The ultimate aim of periodontal treatment is periodontal regeneration, which necessiates the regeneration of bone tissues. This paper investigated the effect of growth factor on bone cells. Platelet-derived growth factor(PDGF) is the one of the polypeptide growth factor that has been reported as a biological mediator which regulates activities of the cell proliferation, migration and metabolism of undifferentiated mesenchymal cells. The purpose of this study is to evaluate the effects of PDGF on bone nodule formation and ALP activity of MC3T3-El cells. Cells were seeded at $1{\times}10^5cells/well$ in alpha-modified eagle medium containing 10% fetal bovine serum, lOml beta-glycerophosphate and $50{\mu}g/ml$ of ascorbic acid. PDGF 0, 0.1, 1, 10 ng/ml were added to the cells at a confluent state and cultured for 3, 7, 14, 21, 28 days. We examined bone nodule formation and alkaline phosphatase activity. The results were as follows : There were bone nodule formation at day 21 both in control and all the experimental groups, and at day 28, all the experimental groups showed much more bone nodules than control groups. Compared to control-l group, ALP activity was increased in PDGF O.1ng/ml group and was decreased in 1,10ng/ml PDGF treated groups.{P< 0.05, P< 0.01) Compared to control-2, ALP activity was decreased in all the experimental groups except PDGF 0.1ng/ml in 21 day group. In the time-response effect, ALP activity was increased by the day 14 in all the experimental groups and thereafter ALP activity was decreased.(P<0.05, P< 0.01) In the dose-response effect, ALP activity was decreased as the dose of PDGF was increased, and after 21 day ALP activity was lowest in 1 ng/ml group, ALP activity was highest in the day 7 in control group and 0.1 ng/ml, 14 day experimental group. In conclusion, PDGF is considered more effective in the proliferation than differentiation of osteoblast-like cells, and it may be useful to study the combined effect of PDGF and other growth factors on osteoblast-like cells.
본 연구는 우리나라의 식물, 특히 야생 식물에 기생하는 응애과에 대한 분류 학적 검토를 위하여 이루어졌다. 주로 호남지방에서 1986년 5월부터 1987년 6월 사이에 다음과 같은 12종(*한국미기록종)의 응애가 채집되어 관찰과 실험에 사용되었다. 1. Panonyehus citri (McGregor) 귤응애 *2. Eotetranyehus populi Koch 버들응애 (신칭) * 3. E. Smithi Pritchard and Baker 스미드응애(신칭) *4. Schizotetranyehus bambusae Reck 대응애 (신청) *5. S. celarius (Banks) 납작대응애 (신칭) *6. S. leguminosus Ehara 싸리응애 (신청) *7. Oligonychus orthius Rimando 억새응애(신칭) 8. Tetranyehus kanzawai Kishida 차응애 *9. T. phaselus Ehara 콩응애(신청) *10. T. truneatus Ehara 뽕나무응애(신청) 11. T. vienensis Zacher 벚나무응애 12. T. urtieae Koch 점박이응애. 이와 아울러 전부절의 조간체에 대한 미세구조를 관찰, 비교하였고, 전기영 동법에 의한 효소분석을 실시하여 비교함으로써 종 및 속간의 상호유연관계를 추찰하여 보았다.
본 연구는 축우의 모색발현에 관여하는 MC1R, MGF 및 TYRP1 3종류의 모색 유전자의 PCR-RFLP marker를 이용하여 쇠고기 품종 판별기술을 개발하고자 수행하였다. MC1R 유전자의 104번째 아미노산을 지정하는 codon에 GGT 염기를 갖고 있는 Holstein 젖소와 Angus 육우는 제한효소 인지부위가 존재하여 537 bp증폭산물이 절단되어 329와 208bp 두개의 band가 검출되었으나 한우에서는 GTG로 G 염기가 T염기로 치환됨으로써 제한효소 인식부위가 소실되어 537 bp의 단일 bind 만이 검출되었다. 따라서, 이처럼 MC1R 모색유전자의 품종 간 특정 염기서열의 차이가 곧 특정 제한효소의 염기 서열상의 인지 부위 차이를 가져와 한우와 Holstein 젖소 및 Angus 육우 품종간의 RFLP 유전자형 출현에 확실한 차이가 인정되어 한우 품종에 특이적인 MC1R 유전자의 RFLP marker를 이용한 한우육 판별이 가능하였다. 또한, MGF 유전자의 RFLP 유전자형 출현빈도에서 한우는 r/r형이 75%로 출현율이 매우 높은 유전자형으로 분석된 반면 Hereford종은 R/R 형이 80%로 출현율이 매우 높았고 Holstein종과 Angus종은 R/r형이 100% 출현함으로써 한우와 Holstein 및 수입육우 품종간의 MGF 유전자형 출현빈도에 뚜렷한 차이가 인정되었다. 한편, TYRP1 유전자의 RFLP유전자형을 분석한 결과 모든 품종에서 동일한 RFLP type이 검출되어 TYRP1 모색 유전자를 이용한 쇠고기 품종 구별은 불가능한 것으로 나타났다. 따라서, 소 모색 관련 MC1R과 MGF 두 유전자의 품종 특이적 PCR-RFLP 유전자형은 한우육과 국내산 Holstein젖소고기 및 Angus 수입육간의 품종을 식별하는데 매우 유용한 DNA marker로 이용될 수 있음이 확인되었다.
Objectives : Nitric oxide(NO) is a reactive free radical and a messenger molecule in many physiological functions. However, excessive release NO of induces neurotoxicity. We investigated whether a mixture of red ginseng and paeonia radix prossesses a protective effect against sodium nitroprusside(SNP)-induced apoptosis in the human neuroblastoma cell line SK-N-MC. Methods : We performed 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole(DAPD) staining, terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling(TUNEL)assay, DNA fragmentation assay, reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR), Western blot analysis, and caspase-3 enzyme activity assay in SK-N-HFC cells. Result : MTT assay showed that SNP treatment significantly reduced the viabilities of cells and that pre-treatment with the red ginseng and paeonia radix mixture alleviated SNP-induced cytotoxicity. The cells treated with SNP exhibited several apoptotic features, while those pre-treated fir 1 h with the mixture of red ginseng and paeonia radix 1 h prior to SNP expose showed reduced apoptotic features. In addition, the cells pre-treated with the red ginseng and paeonia radix mixture for 1 h prior to SNP expose increased bel-2 expressions, decreased Bax expressions, and decreased caspase-3 enzyme activity. Conclusions : These results show that the red ginseng and paeonia radix mixture exerts a protective effect against SNP-induced apoptosis in SK-N-MC cells.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제43권2호
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pp.100-105
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2017
Objectives: Localization of the mandibular canal (MC) and measurement of the height and width of the available alveolar bone at the proposed implant site in the posterior segment of the mandible using cone-beam computed tomography (CBCT) in patients with a single missing tooth. Materials and Methods: A cross-sectional study was performed where CBCT scans of the patients with a single missing tooth in the posterior segment of the mandible-premolar, I (1st) molar, and II (2nd) molar were used. The scans were assessed using OnDemand3D software (version 1.0; CyberMed Inc., Seoul, Korea) for localization of the MC asnd remaining alveolar bone both vertically (from the superior position of the MC to the crest of the alveolar ridge) and horizontally (buccolingual, 3 mm below the crest of the alveolar ridge). The findings were statistically analyzed using independent t-test. Results: A total of 120 mandibular sites (40 sites for each of the three missing premolar, I molar, and II molar) from 91 CBCT scans were analyzed. The average heights (from the alveolar crest to the superior margin of the MC) at the premolar, I molar, and II molar areas were $15.19{\pm}2.12mm$, $14.53{\pm}2.34mm$, and $14.21{\pm}2.23mm$, respectively. The average widths, measured 3 mm below the crest of the alveolar ridge, at the premolar, I molar, and II molar areas were $6.22{\pm}1.96mm$, $6.51{\pm}1.75mm$, and $7.60{\pm}2.08mm$, respectively. There was no statistically significant difference between males and females regarding the vertical and horizontal measurements of the alveolar ridges. Conclusion: In the study, the measurements were averaged separately for each of the single missing teeth (premolar, I molar, or II molar), giving more accurate information for dental implant placement.
Bone remodeling is characterized by the continuing processes of osteoblast-mediated bone formation and osteoclast-mediated bone resorption. Bone metabolism is tightly regulated at the local level by networks of hormones, cytokines, and other factors. In pathological conditions of bone remodeling, including osteoporosis and periodontal diseases, inflammatory cytokines and local mediators are responsible for enhancement of osteoclast resorption and inhibition of repair at the sites of bone resorption. TNF-${\alpha}$ is a pleiotropic hormone with actions on the differentiation, growth, and functional activities of normal and malignant cells from numerous tissues. TNF-${\alpha}$ has been proposed as a local mediator of the control of bone turnover in situations of chronic inflammation, and it has been assumed that the local source of TNF-${\alpha}$ is the monocyte in the adjacent bone marrow or the local circulation. TNF-${\alpha}$ is a potent inducer of bone resorption. TNF-${\alpha}$ is known to induce the activation of apoptotic signaling pathway, which leads to the apoptosis of bone cells. We demonstrated that treatment of murine osteoblastic MC3T3E1 cells with TNF-${\alpha}$ decreases proliferation as well as alkaline phosphatase (ALP) activity in a dose depenent manner. In addition, TNF-${\alpha}$ increases osteoclast-like cell formation in $1{\alpha}$, 25(OH)2D3 or PGE2-treated bone marrow cell culture. When cells were cultured in TNF-${\alpha}$ free ${\alpha}$-MEM, this inhibitory effect of ALP activity was reversible up to 10 ng/ml TNF-${\alpha}$, in contrast, at the 20 ng/ml TNF-${\alpha}$, irreversible. In this concentration, TNF-${\alpha}$ may induce apoptosis in MC3T3E1 cells. In this study, TNF-${\alpha}$ induces apoptosis resulting in chromosomal DNA fragmentation, preceded by JNK/SAPKs and caspase-3 activation. Our present results show that JNK/SAPKs and caspase-3 are activated by TNF-${\alpha}$, suggesting that the JNK/SAPKs and caspase-3 participate in the bone resorption, associated with apoptosis.
The clinical use of fluoride with a well known osteogenic action in osteoporotic patients is rational, because this condition is characterized by impaired bone formation. However, its anabolic effect has not been demonstrated well in vitro. The purpose of this study was to investigate the effects of sodium fluoride on the physiological role of osteoblastic cell. Osteoblastic cells were isolated from fetal rat calvaria. The results were as follows : 1. Mineralized nodules were shown in osteoblastic cell cultures, which had been maintained in the presence of ascorbic acid and ${\beta}-glycerophosphate$ up to 21 days. When cultures were treated with pulses of 48 hr duration before apparent mineralization was occurring, 2-fold increased in their number was detected. 2. Alkaline phosphatase activity of osteoblastic cells was inhibited by sodium fluoride in dose dependent manner. 3. The effect of sodium fluoride on the osteoblastic cell proliferation was measured by the incorporation of $[^3H]$-thymidine into DNA. As a result, sodium fluoride at $1{\sim}100{\mu}M$ increased the $[^3H]$-thymidine incorporation into DNA in a dose dependent manner. 4. The signaling mechanism activated by sodium fluoride dose-dependently enhanced the tyrosine phosphorylation of the adaptor molecule $Shc^{p66}$ and their association with Grb2, one of earlier events in a MAP kinase activation pathway cascade used by a significant subset of G protein-coupled receptors. 5. The phosphorylation of CREB(cAMP response element binding protein)was inhibited by the sodium fluoride in MC3T3E1 cells. In conclusion, the results of this study suggested that the mitogenic effect of the sodium fluoride in MC3T3E1 cell was stimulated in a dose-dependent manner and suggested "an important role for the interaction between She and Grb2" in controlling the proliferation of osteoblasts.
Bone remodeling is a dynamic process involving a constant balance between osteoclast-induced bone resorption and osteoblast-induced bone formation. Osteoclasts play a crucial homeostatic role in skeletal modeling and remodeling, and destroy bone in many pathological conditions. Previously, we reported that the hexane soluble fraction of Ficus carica inhibited osteoclast differentiation. Poly unsaturated fatty acids, such as ethyl docosahexaenoate (E-DHA), docosahexaenoic acid (DHA), cis-11,14-eicosadienoic acid (EDA) and eicosapentaenoic acid (EPA), were identified from the hexane soluble fraction of Ficus carica. Among them, E-DHA most potently inhibited osteoclastogenesis in RAW264.7 cells. E-DHA reduced the activities of JNK and NF-$\kappa}B$. E-DHA suppressed the expression of c-Fos and nuclear factor of activated T cells c1 (NFATc1). Interestingly, DHA increased the activity of alkaline phosphatase and expression of bone morphogenetic protein 2 (BMP2) more than E-DHA in MC3T3-E1 cells, suggesting that DHA may induce osteoblast differentiation. The data suggests that a combination of E-DHA and DHA has potential use in the treatment of diseases involving abnormal bone lysis, such as osteoporosis, rheumatoid arthritis and periodontal bone erosion.
Dadalt, J.C.;Gallardo, C.;Polycarpo, G.V.;Budino, F.E.L.;Rogiewicz, A.;Berto, D.A.;Trindade Neto, M.A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권10호
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pp.1483-1489
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2016
Most of amino acid (AA) digestibility values for feed ingredients are obtained using pigs cannulated in the distal ileum. The ileal-cannulated pig model uses pigs older than six weeks due to difficulties related to implanting the T-cannula in distal ileum of younger pigs and complications during the post-surgical recovery. However, to properly formulate the diet of weaned pigs, the nutritive value of feed ingredients should be determined with younger pigs. Thus, 25 weaned pigs were used to determine the apparent total tract digestibility (ATTD) of nutrients, energy, and apparent ileal digestibility (AID) and standardized ileal digestibility (SID) ileal AA digestibility of broken rice (BR), with or without multicarbohydrase (MC) and phytase (Phy) supplementation. Piglets were weaned at 23 d of age and individually housed in digestibility cages until 45 d of age. The trial consisted of 7 d of adaptation to the experimental diets and 3 d of excreta (feces and urine) collection. Ileal digesta was collected at slaughter (about 6 weeks of age). A completely randomized experimental design was used to determine the effects of MC and Phy. Reference diets (RD, 5% casein) was replaced by 30% of BR with or without MC, Phy, or MC+Phy. The RD was used to quantify endogenous AA losses. BR with Phy supplied had increased the ATTD of dry matter (p<0.05) and SID of histidine (p = 0.05), arginine, leucine, lysine, valine, alanine, and proline (p<0.05). BR with MC had been increased digestible energy and protein and SID for histidine (p<0.05). There was no interaction between Phy and MC on the BR nutrient digestibilities. Standardized amino acid digestibilities of BR, without enzymes, were lower than those values reported in the literature. The MC and Phy improved the digestibility of some nutrients and energy of BR in post-weaned piglet diets.
Chemotactic migration of bone forming cell, osteoblast, is an important event during bone formation, bone remodeling, and fracture healing. Migration of cells is mediated by adhesion receptors, such as integrins, that link the cell to extracellular matrix ligands, type I collagen, fibronectin, laminin and depend on interaction between integrin and extracellular ligand. Our study was designed to investigate the effect of extracellular matrix like fibronectin, laminin, type I collagen on migration of osteoblast. Migration distance and speed of MC3T3-E1 cell on extracellular matrix-coated glass were measured for 24 hours using 0.01% type I collagen, 0.01% fibronectin, 100 microliter/ml laminin. The migration distance and speed of MC3T3-E1 cell was compared using a video-microscopy system. To determine migration speed, cells were viewed with a 4 phase- contrast lens and video recorded. Images were captured using a color CCD camera and saved in 8-bit full-color mode. The migration distance on 0.01% type I collagen or 0.01% fibronectin was longer than that on $100{\mu}l/ml$ laminin-coated glass. The migration speed on fibronectin-coated glass was 68 micrometer/hour which was fastest. The migration speed on type I collagen-coated glass was similar with that on fibronectin-coated glass. The latter two migration speeds were faster than that on no-coated glass. On the other hand, the average migration speed on laminin-coated glass was 37micrometer/hour and not different from that of control group. In conclusion, the extracelluar matrix ligands such as type I collagen and fibronectin seem to play an important role in cell migration. The type I collagen or fibronectin coated scaffold is more effective for migration of osteoblast in tissue engineering process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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