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돼지 수정난의 초급속 동결 융해후의 생존성에 관한 연구 (Studies on the Survival Rates after Ultrarapidly Frozen-Thawing of Porcine Embryos)

  • 김상근;이봉구
    • 한국가축번식학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.125-131
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    • 1992
  • This study was carried out to investigate the effects of concentration and equilibration time of cryoprotective agents on the survival rate of slowly and ultrarapidly frozen porcine embryos. The porcine embryos following dehydration by cryoprotective agents and a various concentration of sucrose were directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water bath. Survival rate was defined as development rat to the morula and blastocyst stage after in vitro culture or by FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, or 4.0M glycerol was 65.3, 61.8, 64.3, 59.4 or 39.4%, respectively. Addition of 0.25M sucrose into the freezing medium containing 2.0M glycerol showed higher survival rate than those of 2.5~4.0M glycerol. 2. The survival rates of porcine embryos after ultraradpid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucroese added 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 or 4.0M DMSO was 65.6, 67.6, 68.6, 60.6 or 23.6%, respectively. However, addition of 0.25M sucrose into the freezing medium containing 3.0M DMSO showed higher survival rate than those of 2.0, 2.5, 3.5 or 4.0M DMSO. 3. The survival rates of porcine embryos after ultrapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 or 4.0M propanediol was 63.2, 60.3, 62.1, 52.3 or 24.3%, respectively. Addition of 0.25M sucroese into the freezing medium containing 2.0M propanediol showed higher survival rate than those of 2.5~4.0M glycerol. 4. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid frozen-thawing the freezing medium of 2.0M glycerol added 0.10, 0.25, 0.50 or 0.75M sucrose was 61.8, 70.8, 67.6 or 52.2%, respectively. Addition of 2.0M glycerol into the freezing medium containing 0.25M sucreose showed higher survival rate than that those of 0.10, 0.50 or 0.75M sucrose. 5. The higher suvival rate of porcine embryos were attained at short period of equilibration time 92.5~5min.) in the freezing medium added 0.25M sucreose and 3.0M compared to those of 10 or 20min. equilibration time in the same condition.

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철로 주변의 지하굴착 영향권에 관한 연구 (A Study on the Influence Area of Excavation around Railroads)

  • 박종수;장정욱;박춘식
    • 한국지반공학회:학술대회논문집
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    • 한국지반공학회 2006년도 춘계 학술발표회 논문집
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    • pp.1032-1037
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    • 2006
  • This thesis studied effects of the excavation around railroads on the deformation of the lateral ground and neighboring railroads. The conclusions of the study are as follows. 1. When the depth of excavationis 10m, the influential area should be 35m for soft clay, 20m for normal clay, 15m for hard clay, 15m for loose sand, 12m for slightly dense sand, and 8m for dense sand. 2. When the influential area is 10m, the allowable excavation depth should be 2.5m for soft clay, 4.8m for normal clay, 7.5m for hard clay, 7.2m for loose sand, 8.8m for slightly dense sand, and 10m for dense sand. 3. When the influential area is 20m, the allowable excavation depth should be 4.5m for soft clay, and up to 10m for the other five kinds of soil. 4. When the influential area is 30m, the allowable excavation depth should be 7.5m for soft clay, and up to 10m for the other five kinds of soil. 5. When the influential area is 35m, the allowable excavation depth should be up to 10m for all kinds of soil.

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담자균류의 효소에 관한 연구(I) -표고버섯 중의 광감응성 Mitochondrial $F_0F_1-ATPase$의 철이온 효과- (Study on the Enzyme of Basidiomycetes(I) -The Effects of Iron Ions on the Light-Induced Mitochondrial $F_0F_1-ATPase$ of Lentinus edodes-)

  • 민태진;이미애;배강규
    • 한국균학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.165-171
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    • 1993
  • 표고버섯 중의 광감응성 mitochondrial ATP synthase는 0.1 mM $Fe^{2+}$ 단독 이온에 의하여 그 활성이 대조구에 비해 102%, 증가되었으며, 반면 $Fe^{3+}$$Mg^{2+}$ 이온은 효소의 활성을 억제시켰다. 0.5 mM $Mg^{2+}$ 존재하에서 0.1 mM $Fe^{2+}$ 이온에 의한 이 효소의 활성은 32% 증가되었으며 0.5 mM $Mg^{2+}$ 존재하에서 $Fe^{3+}$ 이온효과는 단독 $Fe^{3+}$ 이온의 효과와 유사한 경향으로 효소의 활성을 저해하였다. 0.5 mM $Mg^{2+}$과 0.1 mM, 0.5 mM 및 1.0 mM $Fe^{3+}$ 이온의 공존하에서$Fe^{2+}$ 이온에 의한 효소의 활성은 모두 억제되었으며, 특히 0.5 mM $Mg^{2+}$과 0.1 mM $Fe^{3+}$ 이온의 공존하에서 5.0 mM $Fe^{2+}$ 이온에 의하여 53%의 억제현상을 나타내었다. 따라서 표고버섯 중의 광감응성 mitochondrial ATP synthase의 활성은 $Fe^{2+}$ 이온에 의하여 특이적으로 크게 증가되며, 이 효소에 대한 $Fe^{2+}$ 이온의 활성화 효과가 $Mg^{2+}$ 이온에 의하여 크게 영항을 받지 않으나, $Fe^{3+}$ 이온의 공존하에서는 억제됨을 알았다. 활성화 금속이온인 $Fe^{2+}$ 존재하에서 이 효소의 최적 pH는 7.6이며, 최적 온도는 $63^{\circ}C$이었다. 또한 이 효소는 금속 chelating agent인 EDTA에 의하여 효소의 활성이 상실됨으로써 metalloenzyme의 가능성을 제시하였다.

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Effects of High Glucose on Na,K-ATPase and Na/glucose Cotransporter Activity in Primary Rabbit Kidney Proximal Tubule Cells

  • Han, Ho-Jae
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제29권1호
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    • pp.69-80
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    • 1995
  • Renal proximal tubular hypertrophy and hyperfunction are known to be early manifestations of experimental and human diabetes. As the hypertrophy and hyperfunction have been suggested to be central components in the progression to renal failure, an understanding of their underlying causes is potentially important for the development of therapy. A primary rabbit kidney proximal tubule cell culture system was utilized to evaluate the possibility that the renal proximal tubular hypertrophy and hyperfunction observed in vivo in diabetes mellitus, can be attributed to effects of elevated glucose levels on membrane transport systems. Primary cultures of rabbit proximal tubules, which achieved confluence at 10 days, exhibited brush-border characteristics typical of proximal tubular cells. Northern analysis indicated $2.2{\sim}2.3$ and 2.0 kb Na/glucose cotransporter RNA species appeared in fresh and cultured proximal tubule cells after confluence, repectively. The cultured cells showed reduced Na/glucose cotransporter activity compared to fresh proximal tubules. Primary cultured proximal tubule cells incubated in medium containing 20 mM glucose have reduced ${\alpha}-MG$ transport compared to cells grown in 5 mM glucose. In the proximal tubule cultures incubated in medium containing 5 mM or 20 mM glucose, phlorizin at 0.5 mM inhibited 0.5 mM ${\alpha}-MG$ uptake by 84.35% or 91.85%, respectively. The uptake of 0.5 mM ${\alpha}-MG$ was similarly inhibited by 0.1 mM ouabain (41.97% or 48.03% inhibition was observed, respectively). In addition, ${\alpha}-MG$ uptake was inhibited to a greater extent when $Na^{+}$ was omitted from the uptake buffer (81.86% or 86.73% inhibition was observed, respectively). In cell homogenates derived from the primary cells grown in 5 mM glucose medium, the specific activity of the Na/K-ATPase $(6.17{\pm}1.27\;{\mu}mole\;Pi/mg\;protein/hr)$ was 1.56 fold lower than the values in cell homogenates treated with 360 mg/dl D-glucose, 20 mM $(9.67{\pm}1.22\;{\mu}mole\;Pi/mg\;protein/hr)$. Total $Rb^{+}$ uptake occurred at a significantly higher rate (1.60 fold increase) in primary cultured rabbit kidney proximal tubule cell monolayers incubated in 20 mM glucose medium $(10.48{\pm}2.45\;nM/mg\;protein/min)$ as compared with parallel cultures in 5 mM glucose medium. $Rb^{+}$ uptake rate in 5 mM glucose medium was reduced by 28% when the cultures were incubated with 1 mM ouabain. The increase of the $Rb^{+}$ uptake by rabbit kidney proximal tubule cells in 20 mM glucose could be attributed primarily to an increase in the rate of ouabain-sensitive $Rb^{+}$ uptake $(5\;mM\;to\;20\;mM;\;4.68{\pm}0.85\;to\;8.38{\pm}1.37\;nM/mg\;protein/min)$. In conclusion, the activity of the renal proximal tubular Na,K-ATPase is elevated in high glucose concentration. In contrast, the activity of the Nafglucose cotransport system is inhibited.

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Controlled Atmosphere (CA) 환경설정 해제 후 저온저장이 '후지' 과실의 품질에 미치는 영향 (Fruit Quality Characteristics of 'Fuji' Apple Fruits in Response to Air Storage after CA Storage)

  • 권헌중;최동근;이진욱;강인규
    • 원예과학기술지
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    • 제32권2호
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    • pp.178-183
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    • 2014
  • 본 연구는 '후지' 과실을 대상으로 저온저장(온도: $0{\pm}1^{\circ}C$)을 1개월 처리한 후 CA 저장(CA 저장 조건: $O_2$ $2.5{\pm}0.5$%, $CO_2$ $1.5{\pm}0.5$%, 온도: $0{\pm}1^{\circ}C$) 4개월 + 저온저장 3개월(CA 4M + Air 3M), CA 저장 5개월 + 저온저장 2개월(CA 5M + Air 2M), CA 저장 6개월 + 저온저장 1개월(CA 6M + Air 1M)로 처리하였고, CA 저장은 수확 후 즉시 처리한 다음 저장기간에 따라 과실 내부갈변증상과 과실품질에 미치는 영향을 조사하였다. 과실의 내부갈변 증상은 일반 CA 저장에서는 저장 4개월 후에 17.1%로 시작하여 저장 7개월 후에는 30.2%로 매우 높은 발생을 보였다. 그러나 CA 4M + Air 3M 처리구와 CA 5M + Air 2M 처리구는 과실 내부갈변증상이 전혀 나타나지 않았다. 각 처리별 호흡량의 변화는 저장 6개월까지는 차이가 없었고, 저장 7개월 후에는 CA 4M + Air 3M 처리구와 CA 5M + Air 2M 처리구가 낮은 호흡량을 보였다. 에틸렌 및 내생 에틸렌 발생량은 일반 CA 저장에서는 가장 낮았고, CA 환경해제기간이 빠를수록 다소 높은 발생량을 보였다. 과실품질에서 처리별 경도와 산 함량의 변화를 보면 일반 CA 저장에 비하여 CA 저장 4, 5, 6개월 후 저온저장처리간에는 차이가 없었다. 따라서 과실의 저장력 향상을 위하여 지속적인 CA 저장을 하기보다는 CA 저장 5개월 후에 환경설정을 해제하고 저온저장을 유지하여도 과실품질을 유지할 수 있었다.

Bacillus stearothermophilus 에서 부분 정제한 Cytosine Deaminase 의 특성

  • 장영채;이경형;김성영;조윤래;김종규
    • 미생물학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.305-309
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    • 1992
  • Bacillus stearothermophilus 의 cytosine deaminase (EC 3. 5. 4.1 )를 수율 52.7% 로 7.2배 부분정제했다. 부분정제된 cytosine deaminase 는 cytosine 을 유일한 기질로 이용하였으머 5-methylcytosine 과 5-fluorocytosine 은 기질고 이용되지 못햇으며 cytosine 에 대한 Michaelis 정수 Km 값은 5.9 mM 이었다. 본효소는 pH 4.0 에서 7.0 까지의 폭 넓은 pH 영역에서 안정했으며 80.deg.C 에서 10 분간 열처리하여도 75% 이상의 효소활성이 잔존하여 높은 내열성 효소였다. 본 효소의 반응최적 pH 는 7.0-7.5 였으며 반응 최적 온도는 35. 37.deg.C 였다. 그리고 Arrhenium plot 에 의하여 계산된 활성화 에너지 값(Ea value) 은 26 Kcal/mol 이었다. 본 효소는 중금속인 1 mM의 $Cd^{2+}$ , $Hg^{2+}$$Cu^{2+}$ 에 의하여 완정히 실활되었으며 GMP 와 CMP 에 의해서는 효소활성이 촉진되었다. 특히 본 효소는 p-chloromercuribenzoate 에 의하여 효소 활성이 강하게 저해되어 thiol 효소임을 추정할 수 있었다.

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Purification and Properties of Extracellular Cytosine Deaminase from Chromobacterium violaceum YK 391

  • Yu, Tae-Shick;Kim, Tae-Hyun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권2호
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    • pp.173-178
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    • 1999
  • The extracellular cytosine deaminase (EC 3.5.4.1) from Chromobacterium violaceum YK 391 was purified 264.7-fold with an overall yield of 14.3%. The enzyme was for the first time homogeneous by the criteria of polyacrylamide gel electrophoresis performed in the absence and in the presence of sodium dodecyl sulfate. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be about 156 kDa. The enzyme consisted of two identical subunits of approximate molecular weight 78 kDa. The isoelectric point of the enzyme was pH 5.55. The enzyme had a pH optimum of 7.5 and a temperature optimum of around 40 to $45^{\circ}C$. Besides cytosine, the enzyme deaminated 5-fluorocytosine, cytidine, 5-methylcytosine, and 6-azacytosine, but not 5-azacytosine. The extracellular cytosine deaminase is believed to be unique because it was active not only on cytosine but also on cytidine. The apparent $K_m$ values for cytosine, 5-fluorocytosine, cytidine, and 5-methylcytosine were determined to be 1.55 mM, 5.52 mM, 10.4 mM, and 67.2 mM, respectively. The enzyme activity was strongly inhibited by heavy metal ions such as $Fe^{2+},Pb^{2+},Cd^{2+},Zn^{2+}, Hg^{2+}, and Cu^{2+}$ at 1 mM, and completely by $\alpha,\alpha$'-dipyridyl, and $\rho$-chloromercuribenzoate at 1 mM, and weakly inhibited by 1mM ο-phenanthroline. The enzyme activity was not affected by various nucleosides and nucleotides.

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예천온천지구내 온천공간 수위간섭을 고려한 적정양수량 평가 (The Evaluation of Safe Yield Considered Interference Drawdown between Hot Spring Wells at Yecheon Hot Spring Area)

  • 이철우
    • 지질공학
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    • 제17권3호
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    • pp.405-409
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    • 2007
  • 예천온천지구에는 5개 온천공이 개발되어 있으며, 온천공들간의 거리는 약 $159.0m{\sim}702.6m$정도이다. 온천조사시 적정양수량 평가에 있어서는 각 공에 대한 적정양수량을 평가한 후 온천공간 수위간섭을 고려하여 적정양수량을 조절하도록 되어있다. 2호공과 5호공의 공간 거리는 약 159 m로서 5개 공중 가장 가깝게 위치하고 있으며, 양수시험시 이들간의 수위간섭 현상도 매우 크게 발생하였다. 5호공에서 3일간 양수시 5호공 자체의 수위강하는 17.21 m 이었으며, 2호공의 수위강하 역시 16.67 m로 두 공간에는 약 0.54 m 정도의 차이만을 보였다. 따라서 온천공간 영향의 정도는 약 97%로 매우 높았으며, 적정양수량도 당초 $750m^3/day$에서 $24m^3/day$로 감하였다. 또한 이와 같이 두 공간에 영향이 심한 원인은 대수층이 1.5차원에 기인한 것으로 해석된다.

양액 농도에 따른 방울토마토 2화방 개화묘의 소질 및 과실 생산성 (Quality and Fruit Productivity of the Second Truss Blooming Seedlings Depending on Concentration of Nutrient Solution in Cherry Tomato)

  • 이문행
    • 생물환경조절학회지
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    • 제31권3호
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    • pp.230-236
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    • 2022
  • 이번 연구는 효과적으로 2화방 개화묘를 생산하여 조기에 토마토를 수확하고 수확 기간을 연장하기 위하여 적절한 양액 농도 관리방법을 구명하기 위해 실시되었다. 처리는 양액 농도로 1줄기 2화방 개화묘 연구에서는 양액 EC를 1.5, 2.0, 2.5dS·m-1, 동적 관리(3.0 → 3.5 → 4.5dS·m-1)로 공급하였다. 육묘기간은 65일로 관행묘에 비해 20-40일, 1화방 개화묘(큐브 육묘)보다는 10일 정도 길었다. 초장은 EC 2.5dS·m-1와 동적 관리는 각각 78, 77cm로 EC 1.5dS·m-1처리 88cm보다 짧았다. 정식 전 큐브 내 EC는 동적 관리가 EC 5.5dS·m-1로 가장 높았으며, EC 1.5dS·m-1로 공급한 큐브는 3.0dS/m으로 가장 낮았다. 2화방 개화묘에서 EC 처리 간 생산량 차이는 나타나지 않았으나 1화방 개화묘는 2화방 개화묘보다 생산성이 떨어졌다. 2화방 개화묘는 첫 수확일이 6월 4일로 정식 후 35일만에 수확하였으며 1화방 개화묘는 6월 11일로 42일만에 수확하였다. 절곡에 의한 초장 및 뿌리 생육의 차이는 나타나지 않았다. 2줄기 2화방 개화묘 생산 연구에서는 공급 양액 EC를 2.0, 2.5, 3.0dS·m-1, 동적 관리(3.0 → 3.5 → 4.5dS·m-1)로 하여 공급하였다. 육묘 기간은 90일로 관행묘에 비해 40-50일, 1화방 2줄기 개화묘(큐브 육묘)보다는 10일 정도 길었다. 초장은 공급 양액 EC 2.0dS·m-1에서 80cm, 2.5dS·m-1에서는 81cm였으며 3.0dS·m-1 처리에서는 75cm, 동적 관리에서는 73cm로 가장 짧았다. 배지 내 EC는 모든 처리에서 육묘 기간이 길어질수록 높아졌으며 특히 공급 EC가 가장 높았던 동적관리 처리에서 EC 5.1dS·m-1로 가장 높았다. EC 처리 간 생산량 차이는 나타나지 않았으나 육묘 기간이 10일 정도 길었던 2화방 개화묘가 1화방 개화묘보다 15% 정도 생산량이 많았다. 2화방 개화묘의 초장을 짧게 만들기 위해서는 가식 후 공급 양액 농도를 높이는 방법이 가장 효율적인 방법으로 판단된다.

콩나물의 성장과 Vitamin C 생성에 미치는 Kinetin과 Auxin의 혼합효과 (The Combination Effect of Kinetin and Auxin on the Growth Root Development and Vitamin C Content of Soybean sprouts)

  • 김상옥
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.37-41
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    • 1982
  • 콩나물의 성장과 vitamin C의 효과적인 hormonal regulation을 위하여 IAA와 2,4-D 및 NAA등의 auxin과 kinetin과의 농도별로 혼합처리한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 콩나물의 성장은 kinetin $10^{-8}M+IAA\;10^{-6}M$, kinetin $10^{-7}M+IAA\;10^{-5}M$, kinetin $10^{-6}M+IAA\;10^{-6}M$, 및 kinetin $10^{-5}M+IAA\;10^{-7}M$에서, 그리고 kinetin $10^{-8}M+2,4-D\;10^{-8}M$, kinetin $10^{-7}M+NAA\;10^{-5}M$에서 각각 양호하였다. 2. 콩나물 뿌리의 생성은 kinetin과 auxin의 농도별에 따른 콩나물 성장과 거의 일치하였다. 3. vitamin C의 함량은 kinetin $10^{-8}M+IAA10^{-8}M$, kinetin $10^{-6}M+2,4-D10^{-5}M$ 및 kinetin $10^{-8}M+NAA10^{-8}M$에서 높았으며 성장과 vitamin C의 함량이 동시에 양호한 것은 kinetin $10^{-8}M+IAA10^{-6}M$$10^{-8}M+NAA10^{-8}M$이었다. 4. kinetin의 농도가 낮고 IAA와 NAA의 농도가 높을수록 콩나물의 성장과 뿌리의 발육이 양호하였고 vitamin C의 함량도 높았으며 kinetin의 농도가 낮고 2,4-D의 농도가 높을수록 뿌리의 발육이 불량함과 동시에 배축의 vitamin C 함량이 저하하였다.

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