was identified by performing SDS-PAGE or Western blotting on extracted omp with at 0.5% n-lauroylsarcosine One hundred and ninety-two serum-samples were used in the experiment: 142 negative and 50 positive samples verified by RBT-TAT. According to ELISA results, 127 samples were negative and 15 appeared positive among 142 negatives by RBT-TAT, while 42 samples were positive and 8 were negative among 50 positives by RBT-TAT. Therefore, it showed 89.4% of specificity and 84% of sensi-tivity. Through the current experiments, we could set up an ELISA based on the omp which has low cross-reaction and high immunogenicity and concluded that the omp could be a good material for accurate diagnosis of bovine brucellosis.