Chang, Hyun-You;Lee, Chan;Choi, Sung-Woo;Yun, Jong Won
Journal of Mushroom
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v.6
no.1
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pp.27-31
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2008
The optimization of submerged culture conditions for mycelial growth and exopolysaccharide (EPS) production in an edible mushroom Tremella fuciformis were studied in shake flasks and bioreactors. The temperature of $28^{\circ}C$ and pH 8 in the beginning of fermentation in agitated flasks was the most efficient condition to obtain maximum mycelial biomass and EPS. The optimal medium constituents were as follows (g l-1): glucose 20, tryptone 2, $KH_2PO_4$ 0.46, $K_2HPO_4$ 1 and $MgSO_4H_2O$ 0.5. The fungus was cultivated under various agitation and aeration conditions in a 5L stirred-tank bioreactor. The maximum cell mass and EPS production were obtained at a relatively high agitation speed of 200 rpm and at an aeration rate of 2 vvm. The flow behavior of the fermentation broth was Newtonian and the maximum apparent viscosity (35 cP) was observed at a highly aerated condition (2 vvm). The EPS productivity in an airlift reactor was higher than that in the stirred-tank reactor. The EPS was protein-bound polysaccharides consisted of mainly mannose, xylose, and fructose. The molecular weights of EPS were determined to be $1.3{\sim}1.5{\times}10^6$.
Codium fragile (Suringar) Hariot, an edible green alga is farmed in Korea by natural blooming zygotes attachment. Experiments were conducted to reveal the conditions for artificial seed production of C. fragile by sexual and asexual reproduction. Growth was compared between zygotes attachment (sexual reproduction) and isolated utricles with medullary filaments (asexual reproduction). Zygotes and isolated utricles with medullary filaments were cultured under different light conditions (10, 20, 40, 60 and $100\;{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$) and temperatures (5, 10, 15, 20 and $25^{\circ}C$) under 16:8LD. Maximum growth of zygote was $261.3{\pm}21.0\;{\mu}m$ under $15^{\circ}C$ and $20\;{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ after 13 days culture. Maximum regeneration of isolated medullary filament was $8.1{\pm}1.7\;mm$ per one isolated utricle under $20^{\circ}C$ and $100\;{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ after 15 days culture. After intermediate culture during two months in the field, morphogenesis occurred in both sexual and asexual reproduction, and growth of young thalli was not significantly different (p>0.05) between the both reproduction methods. Even though seed production of C. fragile is possible in both sexual and asexual reproduction, the mass artificial seed production of asexual reproduction is much more effective than that of sexual reproduction that is too much affected by maturity.
The culture conditions to maximize the production of laccase (EC 1.10.3.2) from Fomitopsis pinicola mycelia were investigated. Among the tested media for the enzyme production, mushroom complete medium (MCM ; 2% dextrose, 0.2% peptone, 0.2% yeast extract, 0.05% $KH_2PO_4$, and 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$) showed the highest activity of the enzyme. To optimize the culture condition for the laccase activity, influence of various carbon and nitrogen sources was investigated in MCM. Among various carbon and nitrogen sources, 2% glucose and 0.4% peptone showed the highest production of the enzyme, respectively. For the phosphorus and inorganic source, 0.05% $NaH_2PO_4$ and 0.05% $CaCl_2$ were best for the enzyme activity. The enzyme production was reached to highest level after the cultivation for 8 days at $25^{\circ}C$. Native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) followed by the laccase activity staining using 2, 2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) as the substrate was performed to identify the laccase under culture conditions studied. Zymogram analysis of the culture supernatant showed a laccase band with molecular mass of 52 kDa. The optimum pH and temperature for the enzyme activity were $80^{\circ}C$ and pH 3.0.
Field and nutrient cultures of American ginseng (Panax quinquefolius L.) were used to establish foliar symptoms related to boron (B) concentration in leaves and soils, and to evaluate radish as a time-saving model system for B nutrition. Application of excess B, 8 kg/ha versus the recommended 1.5 kg/ha, to field plantings of 2-, 3-, and 4-yr-old American ginseng plants just prior to crop emergence caused, within 4 wk after crop emergence, leaf symptoms of chlorosis followed by necrosis starting at the tips and progressing along the margins. The B concentration in leaves of 2-4-yr-old plants receiving 1.5 kg/ha Bwas $30{\mu}g/g$ dry mass compared to $460{\mu}g/g$ dry mass where 8 kg/ha B was applied. Similarly, B concentration in soils receiving the lower B concentration was 1.8 mg/g dry mass and $2.2-2.8{\mu}g/g$ dry mass where the higher B concentration was applied. Application of 8 kg/ha B reduced the dry yield of 3rd-yr roots by 20% from 2745 kg/ha to 2196 kg/ha and 4th-yr roots by 26% from 4130 kg/ha to 3071 kg/ha. Ginseng seedlings and radish were grown under greenhouse conditions in nutrient culture with four B concentrations ranging from 0 mg/L to 10 mg/L. At 5 mg/L and 10 mg/L ginseng and radish developed typical leaf B toxicity symptoms similar to those described above for field-grown plants. Increasing B in the nutrient solution from 0.5 mg/L to 10 mg/L decreased, in a linear fashion, the root and leaf dry mass of ginseng, but not radish. Given the many similarities of ginseng and radish to B utilization, radish might be used as a timesaving model system for the study of B, and other micronutrients, in the slow-growing perennial ginseng.
Seo, Young-Eun;Jung, Hyuck-Jun;Hong, Soon-Myung;Yu, Tae-Shick
Korean Journal of Microbiology
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v.43
no.1
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pp.59-65
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2007
The optimal conditions for Monascus pigments production of Monascus sp. KM 1001, pigment overproducing mutant, in submerged culture was investigated. The optimal medium for the production of pigment from KM 1001 mutant is determined to be composed of 4% rice powder, 0.15% Bacto-peptone, 0.1% glycine, 0.01% $FeSO_{4}{\cdot}7H_{2}O,\;0.1%\;MgSO_{4}{\cdot}7H_{2}O,\;0.25%\;KH_{2}PO_{4},\;pH4.5$. On optimal conditions,10.0 g/L of the cell mass was obtained at $30^{\circ}C$ for 5 days. Yellow, orange and red pigment of Monascus sp. KM 1001 were produced 3.25 units, 1.59 units and 0.88 units in extracellular part, and 84.96 units, 78.84 units and 91.80 units in intracellular part, respectively.
With the aim of increasing the $CoQ_{10}$ production in mass culture, the effect of aeration-agitation on the $CoQ_{10}$ production using Rhodobactor sphaeroides was investigated in a l-L bioreactor. The maximum $CoQ_{10}$ production was 1.69 mg/g of dry cell weight under conditions of 50 Lux, $30^{\circ}C$, 300 rpm, and 5-vvm aeration. The $CoQ_{10}$ production was improved to produce 2.91 mg/g of dry cell weight under reduced conditions of agitation speed (200 rpm) and aeration rate (0.2 vvm). When R. sphaeroides was cultivated under more reduced DO levels during the exponential phase of the cell, the $CoQ_{10}$ production yield of 3.88-mg/g dry cell weight was the maximum obtained. Therefore, poorer conditions of aeration-agitation resulted in higher production of $CoQ_{10}$, and thus DO content was a crucial factor in the production of $CoQ_{10}$. Accordingly, it was necessary to control the DO concentration in order to enhance the $CoQ_{10}$ biosynthesis within a large-scale production.
Eicosapentaenoic acid (EPA) produced from marine organisms is widely used in nutraceuticals. Monodus subterraneus and Nannochloropsis oceanica, which are representative freshwater and marine Eustigmatophyceae, respectively, are known to have a high content of protein and lipid, particularly, EPA. In this study, to compare the growth and nutritional composition of M. subterraneus and N. oceanica, they were cultured in autotrophic and mixotrophic conditions with JM and f/2 medium, respectively, at $25^{\circ}C$. In addition, $80{\mu}mol\;photons\;m^{-2}s^{-1}$ with 24-hour and 12-hour light was provided, with the addition of 2% glucose to the medium for the mixotrophic culture. With regard to growth, M. subterraneus showed 10 times higher biomass in a mixotrophic culture than in an autotrophic one. However, no significant difference was observed for N. oceanica between the two culture methods. With respect to nutritional composition, M. subterraneus cultured autotrophically had a higher protein and lipid content, particularly EPA, than that cultured mixotrophically, but no significant difference was found in the two cultures of N. oceanica. Furthermore, M. subterraneus cultured autotrophically with continuous light showed higher nutritional composition, particularly EPA, than N. oceanica. In conclusion, the mass culture of freshwater M. subterraneus is much easier and more economical than marine N. oceanica. In addition, production of EPA will be economically improved if mixotrophic culturing of M. subterraneus is first conducted to maximize the biomass, and then secondary autotrophic culturing is performed.
In order to develop the biotechnological methods for the mass production of anticancer compounds from tissue culture of Panax ginseng C.A. Mayer, these studies were carried out for the selection of ginseng cell lines containing higher concentration of polyacetylene compounds and optimal condition for their biosynthesis. Panaxynol, one of ginseng polyacetylene, was not detected in any callus induced from ginseng superior cell lines cultured on MS medium supplemented with $\beta$-chlorophenoxy acetic acid (CPA). Panaxydol, another one of polyacetylene and anticancer compounds, were detected in calli of 5 cell lines by thin layer chromatogram and gas chromatogram. Among the 18 ginseng superior lines, the cell line 30201 has higher content of panaxydol. Especially, panaxydol was not detected in the callus induced from cell line 10301 which cultured on the medium containing CPA only, however, it was detected on the same callus cultured on mixed medium containing CAP 2 mg/L and BA 0.05 mg/L. SH medium was better than MS medium for ginseng callus growth and biosynthesis of polyacetylene, and also found that it was not effected by NAA and sucrose concentration in the culture medium.
Park Jong-Young;Kim Han-Woo;Kim Hyun-Ju;Chun Ok-Ju;Jung Soon-Je;Choi Woobong;Lee Seon-Woo;Moon Byung-Ju
Research in Plant Disease
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v.11
no.2
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pp.158-161
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2005
Stenotrophomonas maltophilia BW-13 is a potent biocontrol agent to control crisphead lettuce bottom rot caused by Rhizoctonia solani. To define the optimum conditions for the mass production of the S. maltophilia BW-13, we have investigated optimum culture conditions and effects of various carbon sources on the bacterial growth. The optimum initial pH and temperature were determined as pH $6.0\~7.0 and $35^{\circ}C$, respectively. For the selection of effective carbon source for the mass production, we tested the low molecular carbon sources such as sucrose, glucose, lactose, maltose, manose and the high molecular carbon source such as dough conditioner, rice bran, corn starch, sweet potato starch. As the results, the addition of dough conditioner in a basal medium ($1.25\%\;K_{2}HPO_4,\;0.38\%\;KH_{2}PO_4,\;0.01\%\;MgSO_4{\cdot}7H_{2}O,\;0.5\%\;Yeast extract$) was able to achieve higher cell density and the antifungal activity than others. Therefore, the basal medium containing $3\%$ dough conditioner (named as dough conditioner medium) was finally selected the optimized media for the mass production of BW-13 strain.
L. lactis sk071115 has been shown to grow more actively and generate lower levels of lactate in glucose-defined medium with nitrate than in medium with Mn(IV). By adding Mn(IV) to a L. lactis culture, lactate production was relatively reduced in combination with Mn(II) production, but cell mass production levels did not increase. Both cell-free extract and intact L. lactis cells reacted electrochemically with Mn(IV) but did not react with Mn(II) upon cyclic voltammetry using neutral red (NR) as an electron mediator. A modified graphite felt cathode with NR (NR-cathode) was employed to induce electrochemical reducing equivalence for bacterial metabolism. Cell-free L. lactis extract catalyzed the reduction of Mn(IV) to Mn(II) under both control and electrochemical reduction conditions; however, the levels of Mn(II) generated under electrochemical reduction conditions were approximately 4 times those generated under control conditions. The levels of Mn(II) generated by the catalysis of L. lactis immobilized in the NR-cathode (L-NR-cathode) under electrochemical reduction conditions were more than 4 times that generated under control conditions. Mn(II) production levels were increased by approximately 2.5 and 4.5 times by the addition of citrate to the reactant under control and electrochemical reduction conditions, respectively. The cumulative Mn(II) produced from manganese ore by catalysis of the L-NR-cathode for 30 days reached levels of approximately 3,800 and 16,000 mg/l under control and electrochemical reduction conditions, respectively. In conclusion, the electrochemical reduction reaction generated by the NR-cathode activated the biochemical reduction of Mn(IV) to Mn(II) by L. lactis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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