Kim, Yong;Kim, Han Gyung;Han, Sang Yun;Jeong, Deok;Yang, Woo Seok;Kim, Jung-Il;Kim, Ji Hye;Yi, Young-Su;Cho, Jae Youl
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.21
no.5
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pp.547-554
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2017
Previous studies have demonstrated the role of hydroquinone (HQ), a hydroxylated benzene metabolite, in modulating various immune responses; however, its role in macrophage-mediated inflammatory responses is not fully understood. In this study, the role of HQ in inflammatory responses and the underlying molecular mechanism were explored in macrophages. HQ down-regulated the expression of interferon $(IFN)-{\beta}$ mRNA in LPS-stimulated RAW264.7 cells without any cytotoxicity and suppressed interferon regulatory factor (IRF)-3-mediated luciferase activity induced by TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-${\beta}$ (TRIF) and TANK-binding kinase 1 (TBK1). A mechanism study revealed that HQ inhibited IRF-3 phosphorylation induced by lipopolysaccharide (LPS), TRIF, and AKT by suppressing phosphorylation of AKT, an upstream kinase of the IRF-3 signaling pathway. IRF-3 phosphorylation is highly induced by wild-type AKT and poorly induced by an AKT mutant, AKT C310A, which is mutated at an inhibitory target site of HQ. We also showed that HQ inhibited IRF-3 phosphorylation by targeting all three AKT isoforms (AKT1, AKT2, and AKT3) in RAW264.7 cells and suppressed IRF-3-mediated luciferase activities induced by AKT in HEK293 cells. Taken together, these results strongly suggest that HQ inhibits the production of a type I IFN, $IFN-{\beta}$, by targeting AKTs in the IRF-3 signaling pathway during macrophage-mediated inflammation.
The neuropeptide substance P(SP) has been recognized to modulate immune systems, with close proximity between peptidergic sensory nerve endings and immune cells. These include the macrophage and neutrophil activation, IL-2 production in T cell, augmentation of Ig synthesis, mast cell degranulation, $PGE_2$ and collagenase secretion in synoviocytes. In this study I examined SP-induced various biological activities such as antimicrobial action, cytokine production, and mast cell degranulation in the presence or absence of other inflammatory cell activators. Antimicrobial studies showed that undifferentiated HL-60 cells were not affected by SP. However, SP significantly enhanced antimicrobial action of TPA-treated or dbcAMP-treated HL-60 cells which had been differentiated into PMN or macrophage/monocyte. I could not find synergistic relationship between SP and LPS in parallel experiments of the above. SP did not induce IL-l production from murine macrophage cell line RAW264.7 whether costimulated with LPS or not. Mast cell degranulation was occured only when stimulated with high dose ($10^{-5}M$) of SP and the degree of this activation was slightly reduced by simultaneous application of $MIP-1{\alpha}$. In addition, CGRP which is known to be a common coexisting neuropeptide with SP within specific fibers did not augment the function of SP on mast cell degranulation. These results suggest that immunoregulatory activities of SP could be mediated through direct upregulation of various functions of immune cells and also upregulation of responsiveness of immune cells to other immune activators.
Cho, Chang-Won;Rhee, Young Kyoung;Lee, Young-Chul;Kim, Young-Chan;Shin, Kwang-Soon;Nam, So-Hyun;Hong, Hee-Do
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.2
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pp.238-242
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2014
In this study, the immunomodulatory activities of crude polysaccharides from makgeolli were investigated. Crude polysaccahrides from makgeolli (RWW) were isolated by hot water extraction ($100^{\circ}C$, 30 min), ethanol precipitation (four volumes of 95% ethanol), dialysis (MWCO: 6,000~8,000), and lyophilization. The major constituents in RWW were neutral sugar (87.3%), uronic acid (2.5%), and protein (10.2%). RWW showed potent anti-complementary activity as well as increased cell proliferation of RAW 264.7 macrophages. The immunomodulatory effects of RWW were also analyzed based on cytokine production of macrophages. Macrophages stimulated with RWW produced cytokines such as interleukin (IL)-6, IL-12, and tumor necrosis factor-${\alpha}$ in a dose-dependent manner. These data indicate that RWW may have immunomodulatory effects through activation of the complement system and macrophages, which are a part of natural immunity.
Yang, Jiwon;Jeon, Hyelin;You, Yang Hee;Kim, Jin Young;Choi, Hyo-Kyoung;Choi, Kyung-Chul;Jun, Woo Jin;Yoon, Ho-Geun
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.9
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pp.1256-1263
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2015
Citrus junos Sieb. ex Tanaka has been traditionally called Yuza in Korea and is used as a cuisine material or tea as well as medicinal herb. In this study, we evaluated the immune-enhancing effect of Citrus junos ethanol extract (CJE) on RAW264.7 mouse macrophage and primary immunocytes. CJE treatment showed increased macrophage activity in a dose-dependant manner. CJE also enhanced natural killer (NK) cell activity. We measured lactate dehydrogenase (LDH) level as a measurement of NK cell cytotoxicity against YAC-1 lymphoma cells. CJE treatment showed an increased LDH level in a dose-dependent manner. Finally, we evaluated the effect of CJE on mouse primary splenocyte proliferation. CJE treatment slightly increased splenocyte proliferation compared to the control. The results of this study suggest that CJE can help immune function via macrophage cytokine production, increased NK cell activity, and splenocyte proliferation.
The purpose of this study is to observe the effect of bovine colostral whey fractions on proliferation of Th1 cells and to verify the effect of whey fractions that are directly related to growth of Th1 cells on macrophages activation. Whey was fractionated into 3 fractions depending on by ultrafiltration (fraction (Fr.) I; molecular weight (Mw.) 10 kDa and more, Fr. II; Mw. $1\;kDa{\sim}10\;kDa$, Fr. III; Mw. less than 1 kDa) and examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Fr. II stimulated and proliferated Th1 cells most at 1 mg/mL concentration and the percentage of cell proliferation was 67.1%. The secretive induction of tumor necrosis $factor-{\alpha}$$(TNF-{\alpha})$ by whey, Fr. II, protein fraction (Fr. P) and oligosaccharide fraction (Fr. O) after fractionating Fr. II into Fr. P and Fr. O on the basis of Th1 cells growth was that Fr. O had more 80% secretive induction of $TNF-{\alpha}$ than that of $1\;{\mu}g/mL$ lipopolysaccharide that was positive control. So confirmed that Fr. O induced $TNF-{\alpha}$ secretion by activating macrophages.
The purpose of this study was to investigate the antioxidant and anti-inflammatory activities of hot water (AMPW) and 70% ethanol (AMPE) extracts of apple mango (Mangifera indica L.) peel. The antioxidant activities were measured using a total polyphenol, electron-donating, 2,2'-azinobis [3-ethylbenzothiazoline6-sulfonic acid] (ABTS) radical scavenging assay. The total polyphenol content of AMPW and AMPE was 66.08 ± 0.62 mg TAE/100 g and 100.13 ± 0.23 mg TAE/100 g, respectively. As a result of measuring the electrondonating ability, at a concentration of 1,000 ㎍/ml, AMPW and AMPE showed an effectiveness of 86% and 94%, respectively. The ABTS assay showed 80% and 98% respective radical scavenging activity for AMPW and AMPE, at a concentration of 1,000 ㎍/ml. The cell viability on macrophage cells was performed using a 3-[4,5-dimethyl-thiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide (MTT) assay, and the results showed more than 90% cell viability at a 100 ㎍/ml concentration. Anti-inflammatory activity was verified by confirming nitric oxide (NO) production inhibitory activity, inducible nitric oxide synthase (iNOS), and cyclooxygenase-2 (COX-2) protein and mRNA expression inhibitory activity from lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 cells. The NO production inhibitory effects were measured using the Griess assay, which confirmed 45% and 40% inhibition after treatment with AMPW and AMPE, respectively. Moreover, the protein and mRNA expression of inflammatory-related factors iNOS and COX-2, decreased in a concentrationdependent manner. In conclusion, this study showed antioxidant and anti-inflammatory effects of Mangifera indica L. peel and revealed its promising potential for application as an antioxidant and anti-inflammatory agent.
Hyaluronic acid from Liparis tessellatus eggs (HALTE) was grafted with caffeic acid (CA-g-HALTE), ferulic acid (FA-g-HALTE), gallic acid (GA-g-HALTE), and nisin (Nisin-g-HALTE) and investigated for their anti-inflammatory and antioxidant potential in lipopolysaccharides-stimulated RAW 264.7 mouse macrophages. Nitric oxide (NO) generation and prostaglandin E2 activity were measured after treatment with the grafted HALTE samples. All grafted HALTE samples exhibited more antioxidant activity against 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radicals than 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radicals. Nisin-g-HALTE showed the least antioxidant activity. Additionally, the NO assay results showed that all grafted samples had no cytotoxic effect on RAW 264.7 macrophages and reduced macrophage activity after treatment. The most effective concentrations of CA-g-HALTE and FA-g-HALTE were found to be above 100 ㎍/mL. Increased sample concentration resulted in increased activity except with Nisin-gHALTE at 100 ㎍/mL. CA-g-HALTE, FA-g-HALTE, GA-g-HALTE, and Nisin-g-HALTE were found to have antioxidant and anti-inflammatory potential, which can be further explored for use in food, cosmetic, nutraceutical, and biomedical applications.
This study aimed to confirm the possibility of being used as a cosmetic material material through the verification of the whitening and anti-inflammatory activities of an ethyl acetate fraction from Glechoma hederacea var. longituba (GHEA). The observed electron donating and ABTS+ radical scavenging abilities of GHEA were 89.6% and 88.7%, respectively, at 1,000 ㎍/ml concentration, with a tyrosinase inhibitory effect of 22.3% at the same concentration. For cell viability, a rate of 80% or more was observed in all concentrations that treated GHEA on melanoma and macrophage cells. Protein and mRNA expression inhibition was measured by Western blot and RT-PCR for 25, 50, and 100 ㎍/ ml concentrations, and it was confirmed that expression decreases in a concentration-dependent manner as GHEA concentration increases. The inhibition of the whitening-related factors MITF and TRP-2 were superior following GHEA treatment than those of the control group treated with kojic acid of 100 ㎍/ml concentration. For tyrosinase, the lowest mRNA expression rate was 29.1% at 100 ㎍/ml which confirmed excellent inhibition. In analyzing the effects of pro-inflammatory cytokines IL-1β, IL-6, and TNF-α on protein and mRNA expression, IL-6 and TNF-α showed high protein and mRNA inhibition compared to a vitamin C control group. Based on these experimental results, GHEA could be applied as a natural cosmetic material.
In situ recovery of recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) was performed in transgenic Nicotiana tabacum cell suspension cultures. Aqueous two-phase systems (ATPS) were used to utilize its biocompatibility. Transgenic plant cells could be grown up to 15.7 g/L in normal medium and 18.6 g/L in ATPS composed of 6% (w/w) polyethylene glycol (PEG) 20,000 and 10% (w/w) dextran 2,000,000. It was proved that the A TPS was not harmful to cell growth. In addition, It is expected to recover hGM-CSF simultaneously with cell growth. Using this method, maximum hGM-CSF concentration at 1.64 ng/mL was obtained on day 3.
Ullah, HM Arif;Kim, Tae-Hwan;Saba, Evelyn;Kim, Sung Dae;Rhee, Man Hee
Biomedical Science Letters
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v.27
no.2
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pp.51-58
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2021
Korean red ginseng (Panax ginseng Meyer) is a well-known traditional medicine, with numerous biological functions in the body. Portulaca oleracea (P. ole) belongs to the Portulacaceae family and has bioactive potential as a traditional medicine. This study aimed to determine the anti-inflammatory effects of Korean red ginseng extract (RGE) and P. ole extract on lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 cells. The combination of RGE (50 ㎍/mL) and P. ole (6.25 ㎍/mL) extracts significantly suppressed LPS-induced nitric oxide synthesis. The expression of proinflammatory mediators, including inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), and proinflammatory cytokines, including interleukin-1β, interleukin-6, and tumor necrosis factor-α, were markedly decreased by the combined treatment with RGE (50 ㎍/mL) and P. ole (6.25 ㎍/mL). Moreover, iNOS and COX-2 protein expression levels were also significantly reduced in the combined treatment compared to the LPS-stimulated group. In addition, the nuclear translocation of phosphorylated nuclear factor kappa-B was suppressed by the treatment with RGE and P. ole. Moreover, the mitogen-activated protein kinase pathway was also partially inhibited by the combination treatment with RGE and P. ole. Our results demonstrate that the treatment mixture with RGE and P. ole could be used as functional food and therapeutic herbal medicine in various inflammatory diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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