Lyophyllum decastes has been used for culinary purpose. The present study was conducted to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory effects from methanol, acetone, and hot water extracts of L. decastes fruiting bodies. The acetone and methanol extracts showed the higher 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazy radical scavenging activities than that of the hot water extract at 0.5-2.0 mg/mL and was comparable to the BHT, the positive control. The ferrous ion chelating effects of the mushroom extracts at 0.5-2.0 mg/mL were significantly higher than that of BHT. The reducing power of acetone extract (2.12) was significantly lower than that of BHT (2.73) at 2.0 mg/ mL. The mushroom extracts also showed inhibitory effects on production of nitric oxide (NO), and expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide-induced murine macrophage cells in a concentration dependent manner. In vivo anti-inflammatory experiment on carrageenan-induced hind-paw edema of rat model, the acetone extract of the mushroom significantly suppressed the carrageenan-induced rat hind paw edema of rats in a dose dependently. The results suggest that the fruiting bodies of Lyophyllum decastes are a good natural resource of antioxidant and anti-inflammation.
To elucidate action mechanism of lyophyllan A, an antitumor polysaccharide of Lyophyllum decastes, its immunological activities were examined. Lyophyllan A increased significantly the weights of spleen and liver of mice. Lyophyllan A also restored the decreased thymic weight in tumor-bearing mice. It did not show any direct cytotoxicity against tumor cells, but showed immunopotentiating activities by increasing the number of the plaques in hemolytic plaque assays. Lyophyllan A increased the number of peritoneal exudate cells (PEC) and inhibited the growth of sarcoma 180 mixed with PEC. Moreover the macrophages from lyophyllan A-treated mice exhibited a strong cytotoxic activity towards L5178Y target cells.
To find antitumor components of Lyophyllum decastes, the mycelia of L. decastes were cultured in artificial media and a new antitumor component which showed potent antitumor activity against sarcoma 180 implanted in mice, was isolated and named 'Lyophyllan A'. Lyophyllan A was composed of a polysaccharide moiety (86%) and a protein moiety (2%). The polysaccharide moiety was found to be a heteroglycan which consisted of glucose (48.1%), mannose (30.8%), galactose, xylose and fucose. The protein moiety contained 18 amino acids. Cultural characteristics of L. decastes were investigated by shake culture method. The best result was obtained when L. decastes was cultured in medium glucose 50g, peptone 10g, corn steep liquor 30ml, $KH_2PO_4$ 0.87g, $MgSO_4$$7H_2O$ 0.5g, $CaCl_2$ 0.3g, $FeSO_4{\cdot}7H_2O$ 10mg, $MnCl_2{\cdot}4H_2O$ 7mg, $ZnSO_4{\cdot}7H_2O$ 4mg and $CuSO_4{\cdot}5H_2O$ 1mg per one liter at $26^{circ}C$, 180rpm, for 9 days.
Kim, Hye-Ryoung;Shim, Mi-Ja;Kim, Jung-Woo;Kim, Ha-Won;Lee, Chong-Ock;Choi, Eung-Chil;Kim, Byong-Kak
생약학회지
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제15권2호
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pp.61-73
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1984
To investigate antitumor component of Lyophyllum decastes, the aqueous extract of its shake-cultured mycelia was subjected to antitumor test against sarcoma 180 cells implanted in ICR mice. The extract showed an inhibition ratio of 65.4% and was found to consist of a polysaccharide moiety and a protein moiety. After purification with DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography, Fraction D showed the highest inhibition ratio of 75.7%. The antitumor constituent was examined for immunoaccelerating activity and was found to increase macrophage accumulation in the peritoneal cavity and plaque forming cells of the spleen cells. It was named lyophyllan after the genus name.
In order to explore mycelial growth and fruiting body formation of Lyophyllum decates on different media, ten cultivation media by using cottonseed hull, sawdust, corn cob etc. as main components were designed for seven strains. The results showed that the mycelial colour of all strains are mainly snow-white, and the formula of media using corn cob as main materials was better than that using cottonseed hull and sawdust for mycelial growth, but no fruiting body was formed. The cottonseed hull medium with a small amount of sawdust, plant leaves, humus or fermented material and wheat was beneficial for fruiting formation. The incubation period for fruiting formation of strain 3001 was 108 days and the highest yield was-214.80 g/bag. Fructification of the strains tasted occurs successively in order of 3001, 1035, 1004 and 1013. It was concluded that different medium composition had significant effect on the mycelial growth and fruiting body formation.
잿빛만가닥버섯의 인공재배법을 개발하고자 국내 외에서 수집한 균주의 균사배양 특성을 검정하고 자실체 발생을 위한 다양한 재배방법을 구명하였다. 잿빛만가닥버섯 9균주를 공시하여 선발한 결과는 다음과 같다. 균사생장속도가 빠르고 균사밀도가 양호한 SPA 202 및 SPA 205균주를 선발하였으며 선발배지는 BC배지가 가장 양호하였다. 인공재배시 참나무톱밥과 포플러톱밥이 균사생장속도가 가장 빠르고 균사밀도가 가장 치밀하였으며 최적배지는 발효톱밥을 사용한 참나무톱밥(Quercus aliena)40%+포플러톱밥(Populus deltoides)40%+미강(Rice bran)10%+밀기울(Wheat bran)10% 배지로서 이 때균사배양적온은 $20-25^{\circ}C$이며 배양기간은 접종 후 50일, 복토 후 7일이 소요되었으며, 원기형성 및 자실체생육기간은 $17-18^{\circ}C$에서 각각 10~11일, 7~8일이 소요되었다. SPA 202균주의 수확적기의 자실체는 갓의 직경이 60mm, 대의 길이가 67mm이며, 수량은1,100ml병당 130g이었으며 SPA 205균주의 수확적기의 자실체는 갓의 직경이 51mm, 대의 길이가 81mm, 129g이었다. 잿빛만가닥버섯 인공재배 결과, 배지는 발효톱밥 처리구가 미발효톱밥 처리구보다 수량이 많아 SPA 202균주와 SPA 205균주가 가장 양호한 균주로 선발되었다.
담자균류인 잿빛 만가닥버섯 Lyophyllum decastes은 이미 항암작용이 있다고 보고된 바, 이 버섯의 유전연구와 균주개발을 위해 기초적 연구인 원형질체 분리와 재생에 관하여 실험하였다. 원형질체 분리의 최적 조건으로는 여러 효소의 혼용보다 Novozym 234(10 mg/ml)를 단용하였을 때 더 우수하였고, 삼투압 안정제로 0.6 M $MgSO_4$에서 효과적이었으며, $24^{\circ}C$ 에서 5일 배양한 균사와 효소액을 4시간 반응 시켰을 때 수득율이 높았다. 완충용액과 pH는 Na-phosphate buffer(pH 4)에서 원형질체 분리가 양호 하였으며, 고체배지보다 액체배지에서 자란 균사를 완충용액과 pH를 조절하지 않은 상태에서 효소와 반응시켰을 때 $12.5{\times}10^6\;cell/ml$로 높았다. 원형질체 재생시 균사가 배지 전면에 확산되어 성장하여 성장억제제로 Triton X-100(0.0025%)을 사용하였다. 원형질체 분리시와는 대조적으로 0.6M sucrose와 mannitol에서 재생이 효율적이었고, 각각 8.32%와 5.94%의 재생 빈도를 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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