MicroRNAs (miRNAs) are highly conserved, short non-coding RNAs that regulate gene expression at the posttranscriptional level. Although many miRNAs are identified in muscles and muscle cells, their individual roles are still not fully understood. In the present study, we investigated a muscle highly-expressed miRNA, miR-127-3p, in C2C12 myoblasts and tissues of goats with different muscle phenotypes (Boer vs Wushan black goats). Our results demonstrated that i) miR-127-3p was extensively expressed in tissues of goats; ii) miR-127-3p was higher expressed in muscle, spleen, heart, and skin in the muscular goats (Boer goats) than the control (Wushan black goats). Then we further characterized the dynamical expression of miR-127-3p, MyoD, MyoG, Myf5, Mef2c, and Myosin in the proliferating and differentiating C2C12 myoblasts at day of 0, 1, 3, 5, and 7 in culture mediums. Especially, we found that miR-127-3p was significantly higher expressed in the proliferating than differentiating cells. Our findings suggest that miR-127-3p probably plays roles in the proliferation and differentiation of myoblasts, which further underlies regulation of muscle phenotype in goats.
The present study was carried out to investigate the effects of co-culture cells and growth factors on in vitro culture of Korean native cattle(KNC) embryos fertilized in vitro. Two-eight cell embryos were cultured in vitro using 4 types of co-culture cells and 3 growth factors singly or in combination. The results were as follows, In the co-culture of 2~8 cell embryos with bovine oviductal epithelial cell(BOEC), granulosa cell(BGC), uterine epithelial cell(BUEC) and mouse embryonic fibroblast (MEF) monolayers, the developing rate to blastocysts was significantly(P<0.05) higher with BUEC(32.1%) than with MEF(15.3%), BGC(13.2%) and non co-culture control(11.6%). When the morula co-cultured with BOEC for 5 days following in vitro fertilization were co-cultured with BOEC continuously or with BUEC, respectively, the developing rate to blastocysts was higher with BUEC(73.9%) than with BOEC(56.0%). To examine the effects of growth factors on in vitro development of 2~8 cell embryos, epidermal growth factor(EGF), transforming growth factor-$\beta$l(TGF-$\beta$l) and insulin-like growth factor-1(IGF-1) were added singly or in combination to TCM 199 maturation medium with respective concentration. In a addition of each 10, 30 and SOng /rnl EGF, the developing rate to blastocysts was the highest in lOng /ml EGF(25.3%). In addition of each 1, 2 and Sng /mi TGF-$\beta$1, the developing rate to blastocysts was the highest in lng /ml TGF-$\beta$1(28.8%). In addition of each 50, 100ng/ml JGF-l, the developing rate to blastocysts was higher in 100ng/ml IGF-l(16.5%) than in SOng/mi IGF-1(12.9%). When lOng /ml EGF and lng /ml TGF-$\beta$l was added singly or in combination, the developing rate to blastocysts was similar in groups added singly or in combination with EGF and TGF-$\beta$l (23.l~24.6%), although higher than in control(16.7%). In the co-culture of 2~8 cell embryos Wth BOEC + each 10, 30 and 5Ong /rnl EGF, the developing rate to blastocysts was significantly(p<0.05) higher in BOEC + long /ml EGF(32.3%) than in BOEC + 3Ong /ml EGF(18.9%) and BOEC + song /ml EGF(9.7%). In the co-culture of 2~8 cell embryos with BOEC + each 1, 2, Sng /ml TGF-$\beta$l the developing rate to blastocysts was higher in BOEC + Sng/rnl TGF-$\beta$l(28.2%) than in BOEC + lng /ml TGF-$\beta$l(21.7%) and BOEC + 2ng/ml TGF-$\beta$l(21.4%). In summary, higher developing rate to blastocysts were obtained with co-culture of BUEC for co-culture system, with addition of lOng /ml EGF or lng /ml TGF-$\beta$l for growth factor culture system, and with co-culture of BOEC + lOng /ml EGF or BOEC + Sng /ml TGF-$\beta$l for co-culture + growth factor culture system.
To clarify the role of surface protective antigen A (SpaA) in the pathogenesis of Erysipelothrix rhusiopathiae C43065 (serotype 2), the spaA deletion mutant of E. rhusiopathiae ${\Delta}spaA$ was constructed by homologous recombination. The virulence of the ${\Delta}spaA$ mutant decreased more than 76-fold compared with that of the wild-type strain C43065 in mice. The mutant strain was sensitive to the bactericidal action of swine serum, whereas the wild-type strain was resistant. The adhesion of wild-type strain to MEF cells was inhibited significantly by treatment with rabbit antiserum against recombinant SpaA (rSpaA) as compared with the treatment with normal rabbit serum, but the mutant strain was not affected. The mutant strain was readily taken up by mouse peritoneal macrophages in the normal rabbit serum, whereas the wild-type strain was resistant. Whereas the rabbit antiserum against rSpaA promoted the phagocytosis of wild-type strain by macrophages, the mutant strain was not affected. In addition, mice vaccinated with the formalin-killed mutant strain were provided 40% protection against challenge by the homologous virulent strain as compared with those with wild-type strain, NaOH-extracted antigen, or rSpaA, which provided more than 80% protection against the same infection. These suggested that SpaA has an important role in the pathogenesis of E. rhusiopathiae infection and could be a target for vaccination against swine erysipelas.
Objectives To evaluate the clinical usefulness between muscle energy techniques (MET) and transcutaneous electrical nerve stimulator (TENS), we performed both on elector spinae muscle of acute low back pain patients. Methods After performing MET and TENS, we compared both in terms of electrical activity. We performed MET or TENS on elector spinae muscle of acute low back pain patients in each group (n=15,15). After performing MET or TENS, we analyzed root mean square (RMS), median edge frequency (MEF) and asymmetry index (AI). Results 1. After performing MET on elector spinae muscle of acute low back pain patients, RMS was significantly decreased compared with before (p<0.005). 2. After performing TENS on elector spinae muscle of acute low back pain patients, RMS was significantly decreased compared with before (p<0.005). 3. After performing MET on elector spinae muscle of acute low back pain patients, asymmetric index was significantly decreased compared with before (p<0.05). Conclusions According to above results, performing MET on elector spinae muscle of acute low back pain patients has effect in terms of RMS and asymmetric index. And performing TENS on elector spinae muscle of acute low back pain patients also has similar effect in terms of RMS but has not in terms of asymmetric index.
Geft is a guanine nucleotide exchange factor, which can specifically activate Rho family of small GTPase by catalyzing the exchange of bound GDP for GTP. Geft is highly expressed in the excitable tissue as heart and skeletal muscle and plays important roles in many cellular processes, such as cell proliferation, migration, and cell fate decision. However, the in vivo role of Geft remains unknown. Here, we generated a Geft conditional knockout mouse by flanking exons 5-17 of Geft with loxP sites. Cre-mediated deletion of the Geft gene in heart using Mef2c-Cre transgenic mice resulted in a dramatic decrease of Geft expression. Geft knockout mice develop normally and exhibit no discernable phenotype, suggesting Geft is dispensable for the development of the second heart field in mouse. The Geft conditional knockout mouse will be a valuable genetic tool for uncovering the in vivo roles of Geft during development and in adult homeostasis.
This Study was conducted to investigate Muscle Test of Point Selection through CRA(Contact Reflex Analysis) Muscel Diagnosis. So this study used to compare and analyze the effects of Muscel(Deltoid Muscel of Posterior) RMS(Root Mean Squared) and MEF(Median Edge Frequency) Among Groups that do not respond to questionnaire, Tonguibogam Naegyeongpyeon Small Intestine Group, Small Intestine MeridianPathway Primary Symptom and Secondary Symptom Group and Kwanwon(CV4) meridian Principal action Group. The questionnaire is composed of 23 items. The questionnaire was intended to elicit information on assorting into 4 groups. After Survey, Subject had to Muscle test subjects. Muscle experimental methods are as follows: Holding the shoulder without contacting Kwanwon. Holding the shoulder contacting Kwanwon. The first iteration. Group 1,2,3 were increased sEMG RMS compared with First experiment and Second experiment. Group 4(Including Uterus and Intestinal Flora Problem) were decreased sEMG RMS compared with First experiment and Second experiment. This test means that it is similar to diagnosis CRA and Small intestine channel of hand taiyang muscle, not Small Intestine MeridianPathway. It is suggested that subjects with a Small Intestine problem(Uterus and Intestinal Flora Problem) shows the results of decreasing posterior Deltoid Muscular strength. It means that CRA muscle diagnosis is associated with Alarm points diagnosis. But it doesn't consider influence of fat on the surface EMG.
Kim, Young-Eun;Park, Jeong-A;Nam, Ki-Hoan;Kwon, Hyung-Joo;Lee, Young-Hee
BMB Reports
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제42권3호
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pp.148-153
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2009
Pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC) is a stable anti-oxidant or pro-oxidant, depending on the situation, and it is widely used to inhibit the activation of NF-${\kappa}B$. We recently reported that PDTC activates the MIP-2 gene in a NF-${\kappa}B$-independent and c-Jun-dependent manner in macrophage cells. In this work, we found that PDTC activates signal transduction pathways in mouse ES cells. Among the three different mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways, including the extracellular-signal-regulated kinase (ERK), p38 MAP kinase, and stress-activated protein kinase (SAPK)/Jun N-terminal kinase (JNK) pathways, only the ERK pathway was significantly activated in mouse ES cells after stimulation with PDTC. Additionally, we observed a synergistic activation of ERK and induction of c-Fos after stimulation with PDTC in the presence of mouse embryonic fibroblast (MEF) conditioned medium. In contrast, another NF-${\kappa}B$ inhibitor, BMS-345541, did not activate the MAP kinase pathways or induce expression of c-Fos. These results suggest that changes in the presence of the NF-${\kappa}B$ inhibitor PDTC should be carefully considered when it used with mouse ES cells.
대부분의 알려진 알러젠들은 단백분해효소의 성격을 가지고 있고 이는 알레르기 반응에서 Th2 면역 반응을 일으키는 데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이러한 단백분해효소들과 반응하는 것으로 알려진 protease activated receptor (PAR) 는 4가지 종류가 있으며, 이 중 PAR2의 경우 알레르기 질환과 많은 상관관계를 보여 많은 연구가 되고 있다. 본 연구는 Aspergillus protease 알러젠에 의한 초기 및 만성 Th2 면역반응에서 PAR2 의 역할을 규명하기 위해 Aspergillus protease 알러젠으로 정상쥐와 PAR2 유전자 결핍쥐 모두 Th2 반응을 유도한 후 면역세포의 침윤 정도 및 Th2 관련 cytokine 및 chemokine 유전자들의 발현 정도를 비교하였다. 그 결과 Aspergillus protease 알러젠으로 비강내로 1회 처리했을 경우 중성구의 침윤이 두드러지는데, 이때 PAR2 결핍 마우스는 이러한 면역세포의 침윤이 유의적으로 감소하였다. 또한, 이와 관련된 IL-25, TSLP, Eotaxin 유전자들의 발현 역시 PAR2 결핍 마우스에 현저히 감소하였다. 한편, Aspergillus protease 알러젠으로 비강내로 6회 처리했을 경우 중성구 대신 호산구의 침윤이 두드러지지만 PAR2 결핍 마우스에서 그 정도가 유의적으로 낮았다. OVA 특이 IgE와 IgG1 농도 역시 현저하게 PAR2 결핍 마우스에서 낮았고, CCL21의 발현이 PAR2 결핍마우스 MEF cells에서 현저히 감소하였다. Th2 초기 면역반응에서 가장 중요한 IL-25의 발현에 MAKP p38 pathway가 관여한다는 것을 이번 연구에서 알 수 있다. 본 연구를 통해 Aspergillus protease 알러젠으로 유도된 알러지성 기관지 염증 반응에서 초기 반응뿐만 아니라 만성반응에서도 PAR2가 중요한 것을 알 수 있다.
Human cytomegalovirus (HCMV) has the ability to activate the expression of many viral and cellular genes. Among various viral proteins, the immediate early proteins (IE1-72kDa, IE2-86kDa) have been known to be potent transactivators. The product of c-jun proto-oncogene is important in cell activation and differentiation. Here, we tried to find out if the IE could activate the c-jun promoter and also tried to identify the responsible sequence elements in the c-jun activation by IE1-72kDa. We found HCMV IE expression transactivated the c-jun promoter in human embryonal lung fibroblasts (HEL). The activation fold by IE1-72kDa, IE2-86kDa and IE2-55kDa was 23, 35, and 5, respectively. When the expression of each IE was combined, it showed synergism. Expression of (IE1-72kDa + IE2-86kDa) and (IE1-72kDa + IE2-86kDa + IE2-55kDa) resulted in 131 and 162 fold increase, respectively. The c-jun promoter region between -117 and -59 contains binding sites for the transcription factors Spl, CAAT, AP-l like (ATF/CREB), and MEF2. Transient expression assays were performed using various reporter plasmids containing the c-jun promoter-regulatory region linked to the luciferase gene and a plasmid expressing HCMV IE1 gene. Deletional and point mutational analysis showed that the sequence between -225 to -160 and the CTF binding site were involved in the up-regulation of c-jun promoter.
본 시험은 애멸구의 MEP제에 대한 저항성이 유전적 특성에 기인된 것인지를 알아보기 위하여 나주지역의 야외집단을 채집하여 감수성인 실험실 계통과 교배하고 $F_1,\;BC_1F_1$ 및 $F_3$에 대하여 Probit 법으로 분석하고 $LD_{50}$을 비교한 결과는 다음과 같다. 1. 나주지역의 애멸구 야외집단은$LD_{50}$이 자충충의 경우 0.0029ug/충으로 감수성인 실험실계통의0.0008ug/충에 비하여 저항성의 차를 타나내었다. 2. 나주지역 야외집단이 나타내는 저항성은 $F_1$과 $BC_1F_1$ 의 분석에서$LD_{50}$ 및 사충율의 회귀가 저항성인 친쪽으로 가깝게 나타나는 경향을 보여 유전적 특성에 기인된다고 생각되었다. 3. $F_2$ 집단의$LD_{50}$은 양친의 중간 정도였으며 넓은 분산을 보이고 있어 MEP제에 대한 저항성의 유전은 수개의 유전자가 관여할 것으로 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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