The internal invertase of Rhodosporidium toruloids mating type a cells was purified to a single band on SDS-PAGE from cell-free extract by acid precipitation, ion exchange chromatogaphy andgel filtration. The determined molecular weight of he purified enzyme was about 95,000 by gel filtration and 100,000 daltons on SDS-polyacryamide gel electrophoresis. This enzyme didn't show any activity change by several metal ions except 15.4% decrease by {TEX}$Mn^{2+}${/TEX} and was strongly inhibited by 2-mercaptoethanol and SDS. The invertase maintained its activity at high level until 70℃, but inactivated at 80℃ almost completely. The optimal temperature and pH of the enzyme were about 60℃ and pH 5.0, respectively. The stable pH range of invertase was narrow from pH 3.0 to 6.0. The Km value and isoelectric point of enzyme were 3.4×{TEX}$10^{3}${/TEX} M, pH 4.4, respectively.
Twenty-five isolates of Fusarium fujikuroi acquired from rice seeds and rice plants evidencing symptoms of Bakanae disease were evaluated to determine their mating types and characterize the formation of their sexual state. The mating types of the isolates were evaluated via multiplex PCR with the diagnostic primers of the mating-type (MAT) region: GFmat1a, GFmat1b, GFmat2c, and GFmat2d. Among the 25 isolates, 11 were identified as MAT-1 (male), and 14 as MAT-2 (female). Four MAT-1 isolates and three MAT-2 isolates were mated and cultured to evaluate the optimal culture conditions for the production of their sexual states. Among four tested media, 10% V8 juice agar proved optimal for the perithecial production of the isolates. The isolates also generated the largest numbers of perithecia when incubated at 23oC in alternating cycles of 12 hr fluorescent light and NUV fluorescent light and 12 hr darkness.
이 논문은 다세포 녹색식물의 조상으로 생각되는 단세포인 수염녹두말속(Chlamydomonas) 녹조의 복잡한 유성생식 과정을 종합적으로 이해하기 위해서 기술되었다. 모델생물로 알려진 클래미도모나스 레인하르티(Chlamydomonas reinhardtii)의 유성생식 생활사는 배우자발생, 배우자 활성화, 세포융합, 접합자 성숙, 감수분열과 발아 등의 다섯 시기로 구별된다. 배우자발생은 서식지에서 질소가 결핍되어 시작된다. 그 결과, 교배형 유전자자리($MT^+$ 또는 $MT^-$)에 의해 조절된 두 가지 교배형($mt^+$ 및 $mt^-$)의 배우자들이 발생된다. 유성생식을 위한 두 번째 자극원인 청색광이 교배능력을 갖고 있지 않는 예비배우자 세포에 조사되면 교배능력을 가진 배우자로 분화된다. 배우자발생의 초기에, 두 배우자 세포들은 응집소(agglutin) 분자들을 합성한다. 즉, $mt^+$ 응집소 및 $mt^-$ 응집소는 상염색체에 있는 성응집(SAG1) 및 성접착(SAD1) 유전자들이 발현되어 각각 합성된다. 응집소들에 의해서 두 배우자 세포들의 편모가 접착되면 cAMP가 신호전달 경로를 작동시켜서 편모의 끝 부부을 활성화시킨다. cAMP의 신호에 반응하여 두 배우자들의 세포벽이 벗겨지고 2개의 편모 사이에서 각각의 교배구조(mating structure)가 발달한다. 교배구조의 원형질막에는 $mt^+$ 및 $mt^-$ 배우자-특이 융합 단백질인 Fus1 및 Hap2/Gcs1이 있다. 이 단백질들의 상호작용으로 두 교배구조가 접촉되면, 두 배우자 사이에 세포질이 연결되어 수정세관(fertilization tubule)이 발달한다. $mt^+$ 및 $mt^-$ 배우자들의 핵과 엽록체가 융합되면 2배체의 접합자가 형성된다. 그 후 배우자들의 특성은 사라지며 융합단백질들(Fus1 및 Hap2)이 분해되고 접합자-특이(zygote-specific) 유전자들이 활성화 된다. 접합자는 24시간에 걸쳐 두꺼운 세포벽을 가진 접합포자(zygospore)로 발달한다. 어린 접합자에서 교배 후 60분 이내에 $mt^-$ 엽록체 DNA와 $mt^+$ 미토콘드리아 DNA가 선택적으로 제거된다. 따라서 이 두 소기관들은 각각 $mt^-$ 미토콘드리아 DNA와 $mt^+$ 엽록체 DNA만 남아서 단친유전(uniparental inheritance)이 이루어진다. 적당한 조건이 되면 접합포자가 감수분열과 발아 과정을 거쳐 반수체 영양세포가 방출되어 새로운 세대가 다시 시작된다.
Kim, Byung-Sup;Zhang, Xuan-Zhe;Chung, Eun-Kyoung;Kim, Dal-Soo;Chun, Sam-Jae;Park, Woo-Bong
The Plant Pathology Journal
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제19권3호
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pp.143-147
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2003
Sensitivity of Phytophthora infestans isolates to fungicides metalaxyl and ethaboxam in Korea was examined with 260 isolates for 3 years (9 isolates in 2000,93 isolates in 2001, and 158 isolates in 2002). Both Al and A2 mating types were found from the isolates collected for 3 years. Al mating type was dominant in the population with 8 isolates (88.9%) in 2000, 84 isolates (89.4%) in 2001, and 138 isolates (87.3%) in 2002. Only some isolates from diseased tomatoes in Buyergun and diseased potatoes in Pyeongchanggun were of the A2 mating type. As for metalaxyl sensitivity, 77.0% of the isolates were moderately resistant with 8 isolates (88.9%) in 2000, 73 isolates (77.7%) in 2001, and 120 isolates (75.9%) in 2002. Meanwhile, those found resistant were 1 isolate (11.1%) in 2000, 16 isolates (17.0%) in 2001, and 33 isolates (20.9%) in 2002. Only 5 isolates (3.2%) were sensitive to metalaxyl in 2002. There was no significant difference in the sensitivity among years. As for ethaboxam, no isolate was able to grow at 5.0 $\mu\textrm{g}$ /ml, and only four isolates (1.5 %) grew at 1.0 $\mu\textrm{g}$ /ml with heavy retardation compared with the untreated control. Based on these 3-year results, the minimum inhibitory concentration (MIC) of ethaboxam to p. infestans was determined to be 0.2-1.0 $\mu\textrm{g}$ /ml. Results indicate that resistance development by p. infestans to ethaboxam is not likely to occur in the natural condition. furthermore, there was no indication of cross resistance between metalaxyl and ethaboxam because all the isolates, regardless of classification for their sensitivity to metalaxyl, were not able to grow at 5.0 $\mu\textrm{g}$ /ml of ethaboxam.
The aim of this study was to investigate the pattern of distribution of mating type (MAT) genes of Tuber indicum in ectomycorhizosphere soils from natural T. indicum-producing areas and cultivated truffle orchards and ascocarp samples from different regions. Quantitative real-time PCR and multiplex PCR were used to weight the copy numbers of MAT1-1-1 and MAT1-2-1 in natural truffle soils and cultivated orchard soils. The effect of limestone on the pattern of truffle MAT genes and the correlation between soil properties and the proportion of MAT genes were also assessed. These results indicated that an uneven and nonrandom distribution of MAT genes was common in truffle-producing areas, cultivated truffle orchards, and ascocarps gleba. The competition between the two mating type genes and the expansion of unbalanced distribution was found to be closely related to truffle fructification. Limestone treatments failed to alter the proportion of the two mating type genes in the soil. The content of available phosphorus in soil was significantly correlated with the value of MAT1-1-1/MAT1-2-1 in cultivated and natural ectomycorhizosphere soils. The application of real-time quantitative PCR can provide reference for monitoring the dynamic changes of mating type genes in soil. This study investigates the distributional pattern of T. indicum MAT genes in the ectomycorhizosphere soil and ascocarp gleba from different regions, which may provide a foundation for the cultivation of T. indicum.
This study was conducted to examine effects of mating type on the growth traits in an $F_2$ population produced by reciprocal intercrosses between Landrace and the Jeju Native Black pig (JBP). The $F_2$ progeny were produced by two different mating types based on the grand dams of founder breeds JBP (Cross_1) and Landrace (Cross_2). The body weights at 21 days after birth (BW21D) was significantly different between Cross_1 and Cross_2 (P<0.05), showing that the BW21D of Cross_1 has about 0.25 kg heavier than Cross_2. The significant differences were found between males and females for the growth traits including the body weights (BWB, BW21D, BW70D and BW140D) and average daily gains (ADG, eADG and lADG) (P<0.05). Males were heavier BWB, BW21D and BW140D levels, and higher ADG and lADG levels than females. On the other hand, females had heavier BW70D and higher eADG levels than those of males. When considering the mating types and sex simultaneously the Cross_2 males had the heaviest BW140D among the combinations of cross and sex. In conclusion, it is desirable to choose Landrace as grand dams in the reciprocal intercrosses between Landrace and JBP for producing their progeny construction and to plan the production of $F_2$ males for industrial purposes. These results suggested that it may be one of useful strategies to improve the productivity through out selection of the mating type of founder breeds and the progeny sex, especially in Landrace, JBP and their related populations.
Cosmid clone으로부터 mating activity를 가지는 pSC13의 양 말단은 1-71 $A{\alpha}3$ 교배유전자좌 Z3부위 2,430 bp와 Y3 region 8,160 bp 부근에서 homology를 지니는 것으로 나타나 교배활성에 필요한 모든 부위를 함유하는 것으로 사료되었다. 그리고 pSCE2는 1-71 $A{\alpha}3$의 Y region의 6,080 bp 부근에서 거의 완전한 homology를 가지는 것으로 보아 $A{\alpha}3$의 Y region을 함유하고 있음을 알 수 있으며, 또한 pSCE1도 MEP의 일부 sequence와도 거의 완전한 homology를 가지는 것으로 나타나 1-71 $A{\alpha}3$ 교배유전자좌와 모두 유사한 염기서열를 모두 지니면서 북미자생 치마버섯의 교배유전자좌의 염기배열이 남미자생의 것과 거의 유사한 분자적 구조를 지니고 있음을 나타내었다. 결정된 DNA sequence는 3265 bp로서 남미산 치마버섯 1-71 stain의 mating활성을 나타내는 $A{\alpha}3$ locus 염기서열중에 Z region과 거의 완전한 약 96%의 homology를 나타내었다. 또한 Polypeptide sequence비교에서도 약 82%의 높은 homology를 나타내었으며, 특히 transcription regulator로 알려진 homeodomain 및 acidic region에서는 각각 약 74%. 82%의 상당히 높은 비율의 homology를 지니고 있음이 확인되었다. 이러한 결과로 보아 남미와 북미의 대륙간에 자생하는 같은 allele type간에도 상당히 높은 비율의 교배유전자좌의 보존이 이루어지고 있음을 알 수 있다.
Mating experiments were performed to, elucidate the distribution of perfect state of Microsporum gypseum complex originated from animals and soils in Korea. A total of 30 strains of M. gypseum complex, composed of 16 from animals and 14 from soils, ere mated with the tester strains of Nannizzia incurvata, N. gypsea and N. fulva. Among 30 strains of M. gypseum complex examined, 16 strains(53.3%) were N. incurvata, 13 strains(43.3%) N. gypsea and 1 strain (3.3%) N. fulva. Among 13 strains of dog isolates, 8 strains(61.5%) were N. incurvata and 5 strains(38.5%) N. gypsea. And each strain isolated from Korean native goat, monkey and albino rat was N. gypsea. Among 14 strains of soil isolates, 8 strains(57.2%) were N. incurvata, 5 strains (35.7%) N. gypsea and 1 strain(7.2%) N. fulva. And -mating type was more frequently observed than +mating type in the strains of N. incurvata and N. gypsea. By this study, N. fulva was isolated the first time in Korea.
Cordyceps militaris specimens were continuously collected by Entomopathogenic Fungal Culture Collection (EFCC), Kangwon National University from different mountains, national parks and recreation parks of Korea from 1986 to 2002, mainly from late May to October of each year. Dry specimens of C. militaris along with their isolates have been preserved in EFCC. Fruiting of C. militaris was induced from single ascospore isolates as well as their combinations in brown rice medium. Fruiting experiments showed that combinations of single ascospore isolates produced fertile fruiting bodies, but single isolates could not produce any fruiting bodies. It was shown that two isolates of the opposite mating types were required to produce fertile stromata. However, combinations of the same mating type isolates produced no fruiting body, showing that C. militaris is a bipolar, heterothallic fungus.
본 연구에서는 복숭아순나방 (Grapholita molesta) 수컷 유인력 교란이라는 측면에서 기존에 주로 사용되던 $Isomate^{(R)}$-M ROSSO를 다른 형태의 방출기인 $SPLAT^{(R)}$과 야외 적용 실험을 통해 비교하였다. 이를 위해 기존 방출기인 Isomate의 과거 3년간 교미교란 효과를 분석하였고, 이후 두 가지 방출기의 비교는 여러지역에서 지역내 반복을 설정하면서 동일 기간에 이뤄졌다. 무처리구에서 잡힌 수컷 밀도를 기준으로 복숭아순나방은 야외에서 4회 성충 발생기를 보이며, 월동세대의 밀도가 높음에 따라 이후 이어지는 생식세대의 크기가 높아진다는 정 상관관계를 보였다. Isomate 방출기는 지난 3년간 포장에서 복숭아순나방 수컷 교미행동을 유의성있게 교란한 것으로 나타났다. 두 페로몬 방출기를 비교할 경우, SPLAT이 보다 우수한 교란효과를 나타냈다. 이러한 수컷 유인력에 있어서 차이점은 이 두 방출기에 포함된 주요 페로몬 화학성분비의 차이에서 기인된 것으로 여겨진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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