• 제목/요약/키워드: Mannan

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토양에서 분리한 Aeromonas sp 로 부터 \beta-mannanase 유전자의 클로닝 (Cloning of \beta-mananase gene from Aeromonas sp. in E. coli)

  • 박봉환;강대경;김하근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.201-205
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    • 2001
  • 자연계로부터 locust bean gum이 들어 있는 선택배지에서 투명환을 형성하는 mannan 분해능을 갖는 미생물을 스크링 하였고 이를 Aeromonas sp. 로 동정하였다. Aero monas sp. 로부터 염색체 DNA를 분리하여 EcoRI으로 절단하여 대장균에 형질전환한 후 대장균 콜로니 주위에서 locust bean gum을 분해하여 투명환을 형성하는 대장균을 찾아냈다. 형질전환된 대장균으로부터 플라스미드를 분리하여 동일한 제한효소를 처리하여 확인한 결과 10 kd의 Aeromonas sp. 염섹체 DNA에 $\beta$-mannanase 유전자 존재하였다. 대장균에서 발현된 $\beta$-mannanase 의최적 반응 pH와 최적 반응온도는 각각 6.0과 $50^{\circ}C$로서 모균인 Aeromonas sp. 와 동일하였다.

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능성어(Epinephelus septemfasciatus) immunoglobulin M에 대한 단클론 항체 생산 (Production of monoclonal antibodies to immunoglobulin M of sevenband grouper (Epinephelus septemfasciatus))

  • 김시우;김종오;공경희;오명주;김위식
    • 한국어병학회지
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    • 제34권1호
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    • pp.111-115
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    • 2021
  • Immunoglobulin M (IgM) of sevenband grouper (Epinephelus septemfasciatus) was purified by mannan-binding protein (MBP) affinity column. The purified IgM had an apparent molecular weights of 76 (heavy chain) and 28 (light chain) kDa in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Eight hybridoma clones secreting monoclonal antibodies (mAbs) against sevenband grouper IgM were established. Antibody detection enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with bovine serum albumin (BSA, antigen) and the 8 mAbs revealed that optical density (OD) values were clearly different between sera from BSA-immunization and non-immunization of sevenband grouper. These results suggest that the produced mAbs in this study are specifically reacted with IgM of sevenband grouper.

배를 이용한 과실주로부터 분리한 항보체 활성화 다당의 특성 (Characterization of Anti-Complementary Polysaccharides Isolated from Fruit Wine Using Korean Pears)

  • 최정호;신광순
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제40권1호
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    • pp.63-69
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    • 2011
  • 한국 전통발효주 중에 존재하는 특이다당류의 화학적 특성 및 생물활성을 규명할 목적으로, 농가에서 직접 발효한 배주로부터 다당류를 분리하고 이들의 항보체 활성에 대해 검토하였다. 배주에 80% ethanol 침전을 행하여 얻어진 조다당 획분 PW-0을 이용, Sephadex G-75를 이용한 겔 여과 chromatography를 행하여 배주의 주요 다당인 PW-1을 정제할 수 있었다. PW-1 획분은 HPLC상에서 대칭을 유지하는 단일 peak로 검출되었으며, 분자량은 약 150 kDa으로 평가되었다. 정제다당인 PW-1의 구성당 조성을 확인한 주구성당으로 mannose(81.8%)가 높은 비율로 검출되었으며 그 외 arabinose(1.2%), galactose(2.7%), glucose(8.5%), galacturonic acid(5.3%) 및 glucuronic acid(0.5%) 등 5종의 당류가 소량 함유되어 있었다. 이 결과는 배주에 존재하는 주다당이 발효 효모의 세포벽에서 기원한 mannan임을 추정하게 하였다. 한편 고분자 정제 다당인 PW-1은 비특이적 면역계에 있어 중요 역할을 담당하고 있는 보체계에 대하여 농도 의존적인 활성화 경향을 보였다. 이들은 $Ca^{++}$ 이온이 제거된 상태에서의 항보체 활성과 anti-human C3를 이용한 2차원 면역전기영동에 의하여 C3 산물을 동정한 결과로부터 보체계의 고전경로와 부경로 등 양 경로를 모두 경유하여 활성을 나타냄을 확인할 수 있었다.

추출 용매 및 효소 전처리 방법에 따른 포피란과 헤미셀루로오즈의 특성 (Properties of Porphyran and Hemicellulose extracted with Different extract Solutions and Enzymatic Pretreatments from Porphyra)

  • 안세라;구재근
    • 수산해양교육연구
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    • 제29권1호
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    • pp.108-117
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    • 2017
  • 김은 우리의 주요한 식품 자원으로 단백질 함량과 탄수화물의 함량이 매우 높다. 김에는 다량의 단백질과 탄수화물이 존재한다. 특히 탄수화물에는 isofloridoside과 floridoside 등의 유리당 뿐 아니라 3,6-anhydro-L-galactose와 ester sulfate 등을 함유한 porphyran과 xylose, mannose로 이루어진 hemicellulose가 함유되어있다. 본 연구에서는 추출 방법에 따른 porphyran과 hemicellulose의 추출, 분리 조건을 검토하기 위해 열수, 묽은 산, 알칼리로 추출한 추출물의 특성을 조사하였다. 수율은 열수 추출이 가장 높았고, 총당 함량은 묽은 산 추출이, 단백질 함량은 알칼리 추출이 가장 높아 열수와 묽은 산 추출에 의해 수용성 다당인 포피란이 효율적으로 추출되었으며 묽은 산으로 추출시 단백질의 함량이 적었다. 알칼리 추출 조건에서는 포피란의 추출이 적었으나 단백질이 다량 동시에 추출되었고 mannan은 추출되나 xylan은 추출되지 않았다. 효소 가수분해(Protamex, Flavourzyme, Alcalase, Viscozyme) 후 열수 추출한 수용성 다당의 수율은 효소 처리 시료가 34.3-39.1%로 효소 처리하지 않은 대조구에 비해 증가하였고 Flavourzyme 가수분해가 단백질 제거에 가장 효과적이었다. 또한 효소 처리한 수용성 다당의 점도가 저하하였고 의가소성 유체 특성을 나타내었다. 효소 처리 후 열수 추출하고 남은 잔사를 알칼리 추출한 경우 mannan의 함량은 protease인 효소 처리 시료가 Viscozyme 처리한 시료에 비하여 높았다. 반면에 Viscozyme 처리 후 알칼리 추출한 경우는 xylose의 추출 함량이 증가하였다.

Cellulosimicrobium sp. YB-43으로부터 mannanase C 유전자의 클로닝과 효소 특성 (Gene cloning of β-mannanase C from Cellulosimicrobium sp. YB-43 and characterization of the enzyme)

  • 윤기홍
    • 미생물학회지
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    • 제54권2호
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    • pp.126-135
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    • 2018
  • 여러 종류의 mannanase를 생산하는 Cellulosimicrobium sp. YB-43으로부터 mannanase B를 암호하는 manB 유전자와 효소의 특성이 보고된 바 있다. Mannanase C (ManC)로 명명한 효소의 유전자가 manB 유전자의 하류에 위치한 것으로 예상되어 이를 중합효소 연쇄반응으로 클로닝하여 manC 유전자의 염기서열을 결정하였다. ManC는 448 아미노산 잔기로 구성된 것으로 확인되었으며 glycosyl hydrolase family 5에 속하는 mannanase와 상동성이 높은 활성영역과 탄수화물 결합영역(CBM2)이 존재하였다. ManC의 활성영역은 Streptomyces sp. SirexAA-E (55.8%; 4FK9_A) 및 S. thermoluteus (57.6%; BAM62868)의 mannanase와 아미노산 배열의 상동성이 55% 이상으로 가장 높았다. Signal peptide 영역이 제거되고 카르복실 말단에 hexahistidine이 연결되도록 제조한 His-tagged ManC (HtManC)의 유전자를 재조합 대장균에서 발현하여 균체 파쇄액으로부터 HtManC를 정제하였다. HtManC은 $65^{\circ}C$와 pH 7.5에서 최대 활성을 보였으며 pH 7.5~10범위에서 활성에 큰 변화가 없었다. HtManC는 locust bean gum (LBG)과 konjac에 대한 분해 활성이 guar gum과 ivory nut mannan (ivory nut)에 비해 높았다. 최적 반응조건에서 LBG를 기질로 하여 반응 동력학적 계수를 측정한 결과 Vmax와 Km이 68 U/mg과 0.45 mg/ml로 나타났다. HtManC에 의한 만노올리고당(MOS)과 mannan의 분해산물을 TLC로 관찰한 결과 mannobiose 보다 중합도가 큰MOS로부터 mannobiose와 mannotriose가 주된 분해산물로 생성되었다. 또한 LBG, konjac과 ivory nut의 분해산물로 mannobiose와 소량이 mannose가 공통적으로 관찰되었다.

${\beta}-Mannanase$ 군(群)의 정제(精製) 및 그들의 성질(性質)에 관(關)한 연구(硏究) (Purification and Properties of ${\beta}-Mannanases$ from Germinated Guar Bean)

  • 이서래
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제7권
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    • pp.1-13
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    • 1966
  • (1) 콩과 식물인 guar (Cyamopsis tetragonolobus)의 발아종자(發芽種子)에서 세 가지의 다른 다당류가수분해효소(多糖類加水分解酵素)인 ${\beta}-1$, 4-mannanase A,B,C 를 추출(抽出), 유안염석(硫安鹽析), 이온교환(交換)크로마토그래휘 및 젤여과법(濾過法)에 의하여 분리(分離), 정제(精製)하였다. (2) 이들 효소(酵素)는 작용최적(作用最適) pH, 급속이온의 영향, 분자량(分子量), ior nut mannan A에 대한 Michaelis 항수(恒數), 가수분해(加水分解)의 한도(限度) 및 생성물등(生成物等) 여러 가지 점(點)에서 다르다. (3) ${\beta}-1$, 4-Mannanase A 와 C 는 기질(基質)인 ${\beta}-1$, 4-mannanase 에 random으로 작용(作用)하여 과당류(寡糖類)를 생성(生成)하는 endo형(型) 효소(酵素)임이 밝혀졌다. 한편 ${\beta}-1$, 4-mannanase B 는 같은 기질(基質)의 비환원말단기(非還元末端基)로 부터 수차로 작용(作用)하여 단당류(單糖類)를 생성(生成)하는 exo형(型) 효소(酵素)로 추리(推理)된다. (4) Guar 종자중(種子中)의 galactomannan 인 guaran에 이들 정제효소(精製酵素)를 작용(作用)시킨 결과(結果)로부터 기질(基質)의 구조(構造) 및 guar 종자(種子)의 발아중(發芽中)에 가지는 역할(役割)과 관련시켜 논의(論議)하였다.

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넙치(Paralichthys olivaceus)의 immunoglobulin M에 대한 단클론 항체 생산 (Production of Monoclonal Antibodies Against the Immunoglobulin M of Olive Flounder Paralichthys Olivaceus)

  • 김위식;김기홍;김춘섭;오명주
    • 한국수산과학회지
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    • 제50권2호
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    • pp.169-174
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    • 2017
  • Immunoglobulin M (IgM) was purified from olive flounder Paralichthys olivaceus sera using mannan-binding protein (MBP) and protein L affinity columns (designated as MBPIgM and ProLIgM, respectively). A monoclonal antibody (MAb) against olive flounder IgM was produced. The MBPIgM and ProLIgM had apparent molecular weights of 77, 73, and 28 kDa in SDS-PAGE. Nine hybridomas secreting MAbs against olive flounder IgM were established: five MAbs for MBPIgM (1, 2, 3, 4, and 5) and four for ProLIgM (6, 7, 8, and 9). Western blotting indicated that seven MAbs recognized heavy (H; MAbs 1, 2, 3, 4, 5, 6, and 7) chains and one recognized light (L; MAb 9) chains of IgM, while MAb 8 did not recognize IgM. The results of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with bovine serum albumin (BSA, antigen) and the nine MAbs revealed that the optical density (OD) values of sera differed significantly between BSA- and non-immunized fish, despite some sera from non-immunized fish with slight high OD values. These results suggest that the MAbs produced in this study reacted specifically with the IgM from olive flounder.

Zymolyase-20T에 대한 Saccharomyces cerevisiae D-71과 Zygosaccharomyces rouxii SR-S의 감수성 (Susceptibility of Saccharomyces cerevisiae D-71 and Zygosaccharomyces rouxii SR-S to Zymolyase-20T)

  • 정창기;김찬조;이종수
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.136-141
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    • 1988
  • 고온 발효성인 Saccharomyces cerevisiae D-71과 내삼투압성인 Zygosaccharomyces rouxii SR-S를 여러 조건에서 배양하여 Zymolyase-20T에 대한 감수성을 조사하였다. Sacch. cerevisiae D-71의 glucan과 mannan 함량은 각각 l4.5%와 14.8% 이었고 Zygosacch. rouxii SR-S는 24.0%와 19.0% 이었다. 0.5% methionine 과 0,1% glucose를 함유한 wickerham 합성배지에 Sacch. cerevisiae D-71를 배양하여 얻은 세포의 Zymolyase-20T에 대한 감수성은 66% 이었고 $K_2$HPO$_4$와 aminobenzoic acid를 결핍시켰을 때 감수성이 가장 낮았다. 또한 0.5% peptone과 o.15% methionine 및 0.1% glucose를 함유한 wickerham 합성배지에 Zygosacch. rouxii SR-S를 배양하여 얻은 세포의 감수성은 80% 이었고 KI와 pyridoxine을 결핍시켰을 때 감수성이 가장 낮았다. $25^{\circ}C$에서 YMPG 배지에 Sacch. cerevisiae D-71를 접종하여 12시간 정치배양한 세포의 Zymolyase-20T에 대한 감수성은 76% 이었고 Zygosacch. reuxii SR-S를 같은 조건으로 30시간 배양한 세포의 감수성은 82%로서 wickerham 합성배지에서의 감수성보다 더 좋았다.

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Evaluation of Lac Cultivation in Two South-Western Districts of Bangladesh

  • Bahar, Habibullah;Islam, Tarikul;Islam, Monirul;Mannan, Abdul
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제15권1호
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    • pp.79-82
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    • 2007
  • Lac is the dermal secretion of lac insect, Kerria lacca Kerr., which is used to make expensive natural dye, burnish, coating materials, in cosmetics and jewelry industry. Though it is very perspective industry and available of host plants over the country especially in southern districts of Bangladesh, lac cultivation is confined within some northern districts of Bangladesh. Experiment was conducted to find out the possibility of lac cultivation in two southwestern districts of Bangladesh: Khulna and Satkhira compared to Chapainowabgonj, the key lac producing district in Bangladesh, during February-October, 2006. The bark thickness, bark weight of ber plant, ratio of harvested and inoculated lac sticks, harvested raw lac, and harvested processed lac were measured and compared. Statistically, similar performance of lac cultivation was found regarding all parameters in three districts. These results recommended that lac cultivation is possible at the south-western coastal part of Bangladesh.

Percolation 공정에 의한 목질계 헤미셀룰로오스의 묽은산 전처리 (Dilute Acid Pretreatment of Woody Hemicellulose Using a Percolation Process)

  • 염동문;김성배;박순철
    • KSBB Journal
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    • 제13권3호
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    • pp.312-319
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    • 1998
  • The dilute-acid pretreatment/hydrolysis of hemicellulose in oak wood using a percolation reactor was investigated. The experimental conditions ranged 160∼180$^{\circ}C$ and 0.05∼0.2 wt.% sulfuric acid. XMG(xylan+mannan+galactan) recovery was higher when sulfuric acid was used as leaching solvent than water. Also it was important for high XMG recovery to keep leaching temperature higher after reaction. XMG recovery was decreased as the size of wood chips was increased. At an optimum condition (reaction condition= 170$^{\circ}C$, 0.1% sulfuric acid, 1ml/min, 10min, leaching condition=0.1% sulfuric acid, 2mL/min, 20 min), the product yield and the sugar concentration were about 92% and 2.7%, respectively.

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