The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of Saengangeonbitang-gasamchilgn(SGGBTGSCG) on collagen production in rat hepatic stellate cells(HSC) and on the TAA-induced chronic liver injury model in rats. Methods : 1) HSCs were treated with SGGBTGSCG extract powder(50% EtOH SGGBTGSCG, dw SGGBTGSCG). After the treatment, MTT assay, BrdU assay and procollagen assay were done. In addition, gene expressions of collagen type $1{\alpha}2$, ASMA, TIMP1, and TIMP2, all of which are known to be associated with liver fibrosis, were analyzed by RT-PCR. 2) Liver fibrosis was developed in rats by injection of TAA 3 times a week for 5 weeks. After the SGGBTGSCG-treatment, body weight, liver & spleen weight, liver function test, the complete blood cell count and the change of portal pressure were studied. Results : In MTT assay, SGGBTGSCG significantly decreased the viability of HSCs in a dose-dependent manner. In BrdU assay, SGGBTGSCG significantly inhibited the HSC proliferation in a dose-dependant manner. In procollagen assay, SGGBTGSCG decreased procollagen production by HSC. In the change of rats' liver and spleen weight, TAA+SGGBTGSCG groups showed little difference compared with TAA-only group. In the liver function test, SGGBTGSCG decreased the serum level of ALT, AST, and Alp elevated by TAA. In the complete blood cell count, SGGBTGSCG significantly decreased WBC elevated by TAA and increased RBC and Hct lowered by TAA. In the change of portal pressure, SGGBTGSCG decreased portal pressure elevated by TAA. Conclusions : These results suggest that SGGBTGSCG is beneficial in the treatment of cirrhotic patients as well as for patients with chronic hepatitis.
홍화는 예로부터 '사람의 건강에 도움이 된다'고 해서 '잇꽃'으로 불려져 왔으며 동의보감에서는 꽃잎이 홍색을 나타내기 때문에 홍화(紅花)로 소개되어 있다. 예로부터 홍화는 꽃잎을 압착후 정제된 색소를 이용하여 옷감에 천연색소를 입히는 염료와 연지의 재료로 사용되기도 하였다. 현대에 와서는 홍화의 주성분인 폴리페놀 화합물(Polyphenol cocktail) 성분이 건강식품업계에서 항노화 및 항산화물질로 알려지면서 관심의 대상이 되고 있다. 금번연구에서는 홍화의 주성분인 폴리페놀 화합물이 청소년기 혹은 장년기에서도 고민거리가 되고 있는 여드름균의 생성을 억제시킬 수 있는 항균, 항염효능이 있음을 DDT(Disk Diffusion Test) assay, MTT assay, NF-${\kappa}$B Luciferase activity inhibition assay의 in vitro법으로 확인하고 더불어 인체안면에 대한 임상시험에 사용할 세안화장품 제형의 화장비누 시제품을 제조하여 여드름피부의 개선 효과가 있음을 시험하고자 한다. 또한 이번 연구는 여드름용 화장비누 개발에 진일보하여 약용화장품 산업의 발전에 기여할 것임을 확신한다.
Objectives : This study was carried out to evaluate the effects of five fractions on cell viability, cell cycle progression and apoptosis. Methods : This study employed MTT assay, Cell cycle analysis, Cpp32 protease assay, DNA fragmentation assay and Quantitative RT-PCR analysis. Results : In MTT assay, the butanol fraction of Injinsaryung-San has showed magnificent viability, while the $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction also showed higher viability than the control group. The $H_2O$ fraction of Injinsaryung-San has showed magnificent viability, and butanol fraction and ethylacetate fraction of Injinsaryung-San with etoposide have also showed higher viability than the only etoposide group. Cell cycle analysis showed that each fraction of Injinsaryung-San had no significant effect on the cell cycle. DNA fragmentation assay showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction carried inhibitory effects on apoptosis induction. Cpp32 protease activity assay showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction decreased Cpp32 protease activity, with the butanol fraction displaying greater effects. Quantitative RT-PCR showed that the butanol fraction, $H_2O$ fraction and ethylacetate fraction suppressed Fas and Bax genes, the butanol fraction increased BcI-2 gene, however no effect on Cpp32. Conclusions : The data shows that the butanol fraction of Injinsaryung-San increases the hepatocyte viability and has the heptocelluar protective effect by the suppression of apoptosis through gene regulation.
Mannan, Mohd Nazir;Kazmi, Munawwar Husain;Chakraborty, Alokananda;Zakir, Mohammad;Ahmad, Tasleem;Lahari, K.
셀메드
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제10권4호
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pp.27.1-27.6
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2020
Cancer is one of the leading cause of mortality in India as well as worldwide. The management of cancer by conventional therapy has shown life threatening adverse effects. The researchers are now exploring the natural way of treatment. Unani system of medicine have rich literature for cancer and many compound formulations have been described in this system. Unani system of medicine is based on holistic approach and treat human being as a unit with natural herbs, mineral and animal origin drugs. An important compound Unani formulation (CUF) from the literature has been chosen to explore the Unani claim of its anticancer activity. The phytochemical constituents were assessed using standard phytochemical screening method. Antioxidant property of this formulation was assessed by DPPH assay. The DPPH free radical scavenging assay was carried out by colorimetric method and ascorbic acid was taken as a positive control. Three different extracts of CUF on different concentrations were used to screening on human breast cancer (BCC) MCF-7 cell line. For the estimation of in-vitro cytotoxic potency of the investigated extracts was assessed on MTT assay by using trypan blue method and paclitaxel was used as the standard. Hydro-ethanolic (HE) extract showed highest free radical scavenging activity among all extracts. DPPH Assay showed substantial antioxidant activity of these extracts in hydro-ethanol extract at 1㎍ concentration of CUF. The CUF showed antioxidant and anticancer activity. The claim made by Unani physician has been proved.
본 연구의 목적은 NIH3T3와 HepG2 세포에서 에탄올 유도 세포독성 및 유전독성에 대하여 녹차엑기스(GTE)와 epigallocatechin-3-gallate (EGCG)의 보호작용을 평가하는데 있다. 세포생존율은 MTT assay를 실시하였으며 DNA 손상도는 Comet assay로 실시한 결과 에탄올은 농도의존적인 세포독성과 유전독성을 나타내었다. 한편 GTE와 EGCG는 에탄올 유도 세포독성 및 DNA 손상에 대하여 유의성 있는 억제효과를 나타내었으며 DPPH시험과 LDL oxidation 및 8OH-2'dG 생성시험에서 항산화효과를 나타내었다. 한편 녹차성분 함유 시판 리큐르주도 순수 에탄올에 비하여 세포독성억제 및 DNA 손상억제효과를 나타내었다. 이상의 시험결과 GTE와 함유 EGCG는 항산화성 유전독성억제기전을 통한 에탄올독성저감 물질로 판단된다.
Epigallocatechin gallate (EGCG) was reported to exert weak cytotoxicity against normal healthy cells such as C3H10T1/2 cells, but profound inhibitory effects on the initiation or promotion stage of chemical carcinogenesis in mammary gland, blood and mouse skin. This study was carried out to develop antitumor agents with weak side effects and strong antitumor activity. Human skin melanoma cells (HBT 69) and human oral epitheloid carcinoma cells (OCL 17) were cultured in RPMI-1640 media containing 10% fetal bovine serum, antibiotic, and fungizone. After incubation for 24 hrs, the cells were treated with various amounts of (EGCG) for 48 hrs. The growth inhibitory effects of EGCG in human oral epitheloid carcinoma cells were evaluated by the 3- (4,5-djmethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT), neutral red (NR), and sulforhodamine B protein (SRB) assays of colorimetric methods. The light microscopic study was also carried out to observe morphological changes of the treated cells. These results obtained were as follows; 1. Significantly inhibitory effects of EGCG against cultured human oral epithelioid carcinoma cells. 2. Significantly inhibitory effects against cultured human skin melanoma cells treated with 50 $\mu$M EGCG, but decreased inhibitory effects in 100 $\mu$M EGCG. 3. Degenerative changes against cultured human oral epitheloid carcinoma cells. 4. Degenerative changes against human skin melanoma cells treated with 50 UM EGCG, but recovered degenerative changes in 100 $\mu$M EGCG.
Objective : Lonicerae Flos has detoxifying properties and been used as antipyretic, antibacterial and antitumor. Fermentation of herbal medicine is known to increase the absorption, enhance effectiveness, decrease herbal toxicity and reduce side-effects. This study was performed to measure the effects of fermented Lonicerae Flos on influenza A/WSN (H1N1) virus replication. Material and Methods : Lonicerae Flos was fermented by Lactobacillus casei PM1. Fermented Lonicerae Flos was treated for 12 hours to MDCK (Mardin Darby canine kidney) cells, then cell-virulence was observed by MTT assay for 12 hours, 24 hours, and 36 hours after treatment. Following cases were conducted for 0, 10, 100, and $1000{\mu}g/ml$ concentrations of fermented Lonicerae Flos under the same time-frame; the fermented Lonicerae Flos was treated to MDCK cells before and after contamination by A-type influenza virus. The fermented Lonicerae Flos and the virus were mixed directly. The influence was observed by MTT assay and plaque assay. Results : These findings suggest that the fermented Lonicerae Flos inhibited the virulence of influenza A virus in MDCK cells and suppressed the plaque forming colonies induced by influenza A virus. Furthermore, pretreatment with fermented Lonicerae Flos was more effective than post-treatment. The titer of influenza virus was reduced for all before and after influenza A virus inoculation.
We investigated that the extract of Aloe vera L. and its fractions exert antimutagenic activity against Salmonella typhimurium TA98 and TA100, and antileukemic effect against K562 human leukemia cell line. The aqueous ethanolic extract of A. vera L. was revealed to have antimutagenic effect on the AF-2 (2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)-acrylamide) in Salmonella mutation assay. Among the three fractions (fractions A, B and C) separated by silica gel chromatography, fraction C $(50\;{\mu}g/plate)$ exhibited the greatest antimutagenic effect on the AF-2 with inhibition rate of 84 and 90% in Salmonella typhimurium TA98 and TA100, respectively. The fraction C $(500\;{\mu}g/ml)$ inhibited the growth of K562 human leukemia cell line by 93% in MTT assay. However, the components of A. vera L. did not exhibit cytotoxic effect against MDBK bovine normal kidney in MTT assay.
The purpose of this study was to determine the role of substituted groups in phenolic compounds to develop an anticancer agent having strong cytotoxicity against cancer cells but weak against normal cells. The phenolic compounds used in this study were gallic acid and ferulic acid with hydroxyl and carboxyl groups, syringic acid with hydroxyl, carboxyl and methoxy groups, and pyre-gallol with hydroxyl groups. Cytotoxicities of these compounds were evaluated by MTT assay for cell viability and XTT assay for cell adhesion activity in normal human skin fibroblast (Detroit 551) and human skin melanoma (SK-MEL-3) cells. Syringic acid, gallic acid and ferulic acid decreased the cell viability and cell adhesion activity in SK-MEL-3 cells but not in Detroit 551 cells while pyrogallol decreased in both cells. The susceptibility of cell viability based on the $IC_{50}$ values of MTT assay in Detroit 551 cells was in the following order: pyrogallol > gallic acid > ferulic acid > syringic acid, while it was in SK-MEL-3 cells: Syringic acid > progallol > ferulic acid > gallic acid. These results suggest that carboxyl and methoxy groups of these compounds play an important role in selectivity of cytotoxicity in normal and cancer cells.
The whole plants of Selaginella tamariscina, Orostachycis japonicus, the cortex of Ulmus mandshurica, and the wood of Alnus japonica have been used as folk medicine for treating cancer. The cytotoxic activity of these plants were tested using a calorimetric tetrazolium assay (MTT assay). S. tamariscina and A. japonica showed mild $IC_{50}$ value, comparing with O. japonicus and U. mandshurica. So, MeOH extracts of S. tamariscina and A. japonica were partitioned into $CHCl_3$, EtOAc and n-BuOH, successively. The $CHCl_3$, EtOAc and BuOH fractions of S. tamariscina and A. japonica showed low percent of survival against $P_{388}$ and $MKN_{45}$ cells respectively. To isolate active components, they were subjected to silica gel column chromatography. Compound I was obtained from EtOAc extracts of S. tamariscina and identified as amentoflavone by chemical and spectral analysis. Amentoflavone inhibited the survival of P388 cells dose dependently, while not clearly inhibited that of $MKN_{45}$ cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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